华山参中2个新酰胺类化合物

娄 永，许睿珠，张丽萍，谢治深，张振强，徐江雁，李 军，王 潘

华山参中2个新酰胺类化合物

娄 永1, 2，许睿珠2，张丽萍2，谢治深1，张振强1，徐江雁1，李 军1*，王 潘1*

1. 河南中医药大学中医药科学院，河南 郑州 450046 2. 河南中医药大学药学院，河南 郑州 450046

研究华山参（漏斗泡囊草干燥根）的化学成分。采用正相硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等色谱手段，对华山参药材进行分离纯化，并利用质谱、核磁共振等方法进行化合物结构鉴定。从华山参正丁醇部位初步分离得到3个酰胺类化合物，分别鉴定为-甲酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺（1）、-乙酰基--顺式阿魏酰基-1,4-丁二胺（2）、-乙酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺（3）。化合物1、2为新化合物，分别命名为华山参丁二胺A、华山参丁二胺B；化合物3为首次从泡囊草属植物中分离得到。

华山参；泡囊草属；酰胺类化合物；华山参丁二胺A；华山参丁二胺B；-乙酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺

华山参为茄科植物漏斗泡囊草Kuang的干燥根，性甘、温，微苦，有毒，归肺、心经，具有温肺祛痰、平喘止咳、安神镇惊的功效[1]，民间常用于治疗咳喘、肺痨[2-3]。华山参始载于《本草纲目拾遗》[4]，国内外报道其化学成分已有50余个，主要包括生物碱类、香豆素类、苷类、有机酸、挥发油以及其他类化合物[5-9]。近10年来，关于华山参的研究报道较少。本研究拟对华山参95%乙醇提取物的不同萃取部位进行分离鉴定，旨在丰富华山参的化学成分，为华山参的后续研究提供参考。初步对正丁醇萃取部位进行分离纯化，经过反复硅胶、凝胶柱色谱分离，分离得到3个酰胺类化合物，分别鉴定为-甲酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺（-formyl--feruloyl- putrescine，1）、-乙酰基--顺式阿魏酰基-1,4-丁二胺（-acetyl--feruloyl-putrescine，2）、-乙酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺（-acetyl-- feruloyl-putrescine，3），化合物1、2为新化合物，分别命名为华山参丁二胺A、华山参丁二胺B，结构见图1；化合物3为首次从泡囊草属植物中分离得到。正丁醇萃取部位为酰胺类成分的富集部位，后续研究工作正在进行中。

1 仪器与材料

Bruker 500 MHz核磁共振仪（Bruker公司），TSQ Alits三重四极杆液质联用仪（美国赛默飞公司），Agilent1290超高效液相仪、Agilent1260系列分析及半制备液相（美国Agilent公司），分析柱（绿百草，250 mm×4.6 mm，5 μm），半制备柱（YMC，250 mm×10 mm，5 μm），反相柱色谱填料（YMC-GEL，50 m），Sephadex LH-20凝胶（GE），TLC薄层板和正相柱色谱硅胶均由烟台黄务硅胶开发实验厂提供，开放柱色谱所用溶剂为分析纯，HPLC所用试剂为色谱纯，均由国药集团上海化学试剂公司生产。

本实验样品于2017年5月采自河南省确山县，由河南中医药大学药学院陈随清教授鉴定为茄科植物漏斗泡囊草Kuang，样品标本（HSS1705）保存于河南中医药大学中药化学BN725实验室。

2 提取与分离

干燥的华山参药材10 kg，粉碎，95%乙醇浸提3次（5 L/次，每次浸泡7 d），合并提取液，减压浓缩得粗浸膏473 g，用1 L的蒸馏水混悬，醋酸乙酯萃取3次（3 L/次）后再用正丁醇萃取3次（3 L/次），减压浓缩得正丁醇萃取物65 g。正丁醇部位经硅胶柱色谱（100～200目），二氯甲烷-甲醇（20∶1～1∶1）梯度洗脱，分成5个部分（Fr. 1～5）。Fr. 2（4.5 g）经过反相硅胶柱色谱，甲醇-水（10∶90～90∶10）梯度洗脱，分成4个部分（Fr. 2.1～2.4），Fr. 2.2经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱 [二氯甲烷-甲醇（1∶1）]、RP-HPLC（流动相为30%甲醇，体积流量3 mL/min）进一步纯化，分离得到化合物1（2.3 mg，R＝16.2 min）、2（4.3 mg，R＝25.1 min）、3（58.0 mg，R＝29.6 min）。

3 结构鉴定

化合物1：黄色粉末（甲醇）。HR-ESI-MS/: 293.149 6 [M＋H]+（计算值为293.148 5，C15H21O4N2），结合1H-NMR和13C-NMR谱，确定其分子式为C15H20O4N2，不饱和度为7。1H-NMR (500 MHz, CD3OD) 谱中显示1个甲氧基信号H3.91 (3H, s)，1对反式双键质子信号H7.46 (1H, d,= 15.5 Hz), 6.44 (1H, d,= 15.5 Hz)，3个苯环质子信号H7.14 (1H, d,= 1.4 Hz), 7.05 (1H, dd,= 8.0, 1.4 Hz), 6.82 (1H, d,= 8.0 Hz)，1个醛基质子信号H8.06 (1H, s)。13C-NMR (125 MHz, CD3OD) 中显示15个碳原子信号，结合DEPT135谱确定该结构具有4个季碳、6个次甲基碳、4个亚甲基碳、1个甲氧基碳。3位和4位的4个质子信号重叠，无法准确归属。以上数据与已知化合物-acetyl--feruloyl-putrescine[10]极为相似，区别在于已知化合物的甲基（C23.0,H1.93）被化合物1的氢（H8.06）替代，HMBC谱显示H8.06与C37.2相关说明该结构末端为醛基，H3.91与C147.9有相关，说明甲氧基在6′位，H7.14与C148.5, 121.8有相关，H6.82与C148.5, 121.8有相关，H7.46与C110.1有相关，说明苯环为4′,6′,7′三取代。因此化合物1的结构为-甲酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺，经Scifinder检索，并未发现该结构相关文献报道，命名为华山参丁二胺A，化合物数据归属见表1，主要HMBC相关信息见图2。

