CD4+ CD25+调节性T细胞检查在肺癌患者诊疗中的作用

赵海燕 陈永生

【摘要】 目的：研究各型肺癌患者外周血中CD4+ CD2 5+調节性T细胞（ regulatory Tcell，Tregs）的变化及意义。方法：采用流式细胞技术检测116例肺癌患者外周血中CD4十CD25+ Tregs的变化，并选择40倒健康体检者作为对照组进行结果分析。结果：肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs占CD4+T淋巴细胞总数明显高于健康对照者;化疗前肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs数明显高于化疗后肺癌患者。结论：肺癌患者外周循环血中CD4+ CD25+ Tregs水平表达明显身高，可能与肺癌患者免疫功能调控紊乱有关，可作为肺癌患者诊断与治疗的一项重要指标。

【关键词】 流武细胞术;调节性T细胞;肿瘤

【中图分类号】R969.4

【文献标志码】A

【文章编号】10050019《202 0）21-002-01

肿瘤的发生、发展不仅能抑制自身免疫性疾病的发生，还可能参与肿瘤免疫的调节。CD4+ CD25+ Tregs在人体内的表达水平与肿瘤的关系报道较多，但有关CD4+ CD25+ Tregs的表达与肺癌关系的研究报道较少，我们探讨了肺癌患者外周血CD4+ CD25+ Tregs水平与各型肺癌的关系及其临床意义。

1 材料和方法

1.1 一般资料选择2018年9月2019年9月我院住院的经病理诊断的肺癌患者116例（男62，女54），年龄（25-83）岁，平均年龄58.5岁，其中鳞癌42例，小细胞未分化癌30例;大细胞未分化癌23例，腺癌21例。

1.2正常对照组选择健康查体人员40例（男20，女20），年龄31-60岁，平均年龄55.5岁。其年龄、性别方面均与病例组具有可比性。排除肿瘤及免疫性等疾病。

1.3实验指标与检测方法

1.3.1患者人院后当天取静脉血;治疗一个疗程后，分别抽取空腹静脉血3 ml，用流式细胞仪测定CD3+、CD4+、CD8+、CD25+含量，流式细胞仪为美国Beckman Coulter EpicsXL型。

1.3.2 小鼠抗人荧光标记单克隆抗体anti- CD3、anti- CD4、anti- CD8、anti- CD25等均购自美国BDIS公司。

1.3.3淋巴细胞荧光抗体标记新鲜的全血3011L与抗体10μL混合，室温孵育30 min。加入anti- IgG异硫氰酸荧光素（FITC） 10μL，室温孵育30 min，PBS冼涤，PBS洗涤后用1%多聚甲醛固定10 min后，用流式细胞仪分析。

1.3.4式细胞仪数据获取和分析全部数据用流式细胞仪（美国BD公司）和软件LYSYSⅡ进行双色荧光参数获取和分析。

1.3.5 方法 以SPSS 10.0 for Windows统计软件进行统计学处理，所有数据均用x±s表示，采用t检验（独立样本t检验及配对样本t检验）及相关分析。

2 结果

2.1肺癌患者组和正常对照组CD3十等检测结果见表1

2.2 肺癌患者组中化疗组与未化疗组结果比较见表2

2、3鳞癌、小细胞未分化癌、大细胞未分化癌、腺癌组都较正常对照组有显 胞癌。著升高（P<0.01），这四组中又以腺癌组升高最多，其次为鳞癌、大细胞癌、小细

3 讨论

CD4+CD25+Tregs是一具有免疫调节功能的T细胞亚群，大量的有研究表明，CD4+ CD25+ Tregs在许多肿瘤患者的外周血和肿瘤组织中均有增高[2]示肿瘤患者可能存在天然的免疫反应，肿瘤患者体内CD4+CD25+ Tregs数量的增高即是抑制肿瘤免疫的机制之一[3]，D4+ CD25十Tregs通过抑制效应T细胞功能，在维持自身免疫耐受中发挥重要作用[4]，在以后的肿瘤治疗中不容忽视。

通过对本组各型肺癌肿瘤患者外周血CCD4十CD25+ Tregs数量的检测，并与正常对照组进行了对比研究，发现正常人、肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs分别占CD4+T淋巴细胞总数的（8.3±2.5）%和（12.7±1.65）%，引起这种变化的原因可能是肿瘤细胞通过某种机制使体内CD4+ CD25+ Tregs的数量增高来抑制肿瘤免疫。本组结果显示，肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs的数量与病理类型无明显相关关系（P>0.05），但与肺癌分化程度和临床分期关系密切，这说明随着肿瘤的进展，肿瘤细胞产生的CD4+ CD25+ Tregs数量增多，使免疫细胞的活性被抑制，有利于肿瘤的生长与转移化疗后患者体内癌负荷减少，与化疗前相比，抑制肿瘤免疫的CD4+ CD25+ Tregs数量也相应减少，患者免疫抑制得以改善。

本研究认为肺癌患者体内CD4+ CD25+ Tregs比例上升可能是导致免疫抑制的原因之一，肺癌患者治疗前后的CD4+ CD25+ Tregs数量的变化可作为肺癌患者诊断与治疗及预后评估检查的指标之一。

参考文献

[1]Schaefer C，Gkim G. Albers A. et al. Characteristics of CD4+ CD25+ reguIatory T cell ln the peripheral circulations of patients with head and neck cancer[J]. BJC. 2005，8 （2）：1。

[2]Liyange UK， Moore TT， Joo HG. et aI. Prevalence of regulatory T cells isincreased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or breast adenocarcinoma[J]. Immunology. 2002， 169 （5）： 2756.

[3]Seo N. Hayakawa S，Takigawa M.et al. Interleukinlo express at earlytumor sites induces subsequent generation of CD4+T regulatory cells and systemic collapes of antitumour immunity [J]. Immunology， 2001. 103（4）：449.

[4]Sasada T. Kimuia. Yoshida Y. et al.CD4+ CD25+ regulatory T cells in patients with gastrointestinal malignancies： Possible involvement of regulatory Tcells in disease progression[J]. Cancer， 2003， 98 （5）： 1089.