非洲猪瘟和经典猪瘟综合监测计划——疫病描述等

译校│刘林青 张淼洁 翟新验

一、疫病描述

1.非洲猪瘟。非洲猪瘟（ASF）是一种高度传染的病毒性出血性疫病，感染猪科动物，包括家猪、野猪和欧亚野猪。非洲野猪，如疣猪和灌木猪，可以作为病毒的自然宿主，不表现出疫病的症状。ASF病毒引起的感染类型包括最急性型、急性型、亚急性型和慢性型。从感染中恢复过来的猪只可能会成为病毒携带者，持续被感染。非洲钝缘软蜱是病毒的自然节肢动物宿主。ASF对人畜共患的危害可以忽略不计，没有证据表明ASF病毒会感染人。该病在非洲地区流行。ASF的死亡率高，在没有ASF的国家暴发，会严重影响养猪产业，限制生猪和猪肉产品的出口，增加控制和根除的成本。目前，没有有效的疫苗或治疗方法。

2.经典猪瘟。经典猪瘟（CSF）是由黄病毒科瘟病毒属的包膜RNA病毒引起的一种高度传染的病毒性败血症，并且只感染猪。该病有几种临床表现，包括急性、慢性和先天性感染，临床表现取决于宿主先前接触病毒的方式、病毒毒力（高、中、低）和宿主因素，如年龄和营养状态。年幼的动物通常比大龄动物更容易受到严重的影响，死亡率可能高达90%；在较大的猪中，感染表现通常是轻微的甚至是亚临床的。幼猪更容易受到严重影响，更有可能出现经典的急性症状。然而，经典的急性症状表现很少见。相反，更多是中度症状占主导地位。流行的CSF病毒具有中度或低度毒力，使得临床诊断变得困难，特别是在大龄猪中难以诊断。低毒力毒株通常会导致轻度感染或亚临床感染症状，长时间难以被发现。CSF感染会出现白细胞减少症、白细胞数量下降等临床表现。虽然很多国家已经根除了CSF，但在世界许多地方依然流行。虽然可以使用CSF疫苗，但对于无疫情的国家，一旦发生疫情仍然会严重影响养猪生产，并且限制生猪和猪肉产品的出口，以及增加控制和根除的成本。

二、监测目的

ASF在亚洲和欧洲的扩散以及加勒比和美国南部的CSF的增加，使得美国加强了对疫病传入的关注。如果这些疫病传入，可能会造成美国疫病形势的复杂，因为这两种疫病的临床表现类似于美国生猪生产中流行的其他疫病。因此，美国农业部动植物卫生检验局兽医服务机构（VS）提出针对高风险群体（病猪和死亡事件）的ASF和CSF监测计划，目的是增强对这两种疫病的预警和应急储备。这个文件是基于当前两种疫病的诊断和监测方法的一个监测计划。

三、监测目标

1.目标1：加强ASF和CSF监测预警能力和应急储备。当前ASF的监测预警依赖于基于可疑病例的被动报告系统。随着国家动物卫生实验室网络提供诊断样品（即扁桃体和脾脏组织）用于实时荧光PCR（rPCR），对ASF的监测可以与目前的CSF监测工作相结合，实施主动监测计划。这种整合计划加强了在国家一级监测ASF和CSF传入风险的能力，提高应急储备。境外动物疫病暴发（包括ASF和CSF）可能会严重考验大批量样品采集、实验室检测容量和数据管理的能力。通过开展有针对性的主动监测项目，建立监测系统可以以较低的样本量提供有效的数据支撑。及时持续的监测也可以提供没有疫病时的数据基线，在疫情暴发开始时协助进行情景评估。最近的阴性检测结果至少可以提供短期无疫的证据。有这些数据也可以减少在疫情暴发初始，为评估疫情影响范围而开展的监测量。

2.目标2：证明无ASF和CSF。除了提高监测预警能力外，该监测计划旨在提供继续支持美国无ASF和CSF的证据。这个可以从下面的介绍的各种监测方式中获得支持，无须额外从其他非目标监测中获得样本。

四、预期成果

预期成果包括产品、决策和行动。

1.产品。监测报告将每季度和每年汇总一次。

表1 利益相关者及其责任和利益

2.评估。监测系统将在第一年后评估，此后每3年一次。

3.决策和行动。评估和报告将用于支持本国无疫声明，并用于调整防控疫病传入的准备。发生任何重大变化，如ASF或CSF对美国威胁的变化、疫病诊断水平的变化或者养猪产业的变化，均应该对该监测计划进行审查和修改。

五、利益相关者和责任

该计划的利益相关者和责任见表1。

六、监测群体

该计划重点关注美国三类猪群的监测，包括大型商品猪群、高风险（生物安全较弱）的猪群和野猪。所有猪群均要通过观察进行监测，如果临床症状与ASF或CSF病例定义一致，应立即启动境外动物疫病调查。

