不同类型急性白血病外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞等在不同时期的变化分析

董奎良，姚洋，刘娇媛

（大石桥市中心医院检验科，辽宁 大石桥 115100）

急性白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病，疾病的发生受机体免疫功能状态的影响,会导致患者出现贫血、出血、感染症状，甚至会危及患者生命[1]。有资料报道称，免疫功能水平会对急性白血病的治疗与转归产生明显影响[2]。为分析机体免疫功能变化对于急性白血病的意义，本研究选取38 例急性淋巴细胞白血病患者，45 例急性髓系白血病患者与45 名健康者为研究对象，旨在探讨不同类型急性白血病外周血T、B淋巴细胞与NK细胞的变化规律，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年3月至2019年6月本院收治的38 例急性淋巴细胞白血病患者（ALL 组）及45 例急性髓系白血病患者（AML组），并取同时期在本院接受体检的健康者45名（对照组）为研究对象。ALL组男22例，女16例，年龄22～68岁，平均（41.9±5.6）岁；包括T型4例，B型34例。AML组男27 例，女18 例；年龄20～71 岁，平均（42.3±5.8）岁。对照组男25例，女20例；年龄18～65岁，平均（41.2±5.4）岁。3 组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性，本研究获得医院伦理委员会审批通过。

纳入标准：急性白血病经临床综合检查确诊；对本研究内容知情同意。排除标准：机体存在其他恶性肿瘤疾病者；合并其他免疫相关疾病者。

1.2 方法 采集3组晨起空腹静脉血2～3 mL，应用EDTA管进行抗凝，取2支流失试管（12 mm×75 mm），在管体表面做好标记，其中一支为对照管，另一支为测定管，采用同型对照抗体20 μL 加入到对照管内，采用6 色标记CD3FITC/CD16+56PE/CD4PE-cy7/CD8APCcy7/CD45PercP/CD19APC 各20 μL加入测定管内，向各管内加入100 μL外周血，充分混合均匀后，放置于遮光室内常温孵育15～20 min，应用自动裂解仪对细胞进行裂解、固定、洗涤，然后采用美国Olympus公司生产的HKD560 型上流失细胞仪开展检测；同时，按照《NCCN 临床实践指南》的推荐方案对急性白血病患者开展治疗。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量资料以“”表示，比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组淋巴细胞亚群水平比较 ALL 组与AML 组治疗前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞阳性率与CD4+/CD8+均低于对照组（P＜0.05）；治疗前，AML组CD3-CD19+细胞阳性率低于对照组（P＜0.05），CD3-CD19+细胞阳性率高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 3组淋巴细胞亚群水平比较（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

表1 3组淋巴细胞亚群水平比较（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

注：与对照组比较，aP＜0.05

组别ALL组（n=38）AML组（n=45）对照组（n=45）CD3+40.91±10.68a 39.82±10.23a 68.73±2.35 CD3+CD8+19.83±5.11a 19.22±4.13a 28.63±2.15 CD3+CD4+21.38±7.15a 20.13±8.22a 37.29±1.76 CD4+/CD8+0.89±0.32a 0.99±0.35a 1.60±0.25 CD3-CD19+35.71±8.4a0 3.48±1.55a 10.85±2.36 NK 7.66±4.28a 6.50±3.18a 15.61±2.48 Treg 18.84±5.50a 17.68±2.89a 7.25±2.21

2.2 急性白血病患者治疗前后淋巴细胞亚群水平比较 治疗后，ALL组与AML组CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞阳性率与CD4+/CD8+值高于治疗前（P＜0.05）；治疗后，AML 的CD3-CD19+细胞阳性率高于治疗前（P＜0.05），ALL 组CD3-CD19+细胞阳性率低于治疗前（P＜0.05），见表2。

表2 急性白血病患者治疗前后淋巴细胞亚群水平比较（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

表2 急性白血病患者治疗前后淋巴细胞亚群水平比较（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

注：与治疗前比较，aP＜0.05

组别ALL组（n=38）AML组（n=45）NK 7.66±4.28 12.10±2.38a 6.50±3.18 14.35±3.40a时间治疗前治疗后治疗前治疗后CD3+40.91±10.68 77.60±8.50a 39.82±10.23 58.61±4.58a CD3+CD8+19.83±5.11 22.50±2.36a 19.22±4.13 22.61±2.85a CD3+CD4+21.38±7.15 30.48±2.40a 20.13±8.22 33.05±2.42a CD4+/CD8+0.89±0.32 1.50±0.22a 0.99±0.35 1.30±0.21a CD3-CD19+35.71±8.40 4.51±1.88a 3.48±1.55 7.81±2.55a Treg 18.84±5.50 10.25±1.23a 17.68±2.89 10.33±2.32a

3 讨论

急性白血病属于恶性血液疾病，由于机体造血功能受到抑制，外周血淋巴细胞及功能会出现异常，并影响机体免疫功能。根据表面抗原表达所具备的差异，可将外周血淋巴细胞分为B 淋巴细胞、T 淋巴细胞与NK 细胞等类型，其所具备的免疫效应存在差异，可使机体免疫内环境维持在稳定状态[3]。外周T淋巴细胞亚群可反映细胞免疫功能状态，但由于仅成熟淋巴细胞可对CD4+和CD8+进行表达，因此，CD4+/CD8+比值可直接反映机体免疫功能状态[4]。有资料报道称，当恶性血液病患者具备输血指征时，为其采用红细胞输注后，患者机体T 淋巴细胞亚群水平会出血明显改变[5]。CD3-CD16+CD56+的NK细胞可直接杀灭病毒感染细胞及肿瘤细胞，发挥抗肿瘤作用，并可分泌细胞因子，从而使多种免疫细胞得到活化，并提升机体免疫功能[6]。本研究结果显示，ALL组与AML 组治疗前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 细胞阳性率与CD4+/CD8+值均低于对照组，提示急性白血病的发生会使机体免疫功能明显降低，抑制机体抗肿瘤效应，使其保持在免疫抑制的状态[7]。治疗后，急性白血病患者CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 细胞阳性率与CD4+/CD8+值均高于治疗前，提示经过治疗后，可使急性白血病患者的机体细胞免疫功能增强。

CD19属于B细胞表面膜抗原，可对体液免疫应答进行介导，在体液免疫应答中发挥重要作用，并可分泌多种细胞因子，从而在免疫调节中发挥作用[8]。本研究结果显示，AML组患者体液免疫功能显著降低，在实施治疗后得到改善，而ALL组患者的CD3-CD19+升高明显，分析其原因，可能与研究对象中B细胞性病变占比较高有关，在实施治疗后该指标显著降低，是否受到幼稚细胞减少的影响仍需开展进一步研究[9-10]。

综上所述，外周血T 淋巴细胞亚群、B 淋巴细胞和NK 细胞可有效评估不同类型急性白血病的病情严重度、治疗效果与预后情况。