猪蓝耳病诊断及防治

2020-12-16 10:44:31陶雪江
中国畜禽种业 2020年1期
关键词:离心管耳病研磨

陶雪江

(江苏省常熟市古里动物防疫站 215500)

猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 的变异株引起的一种急性高致死性传染病[1],猪只一旦感染蓝耳病通常表现出以下临床症状: 猪只突然发病,高热不退,体温可达40~41℃,精神沉郁,卧地不起,食欲减退或废绝,出现呕吐,呈腹式呼吸,大便干燥或腹泻,部分病猪呼吸急促、皮肤发绀、毛孔出现出血点。 猪蓝耳病发病急、传播速度快,特别是饲养管理条件差的养殖场发生率特别高,给养猪户带来严重的经济损失[2]。 近几年,全国各地均有猪蓝耳病发生,造成大量猪只死亡,本病会使猪抵抗力下降而且继发其他疾病,所以,本病没有特效的治疗药物,因此,做好猪蓝耳病的诊断及防治工作尤为重要。

1 患病猪临床症状

某养猪场的患病猪群,临床症状表现为初产母猪和经产母猪发生高热,体温达到40~41℃、精神沉郁、食欲不佳或食欲废绝、呼吸困难,有的母猪在耳尖、乳头、外阴、腹部、尾部等处的皮肤发绀,但以耳尖部最为明显和常见。 发生早产的母猪分娩不顺畅,出现少奶或无奶情况。 仔猪尤其是哺乳仔猪的死亡率很高,可达80%以上。 断奶仔猪发病时大多会出现呼吸困难、咳嗽等症状,有些病猪会表现为腹泻、关节炎、皮肤有斑点。 育肥猪的体温升高可达41℃左右,出现食欲基本废绝,全身发红,呼吸急促,咳嗽等症状。 无继发感染的病猪死亡率较低。 种公猪发病时症状不明显,但会影响精液品质,死精数量增多。

2 鉴定和诊断

2.1 病料采集

可采集流产的死胎、新生仔猪肺、心、脑、肝、肾、脾、扁桃体、支气管外周淋巴结、胸膜、骨髓制成匀浆来做病毒分离; 也可采取发病母猪血清、血浆进行病毒分离。

2.2 细菌分离鉴定

采取发生病变的淋巴结、肾脏,无菌环境下进行细菌分离鉴定试验,37℃恒温培养箱中培养12~24h 后,观察结果。

2.3 RT-PCR病原诊断

2.3.1 处理样品

4 份待检样品0.5g,将称取的样品放入研磨器中研磨,研磨片刻后再加入1.5ml PBS 继续研磨,将研磨好的组织液放入灭菌离心管 (1.5ml) 中,在离心机中 8000rpm 离心 5min,离心完毕后取100μL 上清,再加入30μL 消化液混匀。

2.3.2 提取病毒RNA

处理好的样品中依次加入30μL 醋酸钠溶液,300μL 酚-氯仿-异戊醇混合液,混匀,冰浴 15min,4℃ 12000rpm 离心15min。 取 300μL 上请加入 1.5ml 离心管 (经 DEPC 水处理)中,加入 300μL 异丙醇,混匀,置液氮 3min 后室温融化,4℃15000rpm 离心 20min。

去除上清,沿离心管的管壁慢慢加入75%乙醇1ml,轻旋1 周倒掉,将离心管倒扣在吸水纸上真空抽干,加入9μL 灭菌去离子水和1μLRNA 酶抑制剂,混匀。

2.3.3 RT-PCR 反应

将 RT-PCR 混合液、RNA 酶抑制剂、反转录酶、TaqDNA酶、样品RNA 按要求体积加入PCR 管中,在PCR 仪中进行系列循环后进行延伸。

2.3.4 电泳观察

2g 琼脂糖加入 100ml 电泳液 (1 倍稀释) 中,加热溶解后加入10μL 溴化乙啶混匀,琼脂糖倒入电泳槽内,待凝固后取出梳子,将混合有1μL 上样缓冲液的10μL 扩增产物点样在上样孔中进行电泳。

