卵巢浆液性肿瘤组织中ELAV1、HCCR、MCM4表达水平及其临床意义

陈粉合 邓 祎 王恩栋 王 琰

卵巢浆液性肿瘤能够导致患者生存预后的显著恶化，在临床上的长期随访过程中，可以发现卵巢浆液性肿瘤的总体发病率占据了所有卵巢恶性肿瘤的15%以上[1]。卵巢浆液性肿瘤的发生，不仅能够导致近期卵巢肿瘤患者生活质量的下降，同时还能够增加远期患者致残及多器官功能衰竭的风险[2]。可以发现细胞肿瘤相关蛋白，能够在卵巢上皮细胞的异常病变过程中发挥作用。胚胎致死性异常视觉基因1(ELAV1)能够通过影响到转录上游启动子的激活程度，加剧上皮细胞的早期异常分裂的风险，影响到卵巢肿瘤的发生[3]；人宫颈癌基因(HCCR)能够通过整合病毒颗粒，降低对于癌基因的错配修复能力，最终提高恶性肿瘤细胞的发生风险[4]；微小染色体维持蛋白(MCM)能够在染色体特性的维持方面发挥作用，其对于染色体稳定性的修饰作用，能够提高肿瘤细胞染色体异常分离的可能[5]。为了揭示ELAV1、HCCR、MCM4的表达与卵巢浆液性肿瘤的发生关系，从而为临床上卵巢肿瘤的发生提供理论参考，本次研究选取2016年3月至2017年8月在我院治疗的卵巢浆液性肿瘤患者为研究对象，探讨了ELAV1、HCCR、MCM4的表达情况，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2016年3月至2017年8月在我院治疗的卵巢浆液性肿瘤患者为研究对象。纳入标准：①成年者；②经临床表现和病理检查确诊为卵巢浆液性肿瘤；③无其他生殖系统疾病；排除标准：①临床资料不完全者；②无其他严重基础疾病者。根据标准共纳入患者150例，年龄35～65岁，平均(45.35±4.97)岁；其中，良性肿瘤组100例，年龄30～62岁，平均(45.31±5.03)岁；恶性肿瘤组50例，年龄35～65岁，平均(45.37±4.67)岁。两组的一般资料方面无明显差别，研究经伦理委员会评审通过。

1.2 研究方法

石蜡切片采用二甲苯进行脱腊至水，5%的双氧水常温在孵育10 min，采用磷酸盐缓冲液孵育5 min，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，5%的山羊血清抗体封闭10 min，不冲洗，滴加一抗(购自abcum公司 批号：20119304浓度：1∶500)，4 ℃冰箱孵育过夜，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，滴加生物素标记好的二抗(购自北京康泰生物 批号：20104856 浓度：1∶1000)，37 ℃孵育30 min，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，滴加第二代辣根酶标记的工作液体，37 ℃孵育10 min，蒸馏水冲洗3次，每次5 min，显色之后采用酒精脱水、二甲苯透明、树胶封片，镜下观察。

1.3 评价指标

观察两组患者ELAV1、HCCR、MCM4表达情况，比较不同临床病理类型卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表达的差异，分析影响卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表达的因素。

1.4 统计方法

数据采用Excel录入后，应用SPSS 11.5软件分析。应用卡方检验、回归分析法进行统计学处理。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者ELAV1、HCCR、MCM4水平的比较

卵巢浆液性恶性肿瘤组患者的ELAV1、HCCR、MCM4阳性表达率分别为60.00%、70.00%、80.00%，高于对照组的12.00%、8.00%、5.00%(P<0.001)，见表1。

表1 两组患者ELAV1、HCCR、MCM4阳性表达的比较/例

2.2 不同临床病理特征卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的比较

临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、组织学分级为中、低分化、有淋巴结转移的卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白阳性表达水平较高，不同年龄的卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4水平无明显差别，见表2。

2.3 影响卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

将单因素分析有意义的因素作为自变量，将ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平作为因变量进行多因素分析，结果显示，组织学分级是影响卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素。见表3。