1.商品猪。商品猪将通过以下方式进行监测：兽医诊断实验室提交的与病例定义相符的病猪；与病例定义相符的屠宰样本；在聚集点发现的病猪或死猪的组织样本；高风险（生物安全较低）农场的猪；提交的垃圾（泔水）饲料；服务于高风险猪场的市场样本；具有潜在或已知野猪暴露的猪群。

2.野猪：野生动物服务机构收集的样本。由于对ASF的检查是通过实时荧光PCR（rPCR）进行检测抗原，检测那些没有临床症状的健康猪将没有诊断价值，因为健康动物体内难以检出ASF病原。因此，对病猪进行采样可以提高发现疫病的可能性。

虽然对ASF和CSF的rPCR检测仅限于有临床症状的动物，但是猪群仍要做CSF血清学监测。因为有些CSFV毒株可能无法使动物产生明显的临床症状，但仍然需要监测CSF抗体水平。

七、病例定义

注意：如果暴发ASF或CSF疫情，可以在指示病例后修改病例定义。病例定义也会根据其他信息的增加或者根除的需要进行修改。

1.非洲猪瘟案例定义和报告标准。疑似病例：具有与ASF临床症状和流行病学特点一致的动物。

推定阳性病例：国家兽医服务机构实验室（NVSL）的境外动物疫病诊断实验室（FADDL）或国家动物卫生实验室网络实验室对疑似病例通过非阴性筛查PCR检测为阳性，或NVSL的FADDL对疑似病例的检测，通过两种不同的抗体检测方法，结果都为阳性。

确诊阳性病例：NVSL的FADDL或农业部指定的实验室分离出ASF病毒，或推定阳性病例，NVSL和FADDL对推定阳性的动物进行抗原检测为阳性。

2.经典猪瘟病例定义和报告标准。疑似病例：猪或猪群临床表现、发病史或流行病学特征符合经典猪瘟；或在常规监测期间采集的样本，PCR阳性或者不确定，同时实验室诊断（测序信息或验证实验）或流行病学调查结果待定；或在常规监测期间采集的样本抗体酶联免疫吸附测定（ELISA）为阳性，以及随后的免疫过氧化物酶（IP）和病毒中和（VN）实验阳性，但没有CSF流行病学信息或临床症状。

推定阳性病例：FADDL对rPCR/RT-PCR阳性的可疑病例（有或没有临床症状和/或流行病学特点）重复rPCR/RT-PCR结果为阳性或基因组测序为CSF；猪或猪群的流行病学信息和/或临床表现符合CSF特点，并且同时满足rPCR或RT-PCR阳性，或组织样本ABC检测阳性，或IP-VN检测阳性。

确诊阳性病例：由NVSL的FADDL或农业部指定实验室分离出CSF病毒并测序验证。

八、数据来源和采样方法

在任何情况下采集死猪样品时，应收集全套组织，包括扁桃体、淋巴结、肺、肾、脾、肝、心脏、血清和全血。目前，只有扁桃体、脾脏、淋巴结和全血样本被批准在国家动物卫生实验室网络实验室用于ASF检测；同样对于CSF，只有扁桃体、脾脏和淋巴结样本可以用来检测。如果在国家动物卫生实验室网络实验室中出现非阴性结果，那么收集者将提交其他组织样品给FADDL用于检测。

1.境外动物疫病被动监测。任何符合病例定义的动物或群体都应作为可疑病例报告给当地州和联邦动物卫生官员，报告者包括那些与猪相关的人（包括美国农业部食品安全检验局内部人员、生产者和私人兽医）。该报告将启动境外动物疫病诊断学家（FADD）的境外动物疫病调查。有关其他信息请参阅兽医服务指南12001。至少，从活猪收集的标本是血清、扁桃体刮样和全血（乙二胺四乙酸和肝素）。如果可以，至少应对一头猪（最好是10头猪）进行尸检，并收集以下组织：扁桃体、脾脏、淋巴结和肾脏。为了最大化的发现侵入美国的ASF，对外来病调查中发现的野猪非创伤性发病和死亡事件，需要采集野猪样品。

2.主动监测。

（1）提交给VDL的病猪。向VDL提交的大部分猪组织来自有临床病症美国商品猪，ASF和CSF应该被视为鉴别诊断的病例。因为标本肯定来自临床病猪，这些样本有最高的监测价值，可以提高ASF和CSF的监测预警能力。

在VS监测合作国家动物卫生实验室网络实验室，以下选择标准将用于确定ASF和ASF的合格病例。如果符合以下条件，提交的任何猪只均有资格进行检测，提交的病料有以下任何组织样品之一（按优先顺序排列）：扁桃体；脾脏；淋巴结。同时，观察到和/或报告过以下一种或多种病变或群体发病史：超急性败血症；皮肤变色；出血或淋巴结肿大；脾脏肿大；肾脏瘀点；鼻出血；流产；结肠纽扣样溃疡；扁桃体病变（扁桃体炎、出血性病变和坏死病灶等）；未确诊的中枢神经系统（CNS）病例（尤其是先天性神经系统震颤和非脓性脑炎）；畜群死亡率高于既定基线且至少有1种ASF或CSF临床症状；病理学家因怀疑ASF或CSF而提交其他临床严重或组织病理学相符的病例。

