猪冷冻精液技术的应用实践

秦国武

(甘肃省家畜繁育改良管理站，甘肃 凉州 733000)

为推动甘肃省种猪繁殖技术的发展，加强核心育种场种猪血统交流以及地方濒危猪种的保护工作，最近几年来，甘肃省加强了对猪冷冻精液技术的重视，现将应用实践总结如下。

1 猪冷冻精液的应用

在养猪生产中引进国外品种是一个重要的环节，但是引进活体猪会导致养殖成本增加以及猪病不可控。随着种猪育种以及品种培育工作的开展，我们需要进一步研究猪冷冻精液在繁殖中的应用[1]。冷冻精液可以使品种优良的猪的遗传信息得到保存，延长猪的使用年限，减少对公猪的伤害，而且采精可以使高品质的公猪与更多的母猪配种，从而取得遗传进展。将国外优秀的种猪引进国内，可以使种猪选择范围进一步扩大，而且不会受到时间因素以及地理因素的限制，从而控制繁育成本，稳定遗传繁殖，为生物安全提供保证。

2 猪冷冻精液解冻方法

由于猪精子的特殊性，精子对温度的敏感性较大，在解冻过程中很容易受到损伤，需要在解冻过程中精细化操作。目前常用的猪冷冻精液解冻方法有以下几种：

2.1 英系猪冷冻精液解冻方法

首先将实验室温度调到26 ℃，将水浴锅升温到37 ℃，将准备好的稀释液放在水浴锅中水浴1 h，然后将60 mL稀释液放入输精瓶。确定储存正确精液的储存格，将储存格放回液氮罐3 min后将精液管取出，然后放在水浴锅中慢慢解冻，拿出擦干，再一次检查公猪编号以防弄混。晃动精液管将气泡赶到棉塞端，使用消毒过的剪刀将棉塞端剪开，另一端放在37 ℃的输精瓶中，将精液吹入输精瓶。将输精瓶放在水浴锅中加热0.5 h，然后在0.5 h内对母猪进行人工授精。解冻大约需要2 h，因此需要在母猪达到最佳输精条件前2 h开始解冻。使用前需要对精子活力进行评估，方法为在玻璃片上滴一滴精液进行镜检。

2.2 丹系猪冷冻精液解冻方法

首先将实验室温度调到26 ℃，将水浴锅调到36 ℃，用温度计进行温度矫正[2]，将另一个水浴锅的温度调到50 ℃。稀释液提前加热到36 ℃。从液氮罐中取出猪冷冻精液，将精液包拉出解开后取出精液管，放到50 ℃水浴锅中解冻，用秒表计时，16 s后取出。精液管取出后要迅速将精液包放回液氮中。精液管解冻后，剪开其空气端，从棉塞端将精液放入稀释液中，缓慢摇匀。利用显微镜检查公猪的精子活力，合格后进行配种。

2.3 加系猪冷冻精液解冻方法

调整实验室温度至26 ℃。恒温杯中注满蒸馏水，调至36 ℃，加热30 min。将足量的稀释液放在26 ℃的水浴锅中，加热40 min。将输精瓶放在水浴锅中加热0.5 h，注意不能污染输精瓶。中转杯中加入液氮，打开液氮罐将公猪冷冻精液取出，放入中转杯，然后盖好液氮罐。从中转杯中将猪冷冻精液取出，放置在恒温杯中解冻，20 s后取出，用纸巾擦干[3]。晃动精液管将气泡赶到金属球一端，用剪刀将金属球下端剪开，将精液挤到预热好的输精瓶中。重复上述步骤直到取出足量的精液，之后将输精瓶放在水浴锅中加热0.5 h，然后利用显微镜检查精子活力。在解冻过程中佩戴防护用具，以防冻伤。

3 输精方式

常用的输精方式有子宫颈输精法和子宫体输精法，具体如下：

3.1 子宫颈输精法

冷冻精液解冻后需要在1 h内使用，将深部输精管插入母猪子宫颈处，在输精时使用爆发力挤压输精瓶。

3.2 子宫体输精法

冷冻精液解冻后，将深部输精管橡皮软头插入子宫深处，然后缓慢挤压将精液注入。

4 总结

使用猪冷冻精液技术能够将优质的基因保存下去，使公猪不会由于受到意外等原因导致使用受限，而且冷冻精液也可以完善人工授精体系。精液冷冻前需要对精液进行遗传检查以及疾病检测，以保证能够提供稳定的遗传信息。相比传统的种猪引进工作，使用冷冻精液可以降低80%的养殖成本，而且方便运输以及使用，对地方猪种资源保存以及提高养猪经济效益具有积极意义。