我院1196株无乳链球菌的分布情况及对4种常用抗菌药物的敏感性

和剑凌，姜 波，邵天波

（1.云南圣约翰医院检验科，云南 昆明 650228 ；2. 昆明医科大学第一附属医院检验科，云南 昆明 650032）

无乳链球菌（Streptococcus agalactiae，GBS）又叫B群链球菌，是一种β- 溶血性链球菌。GBS 是一种寄生于健康人胃肠道和阴道的机会致病菌，它是引起围生期母婴感染的主要病原菌之一。孕产妇在感染GBS 后可出现早产、胎膜早破和产褥期感染等并发症。GBS 的传播途径主要是垂直传播。发生GBS 感染是引起新生儿败血症、新生儿脑膜炎和新生儿重症肺炎等新生儿感染性疾病的主要原因。本文主要是分析我院1196 株无乳链球菌的分布情况及对4种常用抗菌药物的敏感性。

1 资料与方法

1.1 基线资料

本文的研究对象是2018 年1 月至2019 年12 月期间在我院1196 例门诊及住院患者体内分离出的1196 株GBS。在这1196 例患者中，有女性患者1167 例，男性患者29 例；其年龄为22 ～56 岁，平均年龄为（30.47±4.14）岁。按照《全国临床检验操作规程》中的相关规定对这些患者的阴道分泌物标本、尿液标本、血液标本等标本进行接种、培养及病原菌分离[1]。

1.2 仪器与试剂

VITEK2-compact 全自动细菌鉴定药敏仪及配套试剂（由法国梅里埃公司生产），GP67 药敏卡（由英国OXOID公司生产），BACT/AL 全自动血培养仪及配套的培养瓶（由法国梅里埃公司生产），CO2培养箱（由赛默飞世尔科技有限公司生产），GBS 专用显色平板（由郑州安图生物有限公司生产），哥伦比亚血琼脂平板（由郑州安图生物有限公司生产），MH 琼脂平板（由郑州安图生物有限公司生产）。以上所有试剂均在有效期内使用。

1.3 质控菌株

采用卫生部生物制品检定所提供的金黄色葡萄球菌ATCC25923 和ATCC29213、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212、腐生葡萄球菌ATCCBAA750 作为质控菌株。

1.4 GBS 的培养、分离方法及药敏试验方法

对GBS 进行培养和分离的方法是：将患者的阴道分泌物标本接种于GBS 专用的显色平板上，置于35℃的CO2培养箱（CO2的浓度为5%）中进行培养。培养18 ～48 h 后，挑选出平板上淡红色至深红色的菌落，作为初筛菌落。对初筛菌落进行环磷酸腺苷（CAMP）试验和分纯培养，分离出GBS。将患者的尿液标本、血液标本等非阴道分泌物标本接种于血琼脂平板上，置于35℃的CO2培养箱（CO2的浓度为5%）中进行培养。培养18 ～48 h 后，挑选出中等大小、灰白色、圆形、表面湿润、周围有窄小β 溶血环（有11% 的菌落可无溶血环）[2]的可疑菌落。用浓度为3% 的H2O2对可疑菌落进行触酶试验。对试验结果呈阴性的菌落进行CAMP 试验和分纯培养，分离出GBS。对GBS 进行药敏试验的方法是：采用VITEK2-compact 全自动细菌鉴定药敏仪及配套试剂对分离出的GBS 进行药敏试验，严格按照试剂的说明书进行各项操作。采用“M100 抗微生物药物敏感性试验的执行标准（2019）”[3]对试验结果相近判读，具体的判读标准详见表1。

1.5 观察指标

观察这1196 株GBS 的标本来源、科室分布情况及其对青霉素、万古霉素、红霉素和克林霉素的敏感性。

表1 药敏试验的判读标准

1.6 统计学方法

用WHONET 5.6 软件对这1196 株GBS 的标本来源、科室分布情况及药敏试验结果等数据进行分析处理。

2 结果

2.1 这1196 株GBS 的标本来源及科室分布情况

在这1196 株GBS 中，分离自孕产妇阴道分泌物、尿液、血液、脓液、痰液、精液、前列腺液及其他标本的GBS 分别有1010 株、169 株、8 株、4 株、2 株、1 株、1 株和1 株。其中，分离自孕产妇阴道分泌物的GBS 最多，占84.4%。在这1196 株GBS 中，来自妇产科、泌尿科、内科、感疗科、内分泌科、移植科、男性科、消化科、皮肤科和其他科室的GBS 分别有1134 株、20 株、7 株、7 株、5 株、4 株、3株、2 株、2 株和12 株。其中，来自妇产科的GBS 最多，占94.8%。详见表2。

表2 这1196 株GBS 的标本来源及科室分布情况

2.2 这1196 株GBS 对4 种常用抗菌药物的敏感性

这1196 株GBS 对青霉素和万古霉素的敏感率均为100%，其对红霉素和克拉霉素的耐药率分别为73.2% 和64%。详见表3。

表3 这1196 株GBS 对4 种常用抗菌药物的敏感性[n（%）]

3 讨论

GBS 属于革兰阳性菌，其通常呈短链状排列，多存在于人体的胃肠内（女性阴道内的GBS 也来源于胃肠道内的GBS）。育龄女性的阴道内多携带有GBS。本研究的结果显示，在这1196 株GBS 中，分离自孕产妇阴道分泌物的GBS最多，有1010 株，占84.4%。其中，来自妇产科的GBS 最多，有1134 株，占94.8%。这与国内相关文献报道的结果基本相符。发生GBS 感染是引起产妇产褥期脓毒血症和新生儿脑膜炎的重要原因。因此，临床上应对妊娠女性进行GBS 检测，并对检测结果呈阳性的女性进行有效的干预，以改善其妊娠结局，降低母婴不良事件的发生率。本研究的结果显示，这1196 株GBS 对青霉素和万古霉素的敏感率均为100%。这与汤红梅、李小南、钟汇等[3-5]报道的研究结果基本一致。美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推荐用青霉素或氨苄青霉素来预防或治疗妊娠期GBS 感染。青霉素具有抗菌谱窄、副作用小、不会导致胎儿畸形等优点，可作为临床上预防和治疗妊娠期GBS 感染的首选抗菌药物[6]。万古霉素具有肝肾毒性，氟喹诺酮类抗菌药物会影响新生儿关节软骨的发育，二者均不适用于孕产妇和新生儿。本研究的结果显示，GBS 对红霉素和克拉霉素的耐药率分别为73.2%和64%。这与符宏建等[7]的研究结果基本一致。对于对青霉素轻度过敏的孕产妇来说，可选用一代或二代头孢菌素类抗生素对其进行治疗。若孕产妇对青霉素重度过敏，可选用红霉素或克林霉素对其进行治疗[5]。

综上所述，这1196 株GBS 主要来自我院的妇产科。GBS对青霉素和万古霉素较为敏感，对红霉素和克拉霉素的耐药性较高。临床上应对孕产妇进行产前筛查，若发现其存在GBS 感染应使用青霉素和万古霉素等抗菌药物对其进行治疗。