（2）屠宰场和聚集点监测。屠宰场（包括屠宰场、烘烤场所）和猪聚集点采集的病猪或死猪的样本是ASF和CSF屠宰监测的主要目标。聚集点包括市场上生猪采购点，不合格的商品猪和公猪。在聚集点和终端牲畜市场或屠宰场发病、垂死或死亡动物应通过VS现场操作或州动物卫生部门取样；收集的样本包括扁桃体、脾脏和淋巴结。以下是屠宰场的选择标准，所有样本应提交给ASF和CSF认可的国家动物卫生实验室网络实验室。

对于CSF，屠宰监测的目标还包括猪只较多或传入CSF风险较大的烤肉市场和屠宰场。烘焙市场可能包括不合格的猪只或较小的猪只。全国烤肉市场应进行抽样调查，尤其要注意佛罗里达州和得克萨斯州的烘焙市场。由于这两个地区靠近当前CSF流行的地区（加勒比海和中美洲），疫病传播的可能性较高。血清、扁桃体、脾脏和淋巴结样本应进行采集；血清样本应提交FADDL进行CSF血清学检测。

选择标准。出于以下原因而宰杀的猪只应提交给指定的VS监测合作国家动物卫生实验室网络实验室，由国家相关人员进行指导：皮肤和耳朵变色（类似于猪丹毒感染）；败血症；出血性淋巴结；脾脏肿大；肾病；鼻出血；弯腰；濒死状态；高热（猪只可能挤成一团）；扁桃体病理变化（扁桃体炎、出血性病变和坏死灶等）；中枢神经系统体征（动作不协调、划动、盘旋、头部倾斜、精神错乱）。

3.对风险高的猪群进行监测。此类监测包括较高风险的农场，无论是疑似或已知的风险，例如已知和野猪接触的猪群、私人屠宰场和泔水喂养的猪场。

从饲喂泔水猪中收集到的组织具有较高的样本价值，例如猪只养殖过程中被喂食处理过的垃圾，包括肉类。喂肉和感染动物的其他产品是已知的造成ASF和CSF传播的风险因素。在美国，登记在案的饲喂泔水的猪场要定期进行检查并由各州和联邦动物卫生局进行检测。在这些检查中，病猪或死猪应由VS现场操作人员或州立动物取样卫生官员进行ASF和CSF检测（至少全血、扁桃体、扁桃体刮样、脾脏和淋巴结）。如果发现阳性，那些未登记的饲喂泔水的猪场也要进行检测。这些来自饲喂泔水的样品应通过FADI流程发送到FADDL进行检测。

上述场点还可能包含高风险的猪群。生病、垂死或死亡的动物应由VS现场操作人员或国家动物卫生官员进行现场采样；收集的样品包括全血和扁桃体刮片（如果活着），脾脏、扁桃体和淋巴结。这些样品应送到ASF和CSF认可的国家动物卫生实验室网络实验室进行检测。

已知或疑似野猪接触的猪群可以作为野猪传播疫病的前哨。因此，如果已知或疑似野猪接触的猪群出现发病或者死亡的，至少要采集全血、脾脏、扁桃体、扁桃体刮样以及淋巴结样本。这些样品应通过FADI流程发送到FADDL进行检测。

佛罗里达州、得克萨斯州和波多黎各的猪群被疫病传入的风险更高，因为这些州靠近目前有CSF流行的地区（加勒比和中美洲）。这些动物可能会以很小规模的方式饲养，如临时饲养的猪或通过非法船只偷渡到达的人或动物。对于波多黎各，在接到非法船只着落通知后28天的第四次访问中，非法船只登陆3千米以内的猪场应进行常规CSF监测。应对活体动物进行血清样本采集、对死亡动物进行扁桃体样本采集。所有样本都应寄到FADDL进行检测。

除了针对ASF和CSF的抽样建议外，应向高危动物所有者提供联系方式和教育材料，强调出现任何疫病暴发应及时报告给检查人员以进行快速跟进。

选择标准。以下临床体征应作为对病猪采样的指南：发烧；增加脉搏和呼吸频率；嗜睡/精神萎靡；厌食症；卧式；呕吐；腹泻；眼药水；流产；通常表现出皮肤发红的白猪；协调；未确诊的中枢神经系统病例（特别是先天性震颤和非化脓性脑炎）。

4.野猪监测。野猪的主动监测仅限于持续检测血清样本中的CSF，以排除可能发生的暴露。所有样品均应提交给FADDL用于检测。

九、样品数量

表2按来源列出了初始的年度建议样本数。样本数量基于CSF监测系统中当前的样本收集数量，并基于来自VDL的反馈进行修改。请注意，对来VDL提交的病猪，应对其组织样品同时进行ASF和CSF的检测。

表2 按来源列出的建议样本数