补肾益发汤治疗斑秃的临床疗效及对血清IFN-γ和IL-10表达的影响*

吴然，黄增阳，狄伟，黄微，杨轩，黄静，陈恋，程远，文昌晖，唐挺，贾敏

(贵州中医药大学第一附属医院 皮肤科，贵州 贵阳 550001)

斑秃(alopecia areata，AA)是一种突然发生的局限性脱发，重者可导致整个头皮、甚至全身的被毛脱落，严重影响患者的容貌和心理。AA的西医治疗目前主要是病变局部或(和)全身使用皮质类固醇、外用毛囊刺激剂，部分严重病例需要长期使用副作用较大的糖皮质激素和免疫抑制剂[1]。为发扬祖国传统中医药优势，本课题组将中医中药应用于对AA等疾病的治疗[2]。补肾益发汤为课题组贾敏教授治疗AA的临床经验方，经20余年临床实践发现该方具有良好的临床疗效[3]，但一直缺乏深入系统的科学研究。本研究采用随机平行对照的方法观察补肾益发汤治疗AA的临床疗效，并通过酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测AA患者治疗前后外周血中γ-干扰素(interferon γ，IFN-γ)和白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的水平，初步探讨补肾益发汤治疗AA的作用机制，为补肾益发汤治疗AA提供科学支持。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月—2019年12月，在皮肤科门诊就诊的60例活动期多灶性AA患者为研究对象，按随机数字法分为观察组及对照组，每组30例；治疗组患者男 14 例、女 16 例，年龄18～65岁、平均(30.2±10.0)岁，病程3 d～24个月、平均(6.2±2.0)个月；对照组患者男13例、女17例，年龄 18～65岁、平均(30.3±12.2)岁，病程 5 d～26个月、平均(6.5±2.5)个月；2组患者的一般基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本临床实验经医学伦理委员会批准(批注号为K2019-059)，治疗方案取得患者知情同意。纳入标准：(1)所有患者均符合活动期多灶性AA的诊断标准[4];(2)中医辨证标准符合肝肾不足型[5];(3)患者严重程度参考美国AA评估指南所推荐的AA严重程度 (severity of alopecia tool,SALT) 评分[6]。根据脱发面积占整个头部面积的比例(S)和头部以外体毛脱落的程度(B)及受累情况(N)确定其严重程度。S 代表头发脱落情况，S0为无头发脱落，S1 为头发脱落<25%，S2为头发脱落 25%～49%，S3为头发脱落50%～74%，S4为头发脱落 75%～99%(S4a 为头发脱落 75%～95%，S4b 为头发脱落 96%～99%)，S5为头发脱落100%。B 代表头发以外体毛脱落情况，B0为头发以外无毛发脱落，B1为头发以外部分体毛脱落，B2为全身体毛全部脱落。N代表甲受累情况，N0为无甲受累，N1为部分甲受累，N1a为20个甲营养不良(必须20个甲全部受累)。认为脱发面积<25%为轻度，25%～49%为中度，≥50%为重度。本实验研究对象病情分级为S2B0N0级。排除标准：(1)近期内接受系统或局部激素药物治疗者；(2)患有神经、精神疾病或严重内分泌疾病，其他皮肤病、感染性疾病和严重系统性原发性疾病患者；(3)用药前合并肝肾功能障碍者；(4)妊娠、拟妊娠、产后12个月以内和哺乳期妇女；(5)不遵医嘱用药及随访患者；(6)对所用药物过敏患者及用药后产生肝肾功能障碍者。

1.2 治疗方法

对照组患者给予生发酊外搽(贵州中医药大学第一附属医院自制药，批号20180623，规格 100 mL/瓶，2次/d)和卤米松软膏(香港澳美制药厂，批准文号HC20181019，1次/d，晚上使用)；卤米松软膏继生发酊之后外涂脱发处，局部按摩促进药物吸收，治疗观察周期共3个月。观察组患者在对照组治疗的基础上加上补肾益发汤口服治疗，组方：盐补骨脂10 g，骨碎补10 g，当归10 g，黄精15 g，杜仲10 g，何首乌6 g，盐知母10 g，桃仁10 g，红花10 g，女贞子20 g，墨旱莲20 g，川芎10 g，黄芪15 g，柴胡6 g，白芷15 g，桑枝15 g，升麻6 g；加水高出药面2 cm浸泡 30 min后、用武火煮沸、用文火煮20 min，煎煮2 遍，第2次加水量为第1煎熬的1/2，2次煎液去渣，滤净混合后约400 mL，分早餐、晚餐后30 min各口服200 mL，药量均随患者年龄大小、体质强弱而增减，疗程3个月。治疗期间对所有患者进行健康教育，告知相关的注意事项，避免不良精神刺激，积极调理情志，保持充足的睡眠等。

1.3 观察指标

1.3.1临床疗效观察 每月记录头发生长情况，行拉发实验，记录脱发面积、并拍照。疗效标准[7-8]：临床痊愈，毛发未再脱落，秃发区新发生长率为100%，新发的色泽、粗细、分布的密度与原发一致，拉发实验阴性；显效，毛发未再脱落，秃发区新发生长率为 71%～99%，新发的色泽、粗细、分布的密度与原发相近，拉发实验阴性；有效，毛发未再脱落停止，秃发区新发生长率为30%～70%，可见新生毳毛及短发，拉发实验阴性或阳性；无效，脱发再生率<30%或者仍继续脱落。

