盐酸米诺环素治疗绝经妇女牙周炎患者的疗效及其对龈沟液中炎性因子和骨代谢因子的影响

李 慧, 李明贺, 赵 聪, 苏 畅

（1.北京市密云区医院口腔科，北京 101500；2.吉林大学口腔医院口腔颌面外科，吉林 长春130021）

牙周炎属于口腔科常见疾病，表现为患者牙周支持组织出现炎症反应，患者临床表现以牙龈出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收和牙松动等为主，从而降低患者生活质量。绝经妇女由于多存在防御能力下降和骨质疏松等，因此其发生牙周炎的概率较大，成为影响机体健康的主要疾病之一。既往临床上多选择牙周基础治疗清除牙菌斑和牙石等，以消除炎症［1］。但对于牙周袋较深的患牙或根分叉等较难清洁的部位，单纯机械方法治疗效果有限［2］。以往有研究［3-4］表明：可以通过口服药物辅助治疗绝经妇女牙周炎，但全身用药的作用比较分散。近年来有学者［5-6］提出可在牙周袋内置入药物缓释剂辅助治疗牙周炎。盐酸米诺环素对深牙周袋和侵袭性牙周炎的治疗效果明显［7-9］。目前关于盐酸米诺环素对绝经妇女牙周炎的疗效尚未见报道。本研究探讨盐酸米诺环素辅助治疗绝经妇女牙周炎的效果及其对患者龈沟液炎性因子与骨代谢因子的影响，阐明其在绝经妇女牙周炎患者治疗中的可能作用及其机制，为绝经妇女牙周炎的临床治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料

选择2017 年8 月—2018 年10 月在北京市密云区医院口腔科就诊的绝经妇女牙周炎患者86 例，随着时间迁移所有患者陆续纳入本研究，并按患者意愿分为盐酸米诺环素组（观察组，n=43） 和碘甘油组（对照组，n=43）。所有患者均为女性，年龄50～65 岁， 观察组患者平均年龄为（56.42±3.34） 岁， 对 照 组 患 者 平 均 年 龄 为（55.70±2.76） 岁。收集并整理2 组患者的临床资料，2 组患者年龄、菌斑指数（plaque index， PLI）、出血指数（bleeding index， BI） 和探诊深度（probing depth， PD） 比较差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经北京市密云区医院医学伦理委员会审核通过，与所有患者进行沟通，使其了解研究方法，并签署知情同意书。纳入标准：①所有患者均符合《临床牙周病学》［10］中慢性牙周炎的诊断标准，绝经1 年以上；②1 年内未经过系统牙周治疗，且近3 个月未服用抗生素类或激素类药物；③口内余留牙≥20 颗，至少有2 颗磨牙的PD≥5 mm。排除标准：①有碘或四环素类药物过敏史；②存在其他严重口腔疾病者；③存在严重的系统性疾病或感染性疾病者；④中途退出实验者；⑤中途擅自服用抗生素类或激素类药物者。

1.2治疗方法

2 组患者均进行常规牙周基础治疗，包括龈上洁治、龈下刮治，去除菌斑、软垢和牙石等局部刺激，并刮除软化的牙骨质，进行根面平整，之后采用3% 过氧化氢和0.9% 氯化钠对牙周袋行局部交替冲洗，清理机械操作过程中残存的牙石碎片、肉芽组织及病原菌等。在此基础上，观察组将盐酸米诺环素软膏（商品名：派丽奥，主要成分：盐酸二甲胺四环素，日本新时代株式会社，H20150106，0.5 g） 缓慢注入患牙的牙周袋底，并且边注入边后退直至溢出，1 次/周，连续4 周。对照组将碘甘油（武汉朗力生物医药有限公司， 批号171002，20 mL） 缓慢注入患牙的牙周袋底，并且边注入边后退直至溢出，1 次/周，连续4 周。2 组患者用药后1 h 内禁食水。

1.3评价指标

1.3.1 2 组患者总有效率的评价 总有效率评价标准：治疗后相关症状消失，菌斑、牙龈和牙周袋等相关指标恢复正常，PD 恢复正常或减少＞2 mm 为显效；治疗后相关症状减轻，菌斑、牙龈和牙周袋等相关指标明显改善，PD 减小1～2 mm 为有效；治疗后相关症状和指标无改善或加重，PD 未减小或减小＜1 mm 为无效。总有效率= （ 显效例数+有效例数） /总例数× 100%。

