TGF-β1、TSGF及CYFRA21-1与食管癌放疗后病理缓解程度、预后的关系

徐娆 唐曦 徐晓明 徐炎华

食管癌是发生在消化道的恶性肿瘤，我国是世界上食管癌高发地区之一［1］。既往文献指出，局部晚期食管癌新辅助放疗后病理缓解与患者的总生存期（Overall Survival，OS）有关，故评价食管癌的放疗疗效具有重要临床意义［2-3］。目前与食管癌相关的肿瘤血清学指标较多，其中，转化生长因子-β1（transforming growth factor-β，TGF-β1）及肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factor，TSGF）均可促进肿瘤及周边毛细血管增殖并释放［4-5］。此外，血清细胞角蛋白19 片段（cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1）也是一些癌症的肿瘤标识物，关于其与食管癌的相关性存在一些争议［6］。本文就TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平变化与食管癌放疗后病理缓解程度、预后的关系进行研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

分析2016年3月至2017年3月本院收治的79例食管癌患者临床资料，纳入标准：①满足中晚期食管癌诊断标准［7］，且为初治的患者；②Kamofsky评分≥60 分［7］，预期生存期在3 个月以上者；③临床资料及随访记录完整者；排除标准：①非原发性食管癌者；②合并严重心血管、血液系统或其他恶性肿瘤等影响生存时间疾病者；③肝功能严重异常者；④严重精神疾患或痴呆等无法完成所有治疗和随访者；⑤无法放疗毒副作用，中途终止治疗者。根据纳入排除标准最终选取76例作为研究对象，作为食管癌组。其中男43例，女33例，平均年龄（49.15±3.13）岁。按照放疗后病理缓解程度分为完全缓解（complete remission，CR）组（n=53）和未完全缓解（Not completely relieve，NCR）组（n=23）。另根据食管癌患者化疗后预后生存情况分为生存组（n=56）和死亡组（n=20）。选取同期健康体检合格者60例作为对照组，其中男39例，女21例，平均年龄（49.36±3.16）岁。食管癌组及对照组年龄、性别一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患者均知情同意。本实验经医院伦理委员会批准。

1.2 检测方法

1.2.1 TGF-β1 检测、CYFRA21-1 检测

抽取空腹静脉血4 mL，室温放置30 min 后离心（3 000 r/m，15 min）分离血清。TGF-βI 采用ELISA 法，试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，仪器为芬兰MultiskanMK3 型全自动酶标仪、美国Muiti Wash 洗板机。CYFRA21-1 采用电化学发光方法，用德国罗氏公司电化学发光免疫分析仪Elecsys2010 及罗氏公司提供的配套检验试剂盒，按说明书操作。

1.2.2 TSGF 检测

将各试剂移至室温（18～25℃）平衡30 min，按标准配制稀释；每孔内滴加待测样品100 μL，放于37℃等待2 h；倒去孔中液体并拭干；每孔内加生物素标记抗体工作液100 μL，放于37℃等待2 h，洗板3 次后印干；每孔内滴加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液100 μL，放置37℃等待45 min；倒去孔中液体并拭干，如此重复5 次洗板并印干；每孔加底物溶液90 μL，37℃避光并加终止溶液50 μL 后后出现变色反应，在10 min 内用酶标仪测450 nm波长的吸光度。

1.2.3 肿瘤标志物变化趋势评估标准［8］

放疗后较放疗前下降10%以上判为下降趋势，其他情况均为上升趋势；且三项指标中任一项出现上升，即认为上升趋势。

1.3 疗效判定［9］

①CR：所有目标病灶消失；②部分缓解（part remission，PR），肿瘤体积缩小≥30%；③稳定（stable Disease，SD），肿瘤体积缩小＜30%；④进展（progressive Disease，PD），肿瘤体积增加＞20%或出现新病灶。治疗有效率=（CR+PR）/例数×100%。

1.4 随访方法

本研究随访从患者术后开始，直至患者死亡或本研究的随访结束，为期2年，截止于2020年3月31日，随访的方式以患者来院复查为主。在本研究中，总生存时间（Overall Survival，OS）表示食管癌患者从手术至死亡的时长［10］。

1.5 统计学方法

采用SPSS 18.0 软件进行统计分析，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验，计量资料采用（±s）表示，两组间比较行t检验，多组件比较行F检验；采用多元Logistic 回归分析影响食管癌放疗患者预后生存的危险因素；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 食管癌组放疗前后与对照组TGF-β1、TSGF及CYFRA21-1 水平比较

食管癌组放疗前TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1水平均高于同组放疗后及对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 CR组和NCR组TGF-β1、TSGF及CYFRA21-1水平比较

CR 组TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平均低于NCR 组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 肿瘤标志物变化趋势与治疗效果的关系

经统计，共21例呈上升趋势，55例呈下降趋势。肿瘤标志物变化趋势呈下降趋势的患者治疗有效率高于呈上升趋势的患者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表1 食管癌组放疗前后与对照组TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TGF-β 1，TSGF and CYFRA21-1 levels between esophageal cancer group and control group before and after radiotherapy（±s）

