纠正Th1/Th2迁移对过敏性紫癜肾炎的预后影响*

魏向阳，葛 凯，朱 锐，洪 泽

(1.南京中医药大学沭阳附属医院儿科，江苏宿迁 223600；2.江苏省淮安市第一人民医院儿科，江苏淮安 223001)

过敏性紫癜主要是由于药物作用或病原体感染机体等原因造成体内出现循环免疫复合物，其通常沉积于真皮上层毛细血管，侵犯皮肤或其他器官中的细小动脉进而造成过敏性血管炎[1]。临床上多发于儿科，常出现皮肤淤斑并累及肾，对患儿的生长发育较为不利[2]。目前对于过敏性紫癜的发病机制尚未明确，但众多数据称过敏性紫癜是一种由免疫复合物介导的系统性血管炎[3-4]。过敏性紫癜肾炎患儿在急性期病程中，体内存在明显的Th1/Th2免疫应答失衡，白细胞介素(IL)-6、IL-5及IL-4是属于Th2类细胞因子，常出现水平明显增高，Th2的特异膜蛋白分子CD30表达水平也增高，Th1类细胞因子IL-2等分泌减少[5]。因此，对过敏性紫癜肾炎患儿进行早期的干预治疗，有利于遏制疾病向终末期肾病及尿毒症的进展，以减少患儿肾脏受累而改变预后，在临床上具有十分重要的意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2019年1月南京中医药大学沭阳附属医院儿科收治的104例过敏性紫癜肾炎患儿，依据随机数表法将所有患儿分为对照组及观察组，每组患儿52例，2组患儿性别、年龄、体质量等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

1.2纳入标准 (1)所有患儿均符合《小儿肾脏病基础与临床》关于小儿过敏性紫癜肾炎的相关诊断标准[6]；(2)在过敏性紫癜病程180 d内出现蛋白尿或血尿。血尿诊断标准：肉眼血尿或1周内3次镜下血尿，尿红细胞≥3个/高倍视野。蛋白尿诊断标准：1周内出现3次尿常规定性蛋白阳性；24 h尿蛋白量在150 mg以上；1周内出现3次尿微量蛋白在正常范围以上[7]。

表1 2组患儿一般资料比较

1.3排除标准 (1)入院前接受过激素药物；(2)使用了免疫调节剂；(3)原发性免疫功能缺陷患儿；(4)系统性红斑狼疮。

1.4研究方法

1.4.1治疗方法 2组患儿均进行常规治疗，包括泼尼松、双嘧达莫、钙剂、抗感染、肾炎康复片等治疗，其中泼尼松1～2 mg/(kg·d)，晨起顿服，4周后依据尿常规的变化情况减少用药剂量至疗程3个月停药。观察组在此基础上加服增强免疫力营养补充剂及雷公藤多苷[1 mg/(kg·d)分3次口服]，3个疗程(3个月)后根据临床疗效调整剂量。

1.4.2治疗疗效 2组患儿治疗3个月后参照《临床医学》对治疗疗效进行评估[8]。无效：指患儿临床表现及实验室检查均未改善甚至加重；好转：患儿服药治疗后，全身症状减轻且实验室指标改善，肉眼血尿消失，镜检出现好转，尿蛋白减少至(+)或微量；治愈：服药后实验室检查正常，无其他伴随症状，紫癜全部消退，仅留有色素沉着，15 d内无复发。有效率=(好转例数+治愈例数)/总例数×100%。

1.4.3Th1/Th2细胞因子水平测定 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定 Th1/Th2细胞因子[干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-6]水平，ELISA试剂盒购自江西塞基生物技术有限公司，按照ELISA试剂盒的说明书进行具体操作。在酶标仪的第1个孔内加入不同浓度但同剂量的样品及标准品，酶标仪各孔加盖，在37 ℃的温度下放置90 min后，取出酶标板，垂直倒出酶标孔内液体，吸水纸对仪器进行清理，将相应抗体加入每个酶标孔中，在37 ℃下放置60 min。使用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤酶标孔，连续操作3次，并在每个孔内加入ABC工作液，在37 ℃下放置30 min后，使用PBS再次洗涤，连续操作5次，在暗室内，TMB显色液加入至每孔中，在37 ℃避光条件下放置25 min后，加入TMV终止液，使用美国BD公司FACS CantoⅡ双激光六色流式细胞仪测定IFN-γ水平。同种操作方法测定IL-4及IL-6的水平。

1.4.4白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数及C反应蛋白水平测定 对所有患儿抽取外周静脉血，使用德国罗氏公司Cobas 8000全自动蛋白分析仪测定C反应蛋白，使用Sysmex XN9000全自动血细胞分析仪测定白细胞、中性粒细胞百分比、血小板，并对比分析肾炎组患儿治疗前后白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数及C反应蛋白水平变化。

