脑肠肽Ghrelin和ICAM-1表达与基底节脑出血患者神经功能缺损及预后的关系*

夏百里 董烜玮 崔昌盛 柴士平

(1.潍坊医学院临床学院，山东 潍坊 261053；2.潍坊医学院附属医院神经外科，山东 潍坊 261031；3.滨州市人民医院超声医学科，山东 滨州 256610；4.日照市中医医院神经外科，山东 日照 276826)

脑出血是神经外科的一种危急重症，该病具有发病急、病情发展迅速、发病率高、致残率高等特点[1-2]。基底节区是脑出血常发部位，该疾病主要因颅内血管发生病变，破裂所致。患者若为基底节区脑出血，虽经及时有效的治疗，预后也较容易引起偏瘫等后遗症，严重影响患者的生存及生活质量[3-4]。脑肠肽Ghrelin又称胃饥饿素，是一种生长激素促分泌素的内源性配体，在人体内广泛分布，其主要通过结合生长激素促分泌激素受体而发挥作用[5-6]。细胞间粘附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成员之一，可在多种细胞表面表达[7-8]。脑肠肽Ghrelin和ICAM-1与基底节脑出血患者神经功能缺损及预后有关，但至今关于其作用机理及影响的研究甚少。基于此，本研究拟通过检测基底节脑出血患者血清中脑肠肽Ghrelin和ICAM-1表达情况，探讨其表达水平与基底节脑出血患者神经功能缺损及预后的关系，旨在为基底节脑出血的临床治疗提供有价值的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年1月～2018年2月潍坊医学院附属医院确诊并住院治疗的80例基底节区脑出血患者为基底节脑出血组(简称脑出血组)，并选取同期因头痛等原因在该院神经内科建档并进行常规检查的人群75例为对照组。基底节脑出血组纳入标准：①符合《中国脑血管疾病分类2015》中的基底节脑出血诊断标准[9]。②在该院经头颅影像CT检查确诊为基底节脑出血者。③患者及家属选择在该院接受治疗者。④临床资料齐全者。排除标准：①患有凝血功能障碍等相关疾病者。②患有严重肝、肾等疾病及恶性肿瘤者。③依从性较差者。④临床资料不全者。该研究经医院道德伦理委员会批准通过，所有样品采集均取得患者及家属知情并签署同意书，且符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》。

1.2 研究方法

1.2.1 样品采集及保存 血清样品：清晨采集受试对象空腹静脉血5 mL，使用离心机(购自于北京若水合科技有限公司，货号：wi82487)，以3000 r/min速率离心15 min后收集上层血清，置于-20℃冰箱中保存待测。

1.2.2 血清Ghrelin、ICAM-1表达水平的检测 采用酶联免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)法检测各组血清脑肠肽Ghrelin和ICAM-1的表达水平。在标准孔和空白孔中分别加入已配制好的100 uL标准样品，于第1孔中加入标准样品100 uL，混合均匀后吸取100 uL加入第2孔并进行稀释，按照上述步骤重复稀释至第5孔。在待测孔中加入80 uL样品稀释液和待测样品10 uL，混合均匀后于37 ℃下孵育20 min。弃去酶标板内液体，然后用吸水纸拍干，再加入显色剂混合均匀，进行显色。最后加入终止液，并测定其吸光度。

1.3 神经功能损伤评定 采用脑卒中神经功能缺损评分表(Chinese Stroke Scale，CSS)进行CSS评分，主要包括语言、意识、面肌、手肌力、下肢肌力、上肢肌力、步行能力、水平凝视八项，总分为0～45分，分数越高表示患者神经功能缺损越严重。

1.4 随访及预后评估 对本研究中涉及到的所有患者治疗出院后进行门诊复查或电话随访，并根据相关标准对患者预后进行评估，随访时间为1年，末次随访时间截止2019年2月28日，死亡患者以死亡时间作为随访截止期，本次随访的中位随访时间为6.23个月，且本研究中未出现失访情况。

预后评定：根据Rankin量表(Modified Rankin Scale，MRS)对患者进行MRS评分，总分≥3分为预后不良，总分<3分为预后良好。

2 结果

2.1 两组一般资料的比较 脑出血组和对照组的性别、平均年龄、体质量指数(Body Mass Index，BMI)、吸烟、糖尿病及饮酒比较，差异无统计学意义(P>0.05)；两组高血压和高血脂比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组基本资料比较

2.2 两组血清Ghrelin、ICAM-1表达水平比较 脑出血组血清脑肠肽Ghrelin表达水平显著低于对照组，血清ICAM-1表达水平显著高于对照组(均P<0.05)，见表2。