1.3.2 2 组患者PLI、BI 和PD 评分 2 组患者PLI、BI 和PD 评分标准参考文献［10］。①PLI 评分标准：采用气枪将牙面吹干，在近龈缘的牙面上无菌斑计为0 分；采用探针尖的侧面划过牙面才能发现菌斑计为1 分；有肉眼可见的中等量菌斑计为2 分；有大量菌斑计为3 分。②BI 评分标准：牙周探针轻探入龈沟，取出探针30 s 后，牙龈无炎症及出血计为0 分；牙龈颜色有炎症性表现， 不出血计为1 分；有点状出血计为2 分；出血沿龈缘扩散计为3 分；出血流满并溢出龈沟计为4 分；自动出血计为5 分。③PD：龈缘至袋底或龈沟底的距离。

1.3.3 2 组患者龈沟液中炎性因子和骨代谢因子骨钙素（osteocalcin，OC） 水平的检测 分别于治疗前和治疗4 周后收集2 组患者龈沟液样本［11］：去除待检牙表面的龈上菌斑，清水漱口，隔湿，充分干燥牙面，在牙周袋取样位点（近中、远中、颊侧和舌侧4 个位点） 插入已称质量的滤纸条（2 mm ×10 mm），直至遇到轻微阻力，于30 s 后取出（滤纸条若被唾液或血液污染则弃用）， 再次称质量（龈沟液质量=收集后龈沟液的质量－收集前龈沟液的质量），立即置于EP 管中，－70℃保存。检测前将龈沟液样本和试剂盒中试剂平衡至室温下，加入PBS 缓冲液，震荡， 4 ℃、 1 000 r·min－1离心10 min， 取上清液。 ①采用酶联免疫吸附试验（ELISA） 法检测龈沟液中炎性因子白细胞介素6 （interleukin-6， IL-6）、 超 敏 C 反 应 蛋 白（hypersensitive C reactive protein，hs-CRP） 和肿瘤坏 死 因 子α （tumor necrosis factor-α， TNF-α） 水平。②采用电化学发光法测定龈沟液中骨代谢因子OC 水平。

1.4统计学分析采用SPSS 19.0 统计软件进行统计学分析。2 组患者总有效率以百分率表示，组间比较采用χ2检验；2 组患者年龄、PD、PLI 和BI及龈沟液中IL-6、 hs-CRP、 TNF-α 和OC 水平以-x±s表示，正态分布检验采用Shapiro-Wilk 检验，方差齐性采用Levene 检验；组间比较采用两独立样本t检验，组内治疗前后比较采用配对样本t检验；PD 和PLI 分布不满足正态分布， 组间比较采用Mann-Whitney 检验， 组内比较采用Wilcoxon 检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组患者总有效率观察组患者治疗的总有效率为95.35%， 高于对照组（81.40%）（P＜0.05）。2 组患者总有效率见表1。

表1 2 组患者治疗有效率Tab.1 Effective rates of patients in two groups[n=43，n (η/%)]

2.2 2组患者治疗前后PD、PLI和BI 治疗前2 组患者PD、PLI 和BI 比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后2 组患者PD、PIL 和BI 均低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组患者PD、PLI 和BI 均低于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 2 组患者治疗前后PD、PLI 和BITab.2 PD,PLI,and BI of patients in two groups before and after treatment (n=43，x±s）

2.3 2组患者治疗前后龈沟液中IL-6、hs-CRP和TNF-α炎性因子水平治疗前2 组患者龈沟液中IL-6、hs-CRP 和TNF-α 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 治疗后2 组患者龈沟液中IL-6、hs-CRP 和TNF-α 水平均低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组患者龈沟液中IL-6、 hs-CRP 和TNF-α 水平均低于对照组（P＜0.05）。见表3。

表3 2 组患者治疗前后龈沟液IL-6、hs-CRP 和TNF-α 水平Tab.3 Levels of IL-6、hs-CRP，and TNF-α in gingival crevicular fluid of patients in two groups before and after treatment[n=43,x±s,ρB/ (μg·L－1)]

2.4 2组患者治疗前后龈沟液中OC水平治疗前2 组患者龈沟液中OC 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后2 组患者龈沟液中OC 水平均低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组患者龈沟液中OC 水平低于对照组（P＜0.05）。见表4。