3 讨论

多种多样病理性因素导致的卵巢生发上皮细胞的异常病变，能够影响到癌基因的突变、提高癌细胞内肿瘤蛋白的激活程度。在遗传因素或者后天卵巢性激素分泌紊乱的过程中，癌细胞的内外环境的改变，均能够提高卵巢浆液性肿瘤的总体发病率[6]。临床上的观察发现，卵巢浆液性肿瘤患者的3年或者5年生存率明显的下降，患者的总体无瘤生存时间可显著的缩短[7]。通过对于卵巢浆液性肿瘤患者临床病理特征的评估，可以为临床上卵巢肿瘤相关患者的诊疗提供参考依据。不同的肿瘤分子相关蛋白，均能够在卵巢浆液性肿瘤的发生发展过程中发挥作用。虽然现阶段临床上有多数研究者探讨了肿瘤蛋白的波动在卵巢浆液性肿瘤发生过程中的价值，但多数研究仅仅限于对于CA125、CA199或者CEA等指标的探讨。相关研究缺乏新颖性和创新点。同时通过对于CA125、CA199或者CEA等指标的研究，难以为临床上卵巢浆液性肿瘤的临床病理特征的评估提供可靠的依据[8]。而本次研究的创新性在于揭露了ELAV1、HCCR、MCM4的表达与卵巢浆液性肿瘤病理特征的关系。最初认为ELAV1主要存在于视网膜上皮细胞中，近年来相关基础方面的研究证实，在生发上皮或者间质组织成分中，ELAV1的表达浓度同样可以明显上升。上升的ELAV1能够通过影响到转录开放阅读区的激活程度，加剧癌细胞核DNA的异常分裂，最终影响到肿瘤的发生；HCCR是宫颈癌相关基因，在妇科恶性肿瘤患者中，HCCR的上升能够影响到肿瘤细胞癌基因的扩增活性，提高癌基因的单核苷酸扩增效率[9]；MCM4是染色体结构维持蛋白，其对于染色体结构的修饰作用，能够影响到染色体的复制速度[10]。

表2 不同临床病理特征卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4阳性表达的比较/例

表3 影响卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

可以发现的是，免疫组化结果中ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表达阳性率水平明显的高于卵巢良性组织，统计学差异显著，表明ELAV1、HCCR、MCM4的高表达可能影响到了卵巢浆液性肿瘤的发生。ELAV1、HCCR、MCM4在浆液性来源恶性肿瘤患者中的高表达，主要由于浆液性肿瘤来源细胞，其癌细胞内不同肿瘤相关信号通路的激活增加了肿瘤蛋白的合成和释放有关[11-12]。而ELAV1、HCCR、MCM4的表达上升，又能够通过正反馈调控作用，提高肿瘤细胞骨架结构复制组装的效率，促进肿瘤细胞的浸润过程。有部分研究者揭露了MCM4的表达与妇科恶性肿瘤的关系，认为在妇科恶性肿瘤患者中MCM4蛋白的表达阳性率水平可随着患者病情的加重而显著上升，同时妇科肿瘤患者的病情进展率越高，MCM4蛋白的表达浓度越高[13]。在研究ELAV1、HCCR、MCM4的表达与卵巢浆液性肿瘤患者临床特征的关系中，发现在临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、组织学分级为中、低分化、有淋巴结转移的卵巢浆液性恶性肿瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白阳性表达水平较高，高于相应的临床病理特征较轻的患者，统计学差异显著，提示ELAV1、HCCR、MCM4的高表达对于卵巢浆液性肿瘤具有显著的标志作用。临床上通过检测ELAV1、HCCR、MCM4，可能在协助卵巢肿瘤临床病情的判断方面发挥一定的作用。ELAV1、HCCR、MCM4上升对于卵巢浆液性肿瘤病理特征的具体影响机制，主要由于癌基因的转录调控的异常、癌细胞内第二信使的激活及信号通路蛋白的异常波动等因素有关[14-15]。危险因素分析也可见，组织学分级是影响卵巢浆液性恶性肿瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素，进一步表明了ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表达与卵巢肿瘤患者的病情关系。

综上所述，在卵巢浆液性肿瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表达浓度可明显上升，同时ELAV1、HCCR、MCM4的表达可能影响到了卵巢浆液性肿瘤的临床分期、组织学分级等病理特征。