辽宁省兽类新纪录——远东鼩鼱（Sorex isodon Turov，1924）

青 娇， 蒋海军， 王旭明，， 唐刻意， 王 琼， 刘少英， 陈顺德*

（1.四川师范大学 生命科学学院，四川 成都610066； 2.四川省林业科学研究院，四川 成都610081）

远东鼩鼱（Sorex isodon Turov，1924）属于劳亚食虫目（Eulipotyphla）鼩 鼱科（Soricidae）鼩 鼱 属（Sorex），模式标本产地在俄罗斯的索索夫卡河.该物种的分布范围横跨亚欧大陆，从斯堪的纳维亚延伸到太平洋（堪察加半岛、库页岛和朝鲜半岛），在我国仅分布于黑龙江省和内蒙古自治区［1］.1978年，Corbet［2］根据其体型、毛色及头骨形态等特征，认为远东鼩鼱为陕西鼩鼱（Sorex sinalis）的同物异名.Hoffmann［3］发现远东鼩鼱体型较陕西鼩鼱小，颅骨更窄，吻更短，尾长占体长比例小，且两者的发现地相距超过2 000 km，从而支持远东鼩鼱的物种地位.

2018年10月，运用陷阱法于辽宁省新宾县（东经125°24′24″，北纬41°36′11″，海拔537.52 m）捕获15只鼩鼱，如图1，其中，黑色三角形代表本次研究所用标本发现的地点，I点代表黑龙江省漠河县，H点代表新纪录的辽宁省新宾县，黑色圆点A-G点代表其他已知分布点.经形态和分子鉴定，证实它们均为远东鼩鼱.这批标本的头骨、皮毛和组织样品现保存于四川师范大学动物标本室.另外，选取2号黑龙江漠河标本用于远东鼩鼱皮毛变异研究，这2号标本现馆藏于四川省林业科学研究院.

图1 远东鼩鼱在中国的分布图Fig.1 Current distribution of the Sorex isodon in China

1 材料与方法

1.1 形态学测量方法 对野外采集到的鼩鼱标本进行外形测量.首先用电子天平（精确度为0.01 g）称量标本的体质量，再用游标卡尺（精确度为1 mm）测量标本的体长、尾长.标本带回实验室后，从15号标本中选取5号完整的标本（样品原始编号 为SCNU01496、SCNU01552、SCNU01597、SCNU01599、SCNU01612）制成剥制标本和头骨标本，用游标卡尺（精确度为0.01 mm）进行头骨测量.本研究的测量方法主要参照文献［4-6］，共测量9个头骨数据，包括颅全长（Condylo-incisor length，CIL）、眶间宽（Interorbital breadth，IOB）、头骨宽（Cranial breadth，CB）、颚骨宽（Maxillary width，MW）、颚骨-门齿间距（Palate-incisol length，PIL）、上齿列长（Upper tooth row length，UTRL）、第二上臼齿宽（M2to M2breadth，M2-M2）、下颌长（Mandible length，ML）、下齿列长（Lower tooth row length，LTRL）.

1.2 分子分析 本研究扩增了这5号完整标本的Cyt b基因序列（原始编号为SCNU01496、SCNU01552、SCNU01597、SCNU01599、SCNU01612，NCBI编号依次为MN877165-MN877169）以及2条黑龙江标本的Cyt b基因序列（编号为SAF09899、SAF09923，NCBI编 号 依 次 为 MN877163、MN877164）.利用基因组DNA试剂盒提取样品的总DNA，再根据聚合酶链式反应（PCR）扩增样品的Cyt b基因序列.PCR反应体系为25μL：Tap PCR PreMix 12.5μL，引物各1μL，模板DNA 1μL，ddH2O加至25μL，此次所用引物为L14724＿hk3和H15915＿hk3［7］.扩增程序为94℃预变性5 min；94℃变性40 s，49℃退火45 s，72℃延伸1.5 min，合计40个循环；72℃10 min；最后4℃保存［8-9］.PCR产物经过电泳检验后交由成都擎科生物公司测序，测序结果在NCBI上进行Nucleotide BLAST.

从Genbank上下载2条远东鼩鼱的Cyt b序列（AB028500为俄罗斯样本、JX465364为内蒙古自治区样本），以及与其同属的栗齿鼩鼱（Sorex daphaenodon）、扁颅鼩鼱（Sorex roboratus）Cyt b序列各4条，并选择与鼩鼱属亲缘关系较近的甘肃川鼩（Blarinella griselda）Cyt b序列4条做为外群.利用JModelTest 2.1.3［10］对Cyt b基因进行分子进化模型检验，模型的适合度使用BIC信息标准（Bayesian information criterion）评估［11］，计算出的最佳进化模型为HKY.用BEAST v1.6.1软件［12］，根据贝叶斯法构建系统树，运行100 000 000代MCMC，每5 000代进行一次抽样.使用非相关的对数正态松散分子钟模型（Relaxed uncorrelated lognormal clock model），每一次运算中均使用birth-death物种形成模型，并利用Tracer verson 1.5软件［13］进行统计，以确定所有参数都有大于200的有效统计样本（Effective Sample Sizes，ESSs）.在BEAST软件包中的TreeAnnotator version 1.8.2中生成最大谱系置信树（Maximum clade credibility tree）.