化合物2：黄色粉末（甲醇）。HR-ESI-MS/: 307.165 2 [M＋H]+（计算值为307.164 4，C16H23O4N2），结合1H-NMR和13C-NMR谱，确定其分子式为C16H22O4N2，不饱和度为7。1H-NMR (500 MHz, CD3OD) 谱中显示1个甲基信号H1.94 (3H, s)，1个甲氧基信号H3.86 (3H, s)，1对顺式双键信号H6.64 (1H, d,= 11.5 Hz), 5.85 (1H, d,= 11.5 Hz)，3个苯环质子信号H7.34 (1H, d,= 1.4 Hz), 6.96 (1H, dd,= 8.0, 1.4 Hz), 6.76 (1H, d,= 8.0 Hz)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD) 中显示16个碳原子信号，结合DEPT135谱确定该结构具有5个季碳、5个次甲基碳、4个亚甲基碳、1个甲氧基碳、1个甲基碳，3位和4位上4个质子信号重叠，无法准确归属。以上数据与已知化合物-acetyl--feruloyl-putrescine[10]十分相似，不同之处在于双键构型，已知化合物的双键为反式H7.44 (1H, d,= 15.7 Hz), 6.42 (1H, d,= 15.7 Hz)，化合物2的双键为顺式H6.64 (1H, d,= 11.5 Hz), 5.85 (1H, d,= 11.5 Hz)，同时化合物2的NOESY显示H6.64与5.85相关，因此化合物2的结构为-乙酰基--顺式阿魏酰基-1,4-丁二胺，经Scifinder检索，并未发现该结构相关文献报道，命名为华山参丁二胺B，化合物数据归属见表1，主要HMBC相关信息见图2。

化合物3：黄色粉末（甲醇）。HR-ESI-MS/: 307.165 2 [M＋H]+（计算值为307.164 4，C16H23O4N2），分子式为C16H22O4N2。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.46 (1H, d,= 15.5 Hz, H-3′), 7.14 (1H, d,= 1.6 Hz, H-5′), 7.05 (1H, dd,= 8.2, 1.6 Hz, H-9′), 6.82 (1H, d,= 8.2 Hz, H-8′), 6.44 (1H, d,= 15.5 Hz, H-2′), 3.90 (3H, s, 6′-OMe), 3.31 (2H, m, H-2), 3.21 (2H, m, H-5), 1.95 (3H, s, H-2′′), 1.59 (4H, m, H-3, 4)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 171.9 (C-1′′), 167.8 (C-1′), 148.5 (C-7′), 147.9 (C-6′), 140.6 (C-3′), 126.8 (C-4′), 121.8 (C-9′), 117.3 (C-2′), 115.0 (C-8′), 110.2 (C-5′), 55.0 (6′-OMe), 38.7 (C-2, 5), 26.4 (C-3, 4), 21.1 (C-2′′)。以上数据与文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物3为-乙酰基--阿魏酰基-1,4-丁二胺。

4 讨论

华山参具有止咳平喘、安神镇惊的功效，常用于寒痰喘咳、心悸失眠易惊、劳损体弱、自汗盗汗，为民间治疗咳喘、肺痨的特效药。本研究对华山参醇提物正丁醇部位化学成分进行研究，初步分离鉴定了3个酰胺类化合物。其中化合物1、2为新化合物，化合物3为首次从泡囊草属植物中分离得到，为华山参化学成分研究提供基础，亦为其今后开发利用提供了依据。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Two new amides from

LOU Yong1, 2, XU Rui-zhu2, ZHANG Li-ping2, XIE Zhi-shen1, ZHANG Zhen-qiang1, XU Jiang-yan1, LI Jun1, WANG Pan1

1. Academy of Chinese Medical Sciences, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China 2. College of Pharmacy, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China

To study the chemical constituents of.The chemical constituents were isolated by chromatography with silica gel, HPLC, Sephadex LH-20. The structures were identified by MS and NMR analyses.Three amides were separated fromand elucidated as-formyl--feruloyl-putrescine (1),-acetyl--feruloyl-putrescine (2) and-acetyl--feruloyl-putrescine (3).Compounds 1 and 2 are new compounds, and compound 3 is separated from the genusfor the first time.

Kuang;; amides;-formyl--feruloyl-putrescine;-acetyl--feruloyl- putrescine;-acetyl--feruloyl-putrescine

R284.1

A

0253 - 2670(2021)02 - 0331 - 04

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.02.004

2020-07-17

国家重点研发计划-战略性国际科技创新合作专项（2020YFE0201800）；河南省科技攻关项目（202102310183，202102310173）；河南省中医药科学研究专项课题-重大项目（2018ZYZD12）

娄 永（1993—），男，中药学专业硕士研究生。Tel: 15515883967 E-mail: 2947848344@qq.com

李 军 Tel: (0371)86253090 E-mail: lijun8828@126.com

王 潘 Tel: 13523501212 E-mail: w.p1008@hotmail.com

[责任编辑 王文倩]