表2 两组患者血清Ghrelin、ICAM-1表达水平比较

2.3 Ghrelin、ICAM-1高低表达者神经功能缺损的比较 分别以脑肠肽Ghrelin、ICAM-1表达平均值(26.87 μg/L、300.65 ng/mL)将脑出血患者进行分类，高于平均值的为高表达者，低于平均值的为低表达者。高Ghrelin者CSS评分显著低于低Ghrelin者，高ICAM-1者CSS评分显著高于低ICAM-1者(均P<0.05)，见表3。

表3 两组患者神经功能缺损的比较分)

2.4 Ghrelin、ICAM-1高低表达者预后的比较 高Ghrelin者预后不良发生率明显低于低Ghrelin者，高ICAM-1者预后不良发生率明显高于低ICAM-1者(均P<0.05)，见表4。

表4 各组患者预后的比较[n(×10-2)]

2.5 影响脑出血患者死亡或残疾的因素 以脑出血患者死亡或残疾发生为因变量(0=否，1=是)，血清Ghrelin、ICAM-1表达水平、高血压、高血脂为自变量，采用Logistic回归分析。结果显示，血清ICAM-1表达水平是影响脑出血患者发生死亡或残疾的独立危险因素，血清Ghrelin表达水平为脑出血患者发生死亡或残疾的保护因素，见表5。

表5 脑出血患者死亡或残疾的危险因素分析

3 讨论

脑出血的常发部位为基底节区，基底节区供应动脉血管垂直于大脑中动脉，当人体血压较高时易引起动脉管壁内膜发生玻璃样变性或纤维坏死，从而形成动脉瘤并发生破裂导致脑出血[10-11]。脑出血治疗后幸存者较易出现认知障碍、偏瘫等症状，已成为临床研究关注的重点之一。流行病学研究显示，中国脑出血患病率呈逐年上升的趋势，而目前临床治疗脑出血的方法仍不完全有效，基底节脑出血的早期诊断及治疗仍是神经外科需要攻克的难题之一。

人脑肠肽Ghrelin是一种由28个氨基酸组成的多肽，分子量为3314 D，广泛分布于人体内，且常与生长激素促分泌激素受体结合，具有较强的促生长激素分泌的作用[12-13]。有研究显示，脑肠肽Ghrelin与多种疾病的发生、发展有关。陈阳[14]研究发现，脑肠肽Ghrelin表达水平在肠易激综合征重叠胃食管反流病患者血浆中低表达，并与肠易激综合征重叠胃食管反流病的发生密切相关。本研究结果显示，基底节脑出血组血清脑肠肽Ghrelin表达水平显著低于对照组，提示脑肠肽Ghrelin可能参与基底节脑出血的发展进程。

ICAM-1是一类分子量为76～114 kDa的膜表面单链糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族成员之一，具有调节细胞与细胞、细胞外基质与细胞间相互结合的作用[15-17]。有研究显示，ICAM-1与多种疾病的发生及发展有关。范素鸿[18]研究发现，子宫内膜异位症患者血清ICAM-1表达水平升高，且其表达水平在子宫内膜异位症的发病机制中发挥重要作用。闫文明等[19]研究发现，ICAM-1在宫颈鳞癌组织中表达升高，且与宫颈鳞癌放疗抵抗性密切相关。本研究结果显示，基底节脑出血组血清ICAM-1表达水平显著高于对照组，提示ICAM-1可能参与基底节脑出血的发展进程。本研究还发现，高Ghrelin者CSS评分显著低于低Ghrelin者，高ICAM-1组患者CSS评分显著高于低ICAM-1者，提示脑肠肽Ghrelin和ICAM-1表达水平与基底节脑出血患者神经功能缺损密切相关。此外，高Ghrelin者预后不良发生率明显低于低Ghrelin组，高ICAM-1者预后不良发生率明显高于低ICAM-1者，提示脑肠肽Ghrelin低表达和ICAM-1高表达表达水平与基底节脑出血患者预后不良情况发生率密切相关。此外，Logistic回归分析结果显示：血清ICAM-1表达水平是影响基底节脑出血患者发生死亡或残疾的独立危险因素，血清Ghrelin表达水平为基底节脑出血患者发生死亡或残疾的保护因素，提示对两者的监测可为基底节脑出血患者死亡或残疾预测提供更充分的临床依据。

4 结论

脑肠肽Ghrelin在基底节脑出血患者中的表达水平明显降低，ICAM-1表达水平明显升高，两者参与基底节脑出血的发生及发展，且其表达情况与患者神经功能缺损及预后密切相关，提示脑肠肽Ghrelin和ICAM-1可作为基底节脑出血患者预后评估的潜在生物学指标，但具体的作用机制还有待深入研究。