1.3.2皮肤镜观察 每月对患者进行1次皮肤镜观察，分析头发,包括毛囊、发干及其连接处的表面形态，观察有无感叹号样毛发、黑点征、断发、黄点征、短毳毛等毛发改变情况。

1.3.3血清检查 治疗前及治疗3个月时，抽取2组患者清晨空腹静脉血5 mL，室温静置10 min，2 000 r/min离心20 min，收集血清，采用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-10水平(试剂盒购于武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)。

1.3.4不良反应监测 治疗后第一周观察是否有不良反应、检查肝肾功能、血尿常规，如发生以上不良反应，停止入组并积极处理，并重新入选研究对象。如无不良反应，以后每2周进行复查相关指标。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 治疗效果

结果显示，治疗3个月时，观察组的总有效率(93.33%)高于对照组(73.33%)，差异有统计学意义(χ2=4.32,P<0.05)。见表1。

表1 治疗组与对照组的临床治疗效果[n(%)]Tab.1 Comparison of curative effect between the two groups[n(%)]

2.2 皮肤镜检查结果

如图1所示，观察组与对照组初诊时均予皮肤镜检测，镜下可见黄点征、黑点征、断发、感叹发，符合AA的诊断指标；两组患者治疗3个月后皮肤镜检测有较明显差异，观察组可见头发基本恢复正常，对照组治疗后头发虽较前浓密，但仍见明显黑点征及断发。

2.3 临床疗效图鉴

治疗前患者左侧颞部、头顶部等有片状脱发，观察组患者治疗3个月时头发完全恢复，对照组患者治疗3个月时头发恢复不明显(图2)。

2.4 血清IFN-γ和IL-10水平

结果显示，治疗前2组患者血清IFN-γ和IL-10水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后，观察组患者血清IFN-γ水平低于对照组、血清IL-10水平高于对照组，且血清IFN-γ水平低于治疗前、血清IL-10水平高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；对照组患者治疗前后的血清IFN-γ和IL-10水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 观察组和对照组患者治疗前后血清IFN-γ和IL-10水平Tab.2 Expression of serum IFN-γ and IL-10 in the observation group and the control group

注：A为观察组治疗前见断发、黑点征、感叹发；B为观察组治疗3月后见头发基本恢复正常；C为对照组治疗前见脱发斑片、黑点征、感叹发；D为对照组治疗后头发较前浓密，但仍见明显黑点征及断发。图1 治疗前后两组患者皮肤镜下的毛发生长情况Fig.1 Dermatoscopic hair growth in the two groups before and after treatment

注：A为观察组左侧颞部枕部顶部点片状脱发，B为观察组患者治疗3个月时头发完全恢复，C为对照组颞部、头顶部片状脱发，D为对照组患者治疗3个月时脱发区无明显恢复。图2 两组患者的治疗疗效图Fig.2 The curative effect tween the two groups

3 讨论

AA的病因及发病机制与个体遗传素质、自身免疫反应、毛囊免疫赦免的破坏和淋巴细胞浸润及精神情志失调等有关[9]。研究发现，IL-10分泌增多可抑制MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达及IFN-γ的作用而促进毛囊免疫赦免的重新建立，利于毛发再生。本研究选取60例中度活动期多灶性AA患者，通过ELISA检测方法发现观察组与对照组治疗前血清IFN-γ、IL-10含量差异不明显。治疗后，观察组患者血清IFN-γ水平低于对照组，血清IL-10水平高于对照组。两组血清IFN-γ水平低于治疗前、血清IL-10水平高于治疗前，与既往研究结果一致[10-12]，佐证了IFN-γ及IL-10血清中的失调参与了AA的发生，由此提示补肾益发汤具有调节患者机体炎症因子的作用。

现有的统计表明，AA的预后情况为30%～50%的患者在6～12个月内有新发长出，逐渐恢复正常，2/3的患者在5年后才恢复，全秃发生于儿童者较难恢复，青春期前的AA，完全恢复的概率是50%，而全秃和普秃恢复概率仅为10%[13-14]。本研究观察组治疗1月即见到明显效果，3个月能恢复90%，6个月基本恢复。3个月后观察组的总有效率93.33%，明显高于对照组73.33%，差异有统计学意义(P<0.05)，提示补肾益发汤能明显增进临床疗效。

斑秃者是由于肾精亏虚而致发失所养，表现为毛发脱落，治疗予补肾加生发固发的药物。根据20年来补肾益发汤在临床的使用情况，疗效已经得到肯定。究其方药，其中补骨脂、骨碎补温补肾阳，肾阳兴，则生化有源；当归专能补血，又能行血[15]；现代药理研究也显示君药中的补骨脂具有抑制炎症小体活化，发挥抗炎的作用[16]。制何首乌能增强细胞免疫，抑制体液免疫等[17]。骨碎补具有调节免疫功能、治疗白癜风、治疗AA等作用[18-19]。当归中的当归多糖具有促进造血、增加器官血流量、调节免疫等功能[20]。知母能够抑制IL-1β的分泌，降低炎症反应[21]。川芎可以改善组织微循环，调节免疫等效用[22]。柴胡皂苷具有抗实体肿瘤细胞分子黏附，抑制细胞增殖，介导细胞凋亡等抗肿瘤作用[23]。

综上所述，补肾益发汤针对中西医发病机理，通过中西医两条途径治疗AA，本临床实验研究证实其临床疗效肯定，发现其可能与下调促炎因子IFN-γ及上调抑制AA的炎症因子IL-10有关，但其具体的药理机制仍有待深入研究。