3 防治分析

3.1 发病地区的防治

3.1.1 无害化处理

根据相关规定,流产死胎、病死猪及病猪的排泄物等要采用深埋、焚烧等方式进行无害化处理。

3.1.2 进行紧急免疫

发生蓝耳病的同时多会伴发猪瘟,猪只发生蓝耳病时其猪瘟抗体水平明显下降,所以也要加强猪瘟的接种免疫工作,建议种公猪每年至少免疫2 次,母猪产后到断奶前免疫一次或每年免疫两次,仔猪断奶前进行首免。 规模化养殖场要严格按照当地制定的免疫程序进行免疫[3]。 另外,根据各地区疫情发生的实际情况,积极做好相关传染病的免疫接种工作。 常规免疫程序为商品仔猪: 断奶后进行首次免疫,30d 后再加强免疫一次; 后备母猪: 70 日龄前的免疫程序可参照商品仔猪的免疫程序,以后在进行配种前接种免疫一次; 种用公猪: 70 日龄前的免疫程序可参照商品仔猪的免疫程序,以后每隔半年加强免疫一次。

3.1.3 进行对症治疗

母猪分娩前10d 左右可连用数天孕畜专用的抗炎药物,以减少母猪流产的发生。 母猪分娩前后各一周可喂服适当孕畜专用的抗生素。 母猪一旦发生蓝耳病,配种时机要往后推迟。 初生仔猪可适当补给电解多维、葡萄糖等。 仔猪断奶阶段和转群猪只要适当给予抗应激药物,以减少应激反应的发生。 及时淘汰没有治疗价值的猪。 对老龄病猪可选用抗菌药物进行治疗。可在发病猪的饲料或饮水中适当添加阿莫西林、氟苯尼考等。猪只食欲减退时可适量加大药量。 如果猪发生便秘可饲喂人工盐、硫酸镁。 病猪继发感染猪瘟、伪狂犬病等疾病时如果确定没有治疗价值要进行淘汰[4]。

3.1.4 加强饲养管理

猪场设置消毒池,严格人员、车辆的出入制度。 做好卫生消毒工作,保持猪舍、用具、场区的清洁卫生,保持通风,饲养密度不宜过大,做好驱蝇、灭鼠工作[3]。 适时调整日粮搭配。 发病期间做好防止猪群流动工作。

3.2 未发病地区的防治

3.2.1 免疫接种

所有的母猪和公猪都要进行两次蓝耳病的基础免疫,两次间隔3 周左右,基础免疫后每隔5 个月进行一次免疫。

3.2.2 引种控制

禁止从蓝耳病疫区引进猪,应坚持自繁自养。

3.2.3 加强饲养管理

猪场设置消毒池,严格人员、车辆的出入制度。 排泄物要及时处理,严格消毒制度,争取做到全进全出。

3.2.4 加强猪瘟、伪狂犬病等的免疫工作

定期开展疾病的免疫抗体监测工作,根据免疫抗体消长规律制定合理的免疫程序并及时进行免疫接种[4]。

4 诊断结果分析

4.1 细菌的分离鉴定结果

细菌分离鉴定未发现细菌生长。

4.2 RT-PCR诊断结果

扩增出的目的条带,与阳性对照结果一致,表明该猪场的病死猪感染了猪蓝耳病。

4.3 猪蓝耳病发生地区情况

各种对应性防治措施有效控制猪蓝耳病的进一步传播,并对已患病猪有明显的治疗效果,病情得到有效控制。

4.4 猪蓝耳病未发生地区情况

经过有效防治工作,没有发生蓝耳病,猪群的整体免疫状况明显提高。

5 讨论

我国早在1996 年就发布了畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程 (GB16548-1996),规程要求对患相关疾病畜禽的肉、尸体及其产品进行无害化处理。 但现实情况并不乐观,在小市场上仍有病死畜禽肉及其产品出现。 所以应加大执行力度,切实做好检疫工作,杜绝病死畜禽肉及其产品的出现。

由于猪蓝耳病暂时没有特效治疗药物,因此,预防控制本病更为重要,只有采取科学预防措施才能有效控制疫情的蔓延。

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