酪酸梭菌活菌辅助硫普罗宁和美他多辛治疗酒精性肝病患者疗效及其对患者肠道菌群分布的影响*

伍 畅，田 园，刘洪岩

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)病因明确，为长期大量饮酒所致的中毒性肝损害，可致肠黏膜血液循环障碍，使得肠道菌群移位。ALD患者初期仅表现为轻度酒精性脂肪肝的表现，可逐渐发展为酒精性肝炎、酒精性肝硬化，甚至肝功能衰竭[1, 2]。硫普罗宁和美他多辛为临床治疗ALD的常用药物，前者可促进细胞的修复和再生、增强肝解毒功能，后者则可加速体内对乙醇和乙醛的代谢、排泄，而发挥护肝作用。两者联用可在一定程度上改善ALD患者的临床症状，但它们对肠道菌群的影响较小，不利于改善患者的肠道功能[3]。酪酸梭菌活菌片则可通过释放酪酸梭菌而改善患者肠道菌群环境，纠正肠道菌群失调，但目前多被用于腹泻和结肠炎等疾病的治疗，关于其辅助治疗ALD患者的研究报道还较少[4]。本研究应用酪酸梭菌活菌片辅助硫普罗宁和美他多辛治疗ALD患者，观察了短期疗效及其对患者血清糖缺失性转铁蛋白(carbohydrate-deficient transferrin，CDT)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)水平和肠道菌群分布的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2018年6月～2019年12月我院消化内科收治的ALD患者102例，男98例，女4例；年龄为34～68岁，平均年龄为(55.3±5.4)岁；体质指数(body mass index，BMI)为22.3～28.1 kg/m2，平均为(24.1±2.2)kg/m2。符合《酒精性肝病防治指南(2018年更新版)》[5]的诊断标准，具有长期(超过5年)饮酒史，女性饮酒量>20 g/d，男性饮酒量>40 g/d，其中酒精性脂肪肝30例，酒精性肝炎24例，酒精性肝硬化48例；病程3～7年，平均为(4.4±0.6)年。心、脑、肾等重要器官功能正常、既往均无肝脏手术史、未接受过肝移植。排除标准：非酒精性脂肪性肝病、伴自身免疫性、药物性、寄生虫性或病毒性肝脏疾病、肿瘤、伴人类免疫缺陷病毒感染、营养不良、有精神病史或精神病患者、过敏体质或对酪酸梭菌活菌、硫普罗宁或美多他辛过敏、入组前8周内使用过免疫功能调节剂或抗生素。采用随机数字表法将ALD患者分为观察组51例和对照组51例，两组性别、年龄、BMI、病程、ALD类型或病情等一般资料比较无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。本研究方案已经获得我院医学伦理委员会审核批准，患者签署知情同意书。

1.2 治疗方法 所有患者入组后均完善各项检查，指导进食高蛋白、低碳水化合物、低脂食物，多吃新鲜水果、蔬菜，严格戒酒，同时给予硫普罗宁片(烟台鲁银药业有限公司，国药准字H20073806)200 mg口服，3次/d，美他多辛片(山东齐都药业有限公司，国药准字H20060280)500 mg口服，3次/d；观察组在此基础上予以酪酸梭菌活菌片(青岛东海药业有限公司，国药准字S20040083)700 mg口服，3次/d。两组均连续治疗观察12 w。

1.3 指标检测 采用ELISA法检测血清CDT和HGF(武汉华美生物工程有限公司)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6，上海信裕生物科技有限公司)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α，齐一生物技术有限公司)、核因子-кB水平(nuclear factor кB，NF-кB，上海纪宁生物科技有限公司)；使用Celsis R Advance II TM快速微生物检测系统检测粪便双歧杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌和粪肠球菌(湛江安度斯生物有限公司，以菌落形成单位的对数值表示检测结果，即lg CFU/g)。