表1 食管癌组放疗前后与对照组TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TGF-β 1，TSGF and CYFRA21-1 levels between esophageal cancer group and control group before and after radiotherapy（±s）

注：与放疗前比较，aP＜0.05；与对照组比较，bP＜0.05。

组别食管癌组对照组F 值P 值n 76 60放疗前放疗后--TGF-β1（ng/mL）43.12±2.56b 20.95±2.13ab 9.73±1.28 4511.09＜0.001 TSGF（μ/mL）125.43±14.75b 89.57±13.85ab 83.11±12.43 195.40＜0.001 CYFRA21-1（ng/mL）8.74±1.48b 2.39±0.91ab 1.79±0.71 875.28＜0.001

表2 TACE 治疗前后TSGF、GGT、VEGF 水平比较（±s）Table 2 Comparison of TSGF,GGT and VEGF levels before and after TACE treatment（±s）

表2 TACE 治疗前后TSGF、GGT、VEGF 水平比较（±s）Table 2 Comparison of TSGF,GGT and VEGF levels before and after TACE treatment（±s）

组别CR 组NCR 组t 值P 值n 53 23-TGF-β1（ng/mL）13.71±3.31 21.85±2.79 10.302＜0.001 TSGF（μ/mL）70.19±5.84 91.37±4.69 15.358＜0.001 CYFRA21-1（ng/mL）3.51±0.35 2.07±0.44 15.217＜0.001

表3 肿瘤标志物变化趋势与治疗效果的关系Table 3 Relationship between the change trend of tumor markers and therapeutic effect

2.4 影响食管癌放疗患者预后生存的单因素分析

年龄、性别、胸痛史、病理类型与食管癌放疗患者预后生存无关，瘤部位、长度、X 线分型、总疗程TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平是影响食管癌放疗患者预后生存的单因素（P＜0.05）。见表4。

2.5 影响食管癌放疗患者预后生存的多因素分析

总疗程、TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平为影响食管癌放疗患者预后生存的独立危险因素（P＜0.05）。见表5。

3 讨论

由于早期食管癌症状隐匿，多数患者确诊时已错失了最佳手术治疗时间［11］。对于此类患者，放、化疗成为主要治疗方式，故寻找用于早期诊断及评估患者预后的相关指标对食管癌的防治显得尤为重要［12］。

TGF-β1 是一类多功能的细胞因子，TGF-β1通路在肿瘤发展早期具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，能抑制细胞的增生，使细胞停留在G1 期，并诱导细胞凋亡。肿瘤后期癌细胞失去对TGF-β1 抑癌作用敏感性，同时自身合成分泌大量TGF-β1，或在细胞外TGF-β1 的作用下通过上皮间质化转变的过程发生形态学改变和增强侵润性。Zhang等［13］研究发现TGF-β1 在肾癌组织中的阳性表达率较癌旁肾组织减少，且TGF-β1 阳性表达率随着肾癌病理分级和临床分期的上升而显著下降，提示TGF-β1 的缺失有可能促进肾癌的发生。这与本研究结果相似，表明TGF-β1 参与了恶性肿瘤的发生、侵袭与转移，与食管癌患者放疗疗效及预后关系密切。

表4 影响食管癌放疗患者预后生存的单因素分析Table 4 Analysis of biliary factors affecting prognosis and survival of patients with esophageal cancer after radiotherapy

TSGF 是近年来研究发现的一种与恶性肿瘤血管增殖有关的因子，由于TSGF 肿瘤谱广并具有与其他肿瘤标志物无相关关系的特性，因此在肿瘤的早期即可以出现并检出，故常作为肿瘤血管生存的标志物之一。TSGF 检测对各种恶性肿瘤早期及治疗后的复发具有高度敏感性，尤其适合用于肿瘤患者术后及放、化疗后对疗效的检测。本研究结果提示TSGF 对肿瘤的早期诊断和病情监控及复发转移具有重要的临床意义。

CYFRA21-1 是构成细胞骨架的一种中间丝状物，以寡聚物形式存在，多年来CYFRA21-1 在恶性肿瘤检测中的作用一直受到重视。因CYFRA21-1 广泛存在于肺癌、食管癌等单层或浮层上皮肿瘤细胞的胞质中，当癌细胞溶解或坏死后可被释放进入组织液和体液，因此其成为了检测和评估非小细胞肺癌、中晚期食管癌预后的一个灵敏性较高的重要标志物［14］。Jiang 等［15］的Meta 分析显示，血清CYFRA21-1 是提示非小细胞肺癌不良预后的因素之一，高水平的血清CYFRA21-1提示患者预后不良，生存时间明显低于血清CYFRA21-1 水平正常或较低的患者。本研究结果显示，CYFRA21-1 可作为食管癌的1 个独立预后因素，血清CYFRA21-1 高者生存率低于血清CYFRA21-1 低者，具有重要的临床意义。

表5 影响食管癌放疗患者预后生存的多因素分析Table 5 Multivariate analysis of prognostic factors in patients with esophageal cancer after radiotherapy

综上，TGF-β1、TSGF 及CYFRA21-1 水平变化趋势与食管癌患者放疗后病理缓解程度及预后情况密切相关，检测三者水平可作为监测放疗疗效、提示预后的有效手段。