2 结果

2.1 形态描述与体色变异 这5号标本头骨骨质薄脆、颅骨宽、近圆形，相较同属其他物种吻较短.它们的头骨量度指标值如下：颅全长（19.42±0.19）mm；颅宽（9.2±0.32）mm；眶间宽（3.80±0.54）mm；颚骨宽（4.98±0.33）mm；颚骨-门齿间距（8.80±0.44）mm；上齿列长（8.56±0.33）mm；第二上臼齿宽（4.85±0.75）mm；下颌长（12.2±0.13）mm；下齿列长（7.88±0.36）mm.齿式为1.5.1.3/1.1.1.3，牙齿尖锐部分染有栗色色素.上门齿较大，具有一大的前尖和较小的后尖，后尖大小接近于第二单尖齿，此外2颗门齿正面都有一个附齿尖，略低于着色线.上颌每侧有5枚单尖齿，第一单尖齿到第五单尖齿逐渐减小.前臼齿1枚，臼齿3枚，第一臼齿到第三臼齿逐渐减小，其中第一臼齿和第二臼齿具有完整的W型齿冠结构.下颌有一枚下门齿、一枚单尖齿、一枚前臼齿以及3枚臼齿.下门齿刀状且特别延长向前伸，有3个明显的齿尖（如图2）.标本的皮毛及头骨形态与远东鼩鼱的描述基本相符，初步证实为远东鼩鼱.

图2 远东鼩鼱头骨图Fig.2 Cranium of Sorex isodon

5号标本体型较大，头体长（66.6±2.73）mm，体质量（7.71±0.40）g，尾略长于头体长之半，尾长（45.0±1.25）mm.眼小，耳廓藏于毛下.背覆细而密的软毛，背部呈灰黑色，富有光泽，腹部毛色稍浅，背腹毛色在体侧无明显界线.与2009年在黑龙江省漠河县采集的标本相比，新宾标本毛色整体偏黑灰色，漠河县标本毛色则偏黄褐色，两者皮毛颜色差异明显（如图3）.

图3 黑龙江省漠河地区（A-C）及辽宁省新宾地区（a-c）远东鼩鼱皮毛标本Fig.3 Specimens of Sorex isodon from Mohe County，Heilongjiang Province（A-C）and Xinbin County，Liaoning Province（a-c）

2.2 基于Cyt b的系统发育关系 新扩增的7条

Cyt b基因序列比对校正后，经BLAST程序检测，与远东鼩鼱（JX465364）的相似度均为98%以上.贝叶斯系统树结果如图4所示，其中，实心圆代表黑龙江标本，实心三角形代表辽宁标本，实心矩形代表俄罗斯标本，空心圆代表内蒙古自治区标本.除了做为外群的甘肃川鼩外，鼩鼱属的序列被分为3个分支.5个采自辽宁新宾的远东鼩鼱标本及2个采自黑龙江漠河的远东鼩鼱标本与网上下载的2条远东鼩鼱Cyt b序列构成单系群，该结果支持采自辽宁的标本为远东鼩鼱.

3 讨论

本次在采集远东鼩鼱的采样点共捕获了66只中鼩鼱（Sorex caecutiens）、19只黑线姬鼠（Apodemus agrarius）、44只棕背 （Clethrionomys rufocanus）、21只大林姬鼠（Apodemus peninsulae）、11只山东小麝鼩（Crocidura shantungensis）、3只大麝鼩（Crocidura lasiura）、1只大鼩鼱（Sorex mirabilis）、1只大缺齿鼹（Mogera robusta），远东鼩鼱与上述物种存在同域分布.此前已知远东鼩鼱仅发现于我国黑龙江省和内蒙古省东部［2，14］，而本次的研究结果扩展了该物种的分布范围，且属于其在我国的最南分布.本次捕获的远东鼩鼱的生境为落叶松林和草甸交界带，该物种还分布在低地常绿林带［1］和针阔混交林［14］.

图4 基于Cyt b基因构建的贝叶斯系统发育树Fig.4 Bayesian phylogenetic tree based on Cyt b gene

本次研究发现采自辽宁新宾的远东鼩鼱与采自黑龙江漠河的标本皮毛颜色明显不同.有研究表明，降雨量对小型哺乳动物的皮毛颜色有影响：降水量多的地区，空气潮湿，植被茂密，动物皮毛颜色更深［15］.根据黑龙江及辽宁省气象志与中国气象数据网（http：//data.cma.cn/）的数据，辽宁省全年平均气温和降雨量均较黑龙江省高.两地远东鼩鼱的毛色差异可能与此有关.

致谢 四川省林业科学研究院廖锐帮助采集黑龙江省漠河远东鼩鼱标本，谨致谢意.