(铜仁职业技术学院 贵州 554300)
从目前情况来看,对银杏的开发而得到的提取物是一种天然植物制剂。银杏叶的活性包括多种,最为主要的就是黄酮类以及多糖类物质,其表现功效是有抗氧化等。比如说,其可以对各个器官或者是中枢神经起到一定的保护作用,另外,对于肿瘤还有其他疾病也有治疗效果。目前很多资料表明,GBLP具有生物学功能、药物功能,所以说对其开发潜力巨大。在多糖的提取中,方法是多样的,我们最常见到的就是蒸馏法、超声提取等。超声提取主要是通过高频次的振动对细胞组织破坏,这种方法效率非常高。酶提取方法也是常见的一种,这种方法主要是通过酶反应进行提取有效物质。糖类物质的分子质量大,因此不能使用一般的方法。同时,多糖的生物活性和分子质量、基数等因素相关。
银杏叶多糖主要是从其叶片、果和外种皮中提取而得。目前植物多糖已被大量应用在保健食品和化妆品等行业中,以银杏多糖为代表,因其特有的药理作用如:抗肿瘤、调节免疫、抗氧化、降血脂等。银杏叶多糖,是从干燥银杏叶片中提取出的多糖物质,最常用的提取方法为水提醇沉法,对酶解法提取银杏叶多糖进行了初步研究,这次主要采取的是纤维素酶法结合的方法,首先需要银杏叶粉10克,将其按照1:15加入到蒸馏水中,容器含量不能少于250mL。50℃恒温振荡2h后,加入0.5%纤维素酶(以银杏粉重量为准),同时,还需要调节pH值,大概在4.5,将其酶解50min,将剩余的药渣再放入50mL的蒸馏水中,这种方法可以多次使用,从而提取溶液。提取后再进行乙醇沉淀,得银杏叶多糖,其提取率为1.67%,并证实纤维素酶法与水提法比较,提取量更高。
对于银杏叶多糖的提取,最主要的是采取超声波方法,这种方法主要是采用810瓦的功率,用超声将其处理20min,再添加0.75%的纤维素酶,沉淀冷冻干燥后得银杏叶粗多糖,其提取率为12.2%。影响银杏叶多糖提取率的主要因素有:破碎粒度、料液比、温度、提取时间、超声功率、酶用量和提取次数等。使用不同的提取方法,银杏叶多糖含量也不尽相同。如果使用水提醇沉法,得到的多糖和含量为12.58%,5.69%;如果使用酶法,水体醇沉法得到的含量则为14.12%和6.82%;使用微波-水提沉法得到的含量为13.31%和6.15%。GBLP也有一定的抗肿瘤效果,将它和其他抗肿瘤药物进行比较,GBLP是没有副作用的,还可以改善肌体的新陈代谢和增强自身的免疫力。GBLP和它的溶液还可以对肝脏进行排毒,也有抗氧化及抗炎的作用。
图1 时间的影响
在多糖的提取中,被浸提取物和提取的料液还没有达到平衡之前,如果时间越长,其产率也会随之上升。换句话说,就是在料液相同的情况下,如果被浸时间越长,GBLP的产率也就会随之增加。在进行相关实验的时候,可以将时间进行设定,可以设置为1h、2h等,然后再对GBLP的浓度进行提取。我们由图1可以发现,被浸时间从1h到3h,GBLP的浓度刚开始在300.75微克到471.55微克,产率明显增加;在后期的3h到4h之间,产率也是增加。我们可以得出,在3h阶段,提取的多糖是最佳时间。
我们知道,在热作用下,分子的运动也会不断的加速,从而使细胞内的多糖浸出。另外,热作用会使银杏叶细胞壁的组织破坏掉,这样也会使多糖更容易浸出。在本次的试验中,相关人员可以将温度设定为70℃、80℃,以此类推。可以观察图2,随着温度的不断上升,银杏叶多糖的产量也在不断的上升,在70℃上升至80℃时,银杏叶多糖的产量由319.32微克上升到450.02微克,GBLP产率明显增加。在温度为80℃到90℃时,产率增加了4.54%,从90℃到100℃时,浓度则会逐步下降,此项研究我们可以知道,在温度为80℃时,GBLP是最佳温度。
图2 温度的影响
在此次研究中,料液设定为1:10、1:20等,提取到的多糖浓度见图3,料液在1:10到1:30的时候,银杏叶多糖的浓度从341.6微克增加到了376.75微克,可以看出得出的浓度明显提升,这主要是由于随着料液浓度的增加,银杏叶细胞内的多糖浓度差就越大,得到的多糖也就越多。当料液在1:30到1:40的时候,多糖浓度也是增加的,但是此次增加的比较少,产率只增加了2.18%。这次研究可以得出,料液浓度在1:30的时候,GBLP的产率会比较高。
图3 料液比的影响
图4 破碎程度的影响
综上,本次研究分析中,银杏叶的料液配比应设置到1:30,温度应该设置到80℃,银杏叶的破碎程度应该设置到80目,将提取时间设置为3h,提取次数为两次,采取水提醇沉法工艺,用活性炭对银杏叶多糖进行纯化,此方法可以得到更多的GBLP产率。这种方法实用性强且安全率更高,同时也适用于大规模的生产,希望本次研究可以对银杏叶多糖提取起到一定的借鉴,从而促使整个行业的健康发展。