表4 2 组患者治疗前后龈沟液中OC 水平Tab.4 Levels of OC in gingival crevicular fluid of patients in two groups before and after treatment[n=43,x±s,ρB/（μg·L－1)]

3 讨 论

牙周炎属于临床常见的牙周组织破坏性疾病，可能与菌斑和牙石等因素有关联，应尽早发现并及时给予有效治疗，否则随着疾病持续加重，炎症将从牙龈向深层发展，甚至可能无法保留牙齿，给患者带来严重危害［12］。牙周炎于绝经妇女更见多发，可能是因为女性绝经后，其性腺功能衰退，雌激素水平降低，导致机体骨质疏松［13］、牙槽骨吸收和牙齿松动，影响患者的生活质量。

既往临床上以常规牙周基础治疗为主，也常以碘甘油注入牙周袋进行辅助治疗，可使菌体蛋白质发生变性反应，同时杀灭细菌，但效果有限。近年来研究［14-15］显示：局部辅助应用抗生素缓释剂可直接作用在病变处，比口服药不良反应少，药效时间长，抗菌消炎效果明显，可应用于牙周炎治疗中。研究［16-17］显示：盐酸米诺环素局部辅助治疗慢性牙周炎和侵袭性牙周炎能迅速杀灭病菌，同时控制感染。盐酸米诺环素属于缓释型四环素类抗生素，具有广谱、长效的抗菌效果，将其缓慢注入患者牙周袋后，能够对其中多种牙周致病菌发挥杀灭效果，迅速减轻炎症反应及相关症状，改善牙周袋深度［18-20］。本研究结果显示：观察组患者总有效率高于对照组，且治疗后观察组患者PD、PLI 和BI较对照组改善更明显，提示盐酸米诺环素对治疗绝经妇女牙周炎有更好效果，可明显改善患者的牙周状况。

盐酸米诺环素的治疗机制可能为其可以抑制破坏牙周组织、促进炎症反应和加快牙槽骨吸收的相关炎性因子。炎性因子IL-6、hs-CRP 和TNF-α 在牙周炎的发生发展中具有重要意义［21-22］，其中IL-6能在牙周局部产生及发挥作用，并反映出牙周组织病变的程度，出现炎症反应时，其水平可呈现升高趋势；hs-CRP 属于非特异性炎症因子，其水平测定可反映机体的炎症程度。TNF-α 作为促炎症因子，在开启炎症反应中效果明显，同时可引发炎性介质和趋化因子等出现，参与牙周组织破坏过程。因此一旦发生牙周炎，患者龈沟液中的IL-6、hs-CRP 和TNF-α 水平明显 升高。 本研究结 果显示：治疗后观察组患者龈沟液中炎性因子IL-6、 hs-CRP 和TNF-α 水平均低于对照组，提示盐酸米诺环素治疗绝经妇女牙周炎，可明显降低其龈沟液中炎性因子水平，促进相关症状消退。

可能由于盐酸米诺环素对骨的作用，使其对绝经妇女牙周炎有特殊明显的疗效。盐酸米诺环素属于四环素类药物，该类药物能螫合钙（Ca），能在骨组织沉积， 促进骨的形成和抑制骨的吸收［23］。因此，盐酸米诺环素除具有杀菌消炎作用外，还可以减少绝经妇女的骨质疏松，减少牙槽骨吸收，并促进牙周组织恢复及再生。 OC 作为一种骨代谢相关因子，与牙周组织破坏程度有关联，可以作为牙周炎进展过程中的标志物，OC 主要由成骨细胞等合成，能激活前破骨细胞，从而促进骨吸收，龈沟液中OC 水平可以反映局部牙槽骨含量变化［24］。本研究结果显示：观察组患者龈沟液中OC 水平明显降低，这可能是由于盐酸米诺环素有较强的骨亲和力，使局部牙槽骨的吸收破坏减少，进而降低了骨转换率，释放入龈沟液的OC 也随之减少，提示盐酸米诺环素可以通过改善骨代谢治疗绝经妇女的牙周炎。

综上所述，盐酸米诺环素治疗绝经妇女牙周炎效果显著，可明显改善牙周状况，快速减轻相关症状，减轻牙周炎患者龈沟液的炎性反应，改善骨代谢，具有临床推广价值。