胸腹水细胞蜡块在经CT定位晚期恶性肿瘤患者中的应用

冯莲

江西省于都县人民医院 (江西赣州 342300)

恶性胸腹水是晚期恶性肿瘤患者常见的并发症，主要特点为体腔液体迅速且异常增多。通常，胸腔与腹腔会出现较多的异常液体，出现于胸腔会引起肺压迫、肺不张，导致肺性脑病、呼吸衰竭，而出现于腹腔则可诱发消化功能障碍，导致恶液质及营养不良的进一步加重，缩短患者的生存期[1-2]。胸腹水样本具有取样损伤小、可重复获取、检查时间短等优点，已被广泛应用于晚期恶性肿瘤的检查中。但常规细胞学涂片难以提供肿瘤病理组织学类型、发病部位等信息，诊断的准确性欠佳。取胸腹水行细胞蜡块诊断和免疫组化检测及基因检测，对临床诊疗及预后均具有重要的作用。本研究旨在探讨胸腹水细胞蜡块在经CT定位晚期恶性肿瘤患者中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年6月至2019年12月于我院就诊的47例经CT定位并显示存在大量胸腹水的晚期恶性肿瘤患者作为研究对象，患者均经病理诊断确诊，其中，男27例，女20例；年龄36～75岁，平均(54.32±3.62)岁。本研究已获得医院医学伦理委员会的审核批准，患者均自愿参与且已签署知情同意书。

1.2 方法

(1)细胞学涂片：取20 ml新鲜胸腹水，以2 000 r/min离心10 min，去上清液，混匀沉渣，滴于载玻片上，使用推拉法制片，阴干后，加入95%乙醇固定5 min，待标本干燥后实施HE染色，并于显微镜下观察。(2)细胞蜡块制作：取100 ml胸腹水样本放于离心管中，以2 500 r/min离心10 min，取沉渣放于10 ml软离心管中，滴加10%中性甲醛溶液，充分混匀后，以2 500 r/min离心5 min，静置20 min，取沉渣，滴加95%乙醇，混匀后，再以2 500 r/min离心5 min，静置20 min，定型后可获取圆形细胞块，进行常规脱水、透明、浸蜡、包埋制成蜡块；将石蜡标本连续切成厚度为5 μm的切片，行HE染色、免疫组化染色。

1.3 临床评价

比较两种检查方法的检出率，并以病理诊断结果为金标准，评估两种方法的诊断结果与病理结果的一致性。细胞学涂片与细胞蜡块诊断标准按照染色细胞百分比和染色程度进行分析，并考虑染色强度和阳性细胞数对结果进行评定，其中，阳性细胞数占比<5%为阴性(-)；阳性细胞数占比≥5%且<25%，胞浆内均匀分布浅棕黄色为弱阳性(+)；阳性细胞数占比≥25%且≤50%，胞浆内均匀分布深棕黄色为中度阳性(++)；阳性细胞数>50%，胞浆内呈棕黑色为强阳性(+++)。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 细胞蜡块与细胞学涂片检查结果比较

经细胞学涂片检查，47例患者中确诊为恶性肿瘤16例(34.04%)，其中倾向腺癌6例(12.77%)，其余10例(21.28%)组织类型难以确定。腺癌细胞明显异型，核浆比高，多形性，核深染，核膜厚、不规则，核仁大，染色质呈粗块状，三维立体结构较强。

经细胞蜡块检查，47例患者中确诊为恶性肿瘤29例(61.70%)，其中肺腺癌17例(36.17%)，其他组织来源与病理类型12例(25.53%)。大部分病理可观察到细胞学结构和排列方式，可见囊泡状、腺样、片状或梁索-乳头状排列的细胞。

细胞蜡块对恶性肿瘤的检出率及与病理结果的一致率均高于细胞学涂片，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 细胞蜡块与细胞学涂片检查结果比较[例(%)，47例]

2.2 典型病例

患者男，为晚期肺腺癌患者，细胞蜡块与细胞学涂片比较显示，细胞量丰富，HE染色色彩鲜艳，胞质、核仁清晰，见图1～2。

注：图1A，×10；图1B，×40

注：图2A，×10；图2B，×40

3 讨论

近年来，我国恶性肿瘤的发病率及病死率均呈逐步上升的趋势，多数患者确诊时病情已进展至中晚期，错失了手术治疗的最佳时机。此类患者一般身体条件较差，难以耐受活检检查，因此，如何判断肿瘤原发部位和病理类型，以指导临床制定治疗方案成为研究的热点。晚期恶性肿瘤患者往往伴发大量胸腹水，是由于癌细胞转移至腹腔或侵袭腹膜而刺激腹腔、腹膜，损伤内皮细胞并使血管通透性增加，以及癌细胞抑制淋巴管，阻碍淋巴液回流所致，不仅会诱发呼吸困难等多种不适症状，还会增加治疗难度，影响患者生存期[3]。

以往多采集患者的胸腹水行细胞学涂片检查，仅凭借细胞形态学查找肿瘤细胞，但因涂片质量较差，背景血细胞过多，肿瘤细胞量少，加之肿瘤细胞不典型或肿瘤细胞异型性不明显，易出现漏诊或误诊。此外，在行细胞学涂片检查时可能出现以下不良情况：(1)组织内存在过氧化氢酶，洗涤时可能出现脱片；(2)经95%乙醇固定，可能损伤某些抗原；(3)细胞相对分散，试剂耗费量较大，易出现边缘现象[4]。本研究结果显示，细胞蜡块对恶性肿瘤的检出率及与病理结果的一致率均高于细胞学涂片，差异有统计学意义(P<0.05)，表明将胸腹水细胞蜡块应用于经CT定位晚期恶性肿瘤患者中的检出率较高。将收集的细胞学样本制作成细胞蜡块，切片检测，不仅能抑制过氧化氢酶所致的泡沫，而且能检测多种肿瘤标志物，因细胞集中，还能有效避免检测中出现边缘现象，提高检测准确度。与细胞学涂片比较，细胞蜡块检查镜下观察显示，染色对比清晰，背景干净，细胞数目更富集、厚薄均匀，利于判断肿瘤原发部位，指导临床治疗[5]。

综上所述，将胸腹水细胞蜡块应用于经CT定位晚期恶性肿瘤患者中的检出率较高，且可评定肿瘤来源，为临床制定治疗方案提供参考。