非洲猪瘟压力下的猪场消毒剂的选择

王 胜，李其松，吴春阳，吴玉龙

（南京新九州农牧科技有限公司 江苏 南京 211100）

自2018年8月非洲猪瘟首次在中国发现以来，一年多来非洲猪瘟给养猪业造成几乎毁灭性的打击，市民们深感菜篮子中猪肉之沉重，猪价及生猪产业的发展多次出现在国家领导人的关注之下。各种鼓励养猪政策不断出台，各大研究院所专家及集团企业发布了诸多的复养方案，复养方案中猪场生物安全的建设都会提高到最为重要的环节，然而在针对非洲猪瘟压力下，消毒剂的选择还存在不少谬误，笔者就非洲猪瘟压力下猪场的消毒剂选择作一论述。

1 非洲猪瘟病毒的特点[1]

非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟的病毒（ASFV）感染家猪和野猪引起的一种烈性传染病。非洲猪瘟病毒在脂质溶剂、洗涤剂、氧化剂里面很容易失活，比如次氯酸盐和苯酚。如ASFV与2.3%的氯和3%的邻苯基苯酚，或者合成的碘溶液接触30min就会失活。其他使ASFV失活的有效措施包括福尔马林、氢氧化钠等。总之，肥皂水、洗涤剂、碱性物质对畜舍、器具、衣物、工具、人类居所等消毒非常有效。飞机上的消毒剂推荐使用卫可。被病毒污染的饲料、饮水和肥料应被掩埋或焚烧。被ASFV污染猪粪可用1%氢氧化钠或氢氧化钙4 ℃处理3 min或0.5%浓度处理30 min。ASFV在pH 4～10的溶液中比较稳定，但在pH小于4或大于11.5的条件下，并且培养基中不含血清会立刻失活；在25%的含有血清的培养基，且pH为13.4的条件下可以存活数天；5 ℃的血清中可以存活6年以上。非洲猪瘟病毒对温度敏感，在60 ℃的条件下持续30 min，或者56 ℃持续70 min都能灭活；在猪的粪便中保持感染性能达到数周，在腐败的血液中可存活15周，在室温保存的血清或血液中可存活18个月。

总之，ASFV是有囊膜病毒，没有有机物保护是很容易被灭活，但在有机物保护下，该病毒对环境及消毒剂抵抗力又变得很强大，养殖场环境中ASFV总是被有机物保护，消毒剂选择必须考虑到这一点。

2 消毒的定义及效果影响因素

2.1 消毒与灭菌的区别[2]

消毒与灭菌是不同数量级的清除杀灭微生物的概念。

消毒是指杀灭或去除外环境中各种病原微生物，目标是达到无害化的过程。正常消毒的标准要求是微生物滴度降低量达到103量级就可以，即消毒的结果是杀灭或者清除微生物达到99.9%就是符合消毒要求。若用消毒对象污染的自然微生物的杀灭率来评定消毒效果，一般以杀灭或清除率达到90%为合格。

灭菌是指杀灭或去除外环境中一切微生物（包括且不限于病原微生物）的过程。因此目前国际上规定，灭菌过程必须使灭菌物品污染的微生物的存活概率降低到10-6。而针对非洲猪瘟这个特定疫病的危害严重性，显然常规的消毒标准是不适合的，针对非洲猪瘟病毒的杀灭要力争采用灭菌级的标准。

2.2 消毒效果的几个影响因素

2.2.1 化学消毒剂的特性

1）化学消毒剂的种类

消毒剂的选择必须针对要处理或者消灭的微生物的特点来确定，例如细菌芽孢或者非囊膜病毒必须选用灭菌级消毒剂，选用低效消毒剂（单链季铵盐）效果就很差。非洲猪瘟病毒为有囊膜病毒，在没有有机物保护的裸病毒时很容易被季胺盐类灭活，10%癸甲溴铵稀释3200倍，20 ℃，作用10 min病毒滴度降低3.6 Log。

2）消毒剂的配方

优异的消毒剂配方能显著提高消毒效果。复方消毒剂的代表产品是卫可（Virkon® S）[3]，其主要成分是过硫酸氢钾复合物能产生生物杀灭剂——高活性氧；偏磷酸盐能中和硬水中的金属离子；烷基苯磺酸钠起到表面活性剂作用，湿润消毒物体表面；苹果酸能降低pH，增效生物杀灭剂；氨基磺酸降低pH，氧化因子和氯化钠通过化学反应产生氯化因子，综合具有“氧化、氯化、酸化”三合一功效，并佐剂成分有效去除了有机物和硬水的影响，有效性的颜色指示剂。复配后成效显著：杀菌谱广，性质稳定，速效，可在低温下使用，不易受有机物、酸、碱及其他物理、化学等因素的影响，对金属器械无腐蚀，无毒无残留，溶于水能饮用。