2 结果

2.1 两组血清CDT和HGF水平比较 在治疗12 w后，观察组血清CDT和HGF水平显著低于对照组(P<0.05，表1)。

表1 两组血清CDT和HGF水平比较

2.2 两组肠道菌群水平比较 在治疗12 w末，观察组粪双歧杆菌和乳杆菌水平显著高于对照组，而大肠埃希菌和粪肠球菌水平显著低于对照组(P<0.05，表2)。

2.3 两组血清细胞因子水平比较 在治疗12 w末，观察组血清细胞因子水平显著低于对照组(P<0.05，表3)。

表2 两组粪肠道菌群水平比较

表3 两组血清细胞因子水平比较

3 讨论

ALD是一种慢性进行性疾病，尽管其致病因素单一，但其发病机制复杂，主要包括酒精的直接毒性及间接毒性所致的细胞因子释放、氧化应激和免疫损伤等[6-8]。近年来研究[9, 10]发现，肠道菌群紊乱诱发的炎症反应在ALD患者发病中起主要作用。虽然ALD较易确诊，但目前临床仍缺乏疗效确切的治疗药物及措施。硫普罗宁可活化超氧化物歧化酶，清除自由基，亦可抑制过氧化物的产生，进而增强肝脏解毒功能、有效保护肝脏组织[11]。美他多辛则可改善线粒体三羧酸循环，促进乙醇和乙醛在体内的代谢，避免其大量积聚。硫普罗宁和美他多辛具有互补作用，可对ALD患者产生一定的治疗效果，但对肠道微生态的调节作用不足[12]。有研究[13]发现，益生菌辅助治疗可有效减轻肝功能损伤，提高ALD患者临床治疗效果。

酪酸梭菌活菌片主要成分为酪酸梭菌活菌，又名丁酸梭状芽孢杆菌，口服后可在肠道内大量释放并繁殖酪酸梭菌，亦可发酵产生丁酸，降低肠道的酸碱度，进而改变ALD患者肠道菌群环境，有助于促进乳杆菌和双歧杆菌等益生菌繁殖，抑制大肠埃希菌和粪肠球菌的生长，有效纠正肠道菌群失调，进而促进黏膜屏障的恢复，降低肠黏膜通透性，从而防止来自肠道的内毒素、氨、吲哚等大量进入肝脏而破坏肝脏组织，有效抑制病情进展，提高临床疗效[14]。此外，酪酸梭菌作为肠道厌氧菌的一种，可在肠道中与病原微生物形成营养、黏附的竞争关系，并产生生物化学抑制作用[15]。酪酸梭菌活菌片可通过纠正肠道菌群失调，促进有益菌的生长、繁殖等促进肝功能恢复。本研究在治疗后，观察组粪便双歧杆菌和乳杆菌水平显著高于对照组，而大肠埃希菌和粪肠球菌水平显著低于对照组，提示酪酸梭菌活菌片辅助硫普罗宁和美他多辛可有效改善ALD患者肠道菌群紊乱。

由于ALD患者门脉回流受阻，压力升高，可致肠黏膜淤血、水肿而影响肠道微生态，使得细菌或其内毒素移位，并刺激肝组织Kupffer细胞释放并分泌IL-6、TNF-α和NF-кB等细胞因子，而造成肝组织炎性损伤[16, 17]。此外，长期酗酒可使得乙醇及其代谢产物对肝脏产生刺激，导致血清CDT和HGF水平升高，可进一步促进肝硬化进展。血清CDT和HGF可作为评估ALD患者病情严重程度的指标[18, 19]。本研究结果显示，在治疗12周结束时，观察组患者血清CDT、HGF、IL-6、TNF-α和NF-кB水平显著低于对照组，提示酪酸梭菌活菌片辅助硫普罗宁和美他多辛治疗可有效抑制ALD患者炎症反应，减少对肝脏的刺激。分析原因，我们认为酪酸梭菌活菌片所释放的丁酸可促进肠上皮再生与修复，同时发挥抗溃疡和消炎的作用[20]。此外，酪酸梭菌活菌片促进肠道益生菌繁殖后，可为ALD患者提供多种维生素和微量元素，进而增强机体对营养物质的吸收利用能力及机体免疫功能，从而减缓ALD病情的发展进程[21]。动物实验研究[22]亦指出，酪酸梭菌及其代谢产物可有效调节肠道微生态及免疫功能紊乱，抑制炎症通路的激活而降低细胞因子的释放及炎症刺激。本研究还发现，两组治疗期间均未见明显不良反应发生，提示酪酸梭菌活菌片安全性高，不会引起不良反应。

综上所述，应用酪酸梭菌活菌片辅助硫普罗宁和美他多辛治疗ALD患者可有效改善肠道菌群分布，抑制炎症反应，同时降低血清CDT和HGF水平，减少对肝脏的刺激，疗效显著，安全性好。