2 结 果

2.12组患儿血浆IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比较 2组患儿治疗前IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；观察组及对照组治疗后IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于治疗前，IL-4及IL-6水平低于治疗前(P<0.05)；观察组患儿治疗后IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于对照组，IL-4及IL-6水平低于对照组(P<0.05)。见表2。

2.22组患儿白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数及C反应蛋白水平比较 2组患儿治疗前白细胞、中性粒细胞、血小板及C反应蛋白水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；2组患儿治疗后白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数及C反应蛋白水平均低于治疗前，观察组患儿治疗后后白细胞、中性粒细胞、血小板及C反应蛋白水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表2 2组患儿血浆IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比较

表3 2组患儿白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数及C反应蛋白水平比较

2.32组患儿临床疗效比较 观察组及对照组治疗总有效率比较，差异有统计学意义(χ2=4.981，P=0.026)。见表4。

表4 2组患儿临床疗效比较

3 讨 论

过敏性紫癜是一种多发于儿童的疾病，主要分为单纯型、腹型、肾型及关节型。单纯型主要是与皮肤有关，病变程度相对较低；腹型多表现为腹痛，疼痛部位多发于脐周及腹部等，常伴有恶心呕吐等胃肠道不良反应[9-10]；肾型的临床表现多为蛋白尿及肾损伤等；关节型累及膝、踝、指、肘等关节，关节出现疼痛或肿胀等临床表现[11]。有研究表明，Th1/Th2平衡打破、体液免疫功能紊乱、凝血异常及纤溶紊乱与过敏性紫癜存在一定关系[15]。过敏性紫癜继发的肾脏损伤称为过敏性紫癜肾炎，随着临床检查技术的发展，肾脏穿刺活检使得过敏性紫癜肾炎的检出率也越来越高[12]。大量的临床实践表明，肾脏受累的程度是影响患儿临床症状及预后的主要因素。

有研究学者将辅助T细胞分类为Th1细胞及Th2细胞，其中Th1细胞主要分泌IFN-γ，IFN-γ能有效对抗机体细胞内病原体；Th2细胞主要分泌IL-5，IL-5能有效地促进免疫蛋白的合成，从而与机体细胞外病原体形成对抗[13-14]。本研究发现，当Th1细胞功能出现异常时，Th1细胞对Th2细胞的拮抗作用减弱，Th2细胞功能出现亢进，这种相辅相成且有相互拮抗的作用，导致过敏性反应的可能性较高。因此，纠正Th1细胞及Th2细胞的失衡是治疗过敏性紫癜肾炎的关键。本研究显示，治疗后观察组患儿IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于对照组，IL-4及IL-6水平低于对照组，提示对过敏性紫癜肾炎患儿进行纠正Th1/Th2迁移治疗，可纠正患儿体内Th1/Th2失衡，IL-4、IL-6及IFN-γ水平得到相应的调节，IL-4水平因机体对其的抵抗作用出现减弱，观察组患儿在常规治疗的基础上进行了增强免疫力营养补充剂及雷公藤多苷治疗，营养补充剂能有效地增强机体的免疫能力，一定程度上也增加了机体的免疫应答能力，并使机体对免疫复合物的清除能力得到提高，且巨噬细胞对细菌的吞噬能力也随之增强，进而减少患儿肾脏损伤并保护了肾脏功能。激素类药物有抗炎及抑制免疫的作用，有研究数据表明，雷公藤多苷能加强抗炎作用，有效减少激素的用量，缩短用药时间，减少不良反应情况等[15]。本研究表明，雷公藤多苷对Th1/Th2细胞因子的抑制作用更强。本研究显示，观察组治疗后患儿外周血中性粒细胞绝对值、白细胞计数、C反应蛋白及血小板计数均高于对照组(P<0.05)，表明过敏性紫癜肾炎患儿的发病与感染具有密切关系。机体受到感染时，病原微生物抗原与体内IgA结合，形成IgA免疫复合物，造成患儿出现多发性小血管炎症病变，IgA免疫复合物主要沉积于全身小血管内皮细胞中[16]。IgA常在肾脏免疫复合中产生沉淀，而患儿出现肾脏受损的主要时间多数在过敏性紫癜发病后的4～6周内，此时间段是机体内免疫复合物沉积高发时间段，故应对患儿进行及时合理的治疗，以减少肾损伤的发生。

综上所述，对过敏性紫癜肾炎患儿及早纠正Th1/Th2失衡，主要是通过Th1及Th2迁移治疗而达到治疗效果。