3）消毒剂的浓度剂量

消毒剂的浓度剂量是操作过程中的基本条件之一。首要是保障消毒剂的剂量，在配比浓度时一般都是以有效成分净含量来进行配比，不正规生产企业标签中往往有陷阱，导致配比浓度往往达不到应有比例。

2.2.2 外界因素

1）环境温度

总所周知，大部分消毒剂随着温度的降低，活性下降，温度越高消毒剂效率越好。温度高低对消毒效果的影响，往往随消毒方法、化学成分及微生物种类不同而不同。例如，戊二醛在低温的使用效果就不如在高温的使用效果，因此低温季不建议使用戊二醛。

2）环境相对湿度

气雾喷雾消毒和熏蒸消毒受环境相对湿度的影响十分明显，环境中的湿度过大会降低消毒剂的浓度，直接导致消毒剂效果失效。例如甲醛熏蒸消毒的最佳相对湿度为80%～90%。

3）消毒剂的作用时间

国标中评价消毒剂的作用时间一般为30 min，可是现场操作中往往达不到30 min，直接导致消毒剂对微生物的杀灭效果下降，例如部分消毒池人经过时不到1 min，这种即时接触是达不到效果的，而对这方面的研究国内还较少。

4）消毒时环境的酸碱度

酸碱度的变化对消毒的效果影响很大：一方面部分消毒剂只有在特定的酸或碱环境中才有效；另一方面酸碱环境中微生物的存活强度也不同。例如ASFV在pH 4～10的溶液中比较稳定，但在pH小于4或大于11.5、不含血清的培养基中ASFV会立刻失活。

5）表面活性和稀释用水的水质

在使用表面活性剂消毒时应格外小心，例如阴离子表面活性剂会影响单链季铵盐类的消毒作用；例如部分地区的硬水（水中含钙、镁离子高）等也容易消耗消毒剂的消毒成分。

表1 农业农村部推荐的防控非洲猪瘟的消毒剂应用范围

6）有机物质类的干扰

养猪场的环境中会残留大量的有机物，例如蛋白质、尿液、血液、油脂等物质，这类物质不但是微生物的保护伞，还会消耗化学消毒剂，容易使消毒剂与有机物质产生化学反应，导致消毒效果的下降。例如普通的氯制剂、季铵盐及过氧化物类的消毒剂受有机物干扰比较明显，醛制剂受有机物的影响相对较小。因此，在消毒前，建议先做消毒对象表面的清理和清洁工作，清除消毒对象的表面有机物和生物膜。同时要注意选择消毒剂有效性测试时的模拟现场的有机物的环境。

7）渗透性

消毒环境的表面往往是凹凸不平的，而且还存在大量的缝隙，作为消毒剂必须要能够渗透到所有消毒物品的表面，达到消毒的全方位。不同消毒剂的渗透性不同，例如用作熏蒸时甲醛蒸汽比环氧乙烷穿透力差。优秀的消毒剂必须具备很强的渗透有机物表面的能力。

8）消毒设备

在实际的畜牧生产过程中，消毒都是借助消毒设备来实现。消毒设备对消毒效果的影响主要是，喷雾雾滴的大小，雾滴的悬浮时间，一般来说，雾滴越小，悬浮时间越长，和有害微生物的接触时间越久，消毒效果就越好。

9）微生物种类特性和数量级

因为不同微生物的自身特性对不同类型的消毒剂的抗性也不同，因此消毒剂选择还要考虑环境中的主要微生物的种类和数量级，污染严重和高数量级的环境必须选择高效的消毒剂。

3 非洲猪瘟压力下猪场消毒剂选择要点

3.1 杀灭非洲猪瘟病毒的消毒剂概述

世界动物卫生组织（Office International Des Epizooties OIE)建议对AFSV可使用0.8%氢氧化钠、2.3%次氯酸盐、0.3%福尔马林、3%邻苯基苯酚和碘混合物进行消毒，但均需作用30 min可灭活病毒。农业农村部推荐的防控非洲猪瘟的消毒剂见表1。

3.2 非洲猪瘟压力下选择消毒剂的要点[4]

3.2.1 注重消毒“药”的概念

不同的消毒“药”对ASHV杀灭比例也存在着极大差异，非瘟压力下选择消毒“药”也需要根据ASFV的特点选择有效的产品。除了有效外还要考虑杀灭的程度，据中国兽医协会编写的《非洲猪瘟知识手册》，国外有实验室用高毒力或中等毒力的ASFV感染猪只后，血液中最高病毒滴度可达109HAD50/mL，口腔液、尿液和粪便中最高滴度可达105HAD50/mL。另有研究表明，水是非常快速的感染途径，在水里面含量只要有一个TCID50就会引起感染。因此对防控ASFV饮水消毒不能是有效，而是要灭菌级。

3.2.2 注重“用药量”的概念

上面所提到消毒剂需要合理的配比比例，确保有效的问题；对于现场用量来说，还需要考虑猪舍的空间和面积，例如空舍消毒按地面面积×2.5作为整栋舍的面积，墙面、天花板、地面的消毒药的用量为300 ml/m2，喷雾消毒40～80 ml/m2（注意消毒雾滴大小）。

3.2.3 综合各方面因素，准确用“药”

表2 国外独立试验室对非洲猪瘟有效消毒剂数据

从表2可以看出针对非洲猪瘟病毒，消毒剂的种类不同、使用剂量、作用时间、环境温度及有机物污染等，造成病毒滴度降低量差异显著，生产上可根据消毒的对象和目的，选择合适的比例。如人穿雨鞋在脚踏盆消毒，考虑有机物干拢，如停留时间短于1 min，可以选择1∶100卫可；如停留10 min，则可按1∶800稀释。另ASFV在有机物存在下抗力增强，所以在消毒前清洗就更为重要。

3.2.4 高效消毒剂定义有别于养猪生产中高效的消毒剂

化学消毒剂可分为高效、中效和低效消毒剂[5]。高效消毒剂能杀灭包括细菌芽孢和真菌孢子在内的外界环境中的各种微生物的消毒剂，又称灭菌剂。例如，在化学消毒剂的划分上，醛类是高效消毒剂，因为2%戊二醛30 min可以杀灭破伤风的芽孢；针对非洲猪瘟病毒，某醛制剂产品（12.74%戊二醛+4.84%癸甲氯铵）在20 ℃、1%有机物中加磷酸缓冲液（pbs）作用30 min，稀释比例为1∶50，非洲猪瘟病毒滴度降低量为4.6 log。如生产中使用国内常见的一种2%的稀戊二醛则浓度理论上至少应该为1∶8稀释，而且非复方的显然影响灭活效果。因此高效消毒剂只是代表其主要成分，在生产实践中还因考虑多种因素。

3.2.5 要了解产品主要成分和特性，避免盲目使用

生产中要了解产品性能，除了对ASFV有效，同时要根据表3避免用刺激性强的消毒剂进行带猪消毒，若使用不当会刺激猪的眼睛、呼吸道黏膜，猪的呼吸道黏膜受损会让ASFV更容易入侵猪体。

表3 消毒剂类别及毒副作用

3.3 猪场消毒工作前要进行清理和清洁工作

由于猪舍存在如灰尘、粪便、尿液及血液等大量有机物，这些有机物大大提高了非洲猪瘟病毒对环境的抗性，消毒前使用专用的泡沫清洗剂有利于提高消毒效果。

4 非洲猪瘟消毒效果评价

中国农业科学院兰州畜牧与兽医研究所编制《非洲猪瘟防控清洁消毒技术要点》，列出非洲猪瘟消毒效果评价方案。

1）设置消毒指示微生物评价消毒效果

消毒前，将枯草杆菌芽孢涂于棉布或纱布，作为消毒指示微生物，置于待消毒场所。消毒结束后，检测芽孢杀灭率。杀灭率达到99.9%以上，判定消毒合格。

枯草杆菌芽孢抗性是强于朊病毒（疯牛病病原）以外的所有微生物，非洲猪瘟病毒是有囊膜病毒，对消毒剂抗力较弱，故可以枯草杆菌芽孢作为消毒指示微生物评价灭杀非洲猪瘟病毒的效果。

2）检测非洲猪瘟病毒评价消毒效果

消毒后，在养殖场、交易市场、屠宰场、无害化处理场点、疫区临时检查站点等高风险场所，采集样品，并进行非洲猪瘟病毒的检测。针对病毒消毒效果的评价方法主要包括分子生物学评价法和细胞培养评价法[6]，养殖场只能采用分子生物学评价法，但由于被灭活病毒的核酸有可能检测出阳性，存在假阳性现象。

3）采用哨兵猪来评价消毒成效

恢复生产前，可以选择10～20头非洲猪瘟阴性健康的猪，作为“哨兵”，进场自由活动30 d，并每天观察临床症状，采集样品进行检测，确保猪场消毒彻底卫生。

2008年FAO／OIE／世界银行发布了针对养殖业的生物安全(Biosecurity)的定义是：为降低病原体传入和散布风险而实施的措施。生物安全的中心思想是隔离、消毒和防疫。应用到非洲猪瘟防控的方案就是隔离和消毒，消毒需要根据现场环境和消毒剂等综合因素进行考虑，选择好消毒剂，规范使用 ，才能建立起针对非洲猪瘟的生物安全网。