血清S100B蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病中的应用

黄小玲 林跃清 周冰新 沈斐敏

福建医科大学附属漳州市医院新生儿科，福建漳州 363000

新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）属于新生儿常见疾病之一，其主要病因为各种因素引起的围生期缺氧窒息，使新生儿脑部缺氧、脑部血流量减少，导致胎儿或新生儿不同程度的脑损伤[1-3]。该病的病死率和致残率都比较高[4]，严重者可能出现生长发育落后、智能低下、情感障碍、行为异常甚至癫痫、脑瘫等后遗症[5-6]，近年来关注的重点在于HIE患儿早期脑损伤程度的判断及预后的评估，以利于及早进行临床干预，降低伤残率，减少后遗症的发生。目前HIE的诊断及轻重程度的判断主要是根据病史、临床表现和影像学表现，如头颅CT或磁共振成像（MRI），临床表现易受主观因素的影响，头颅CT 及MRI 虽然存在客观性，但不宜早期床边检查监测，且对HIE 早期预测的灵敏度也有局限性[7]，不利于及时判断病情及动态监测病情的变化；治疗方面，主要是药物的支持、对症处理，严重者采用亚低温、干细胞等治疗改善HIE的预后[8-9]，但由于病情严重程度的判断没有生化指标，临床上常常不能及时有效地对患儿进行个体化评估，因此个体化治疗很难进行[10]，直接影响治疗效果和预后，故临床上需要一个客观、早期的指标来反映HIE的病情及预后。有研究报道，血清S100B蛋白浓度的升高与脑损伤程度及预后紧密相关[11]。本研究分析血清S100B蛋白浓度在不同程度HIE患儿中的差异及临床意义，为HIE的早期诊断、早期干预提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1～12月我院新生儿科收治的150例HIE患儿作为试验组，根据出生时评分、生后意识障碍、肌张力异常、原始反射异常、颅内压升高情况、脑干症状等临床表现及出生72 h后头颅CT或MRI结果将其分为重度HIE组（40例），中度HIE组（50例），轻度HIE组（60例）、选取同期正常健康足月新生儿60例作为对照组，均无缺氧窒息、出血、感染、遗传代谢及神经系统疾病等病史，其母孕期健康分娩过程无异常。对照组中，男28例，女32例；胎龄（38.4±0.7）周；体重（3254±347）g。轻度HIE组中，男33例，女27例；胎龄（38.5±0.9）周；体重（3240±383）g。中度HIE组中，男27例，女23例；胎龄（38.4±0.8）周；体重（3205±398）g。重度HIE组中，男21例，女19例；胎龄（38.5±0.6）周；体重（3226±402）g。各组的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。所有患儿家属均对本研究知情且签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①所有患儿均符合邵肖梅主编的第5版《实用新生儿学》对新生儿HIE的诊断标准[12]；②患儿均于出生后24 h 内入住我科。

排除标准：①患先天性代谢性者；②先天畸形者；③神经系统发育异常者；④感染性疾病者；⑤产伤所致的颅内出血者；⑥不能坚持随访12个月者。

1.3 观察指标及检测方法

试验组患儿于出生后第1、3、7天采股静脉血2 ml，标本用离心机离心（3000 r/min，15 min），保留血清500 μl 于-80℃低温冰箱中保存待测S100B蛋白。标本溶血者除外。标本采集期间均无感染、低蛋白血症。重症高胆红素血症等合并症、对照组足月新生儿于出生后第1天采股静脉血2 ml，离心、低温处理同试验组、仪器使用Multiskom Ascent型号酶标仪，B600D型高速离心机，37℃恒温孵育箱（芬兰雷博公司）、S100B蛋白采用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（Adlitteram Diagnostic Laboratories，Inc.，美国）检测。

1.4 随访

所有HIE患儿采用电子信息联系及定期门诊复诊等方法完成随访，1～2个月随访1次，随访12个月。随访内容主要包括听力筛查、视力筛查及智能测试，智能测试根据Gesell 发育量表的评估结果，将发育商（DQ）<85分者分为有后遗症组，DQ≥85分者分为无后遗症组。

1.5 统计学方法

采用SPSS 18.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，符合正态分布的采用独立样本t 检验或单因素方差分析，非正态分布资料采用Mann-Whitney U 检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较

三组HIE患儿出生后第3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于出生后第1天，差异有统计学意义（P<0.05）。三组HIE患儿出生后第1天的血清S100B蛋白浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。重度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于中度HIE组和轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；中度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

表1 各组出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

表1 各组出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

与本组出生后第1天比较，aP<0.05；与对照组同期比较，bP<0.05；与轻度HIE组同期比较，cP<0.05；与中度HIE组同期比较，dP<0.05；“-”表示无数据

组别例数 出生后第1天 出生后第3 天 出生后第7天对照组轻度HIE组中度HIE组重度HIE组60 60 50 40 4.61±1.68 9.08±3.02b 14.35±5.53bc 21.02±5.32bcd--6.34±2.69a 9.16±2.81ac 14.07±3.36acd 4.61±1.47a 6.75±2.02ac 9.15±1.71acd

2.2 有、无后遗症组患儿出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较

随访12个月后的HIE患儿中，有41例患儿出现后遗症，其中脑瘫6例，癫痫5例，听力障碍、视力障碍、智力低下、生长发育落后（DQ<85分）30例。有后遗症组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于无后遗症组，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。

表2 有、无后遗症组患儿出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

表2 有、无后遗症组患儿出生后不同时间血清S100B蛋白浓度的比较（ng/ml，±s）

组别例数 出生后第1天 出生后第3 天 出生后第7天有后遗症组无后遗症组t值P值41 109 19.37±5.43 10.71±3.94 10.65<0.01 12.27±3.18 7.15±2.76 9.63<0.01 7.87±1.91 5.13±0.83 12.06<0.01

3 讨论

新生儿HIE 可导致患儿智力发育迟缓、生长发育落后等后遗症，影响患儿的生活质量，目前临床上缺乏敏感的实验室指标，对于病情严重程度的评估也缺乏必要的客观性指标[13-14]。相关研究显示，血液中存在着某些生物标志物与HIE的发生发展密切相关，可以用来早期预测HIE的发生、早期判断脑损伤的轻重[15]，其中报道较多的是S100B蛋白。

S100B蛋白广泛存在于哺乳动物的中枢神经系统，属于钙离子结合蛋白，亦被认为是钙传感器蛋白，多通过与钙结合发挥其生理作用，可100%溶解于中性饱和硫酸铵，是神经系统的特异性蛋白之一，主要分布于中枢神经系统的神经胶质细胞，周围神经系统的雪旺氏细胞中亦多见。S100B蛋白产生后作用于神经元及其生长环境、在人体脑组织内S100B蛋白主要由脑内的神经胶质细胞产生，与人体各组织相比，其在脑组织的浓度最高，S100B蛋白的排泄主要通过肾脏，临床上主要考虑脑脊液标本留取对患儿损伤大，且HIE患儿往往尿较少，不易留取尿液标本，故血液标本最常用、通常健康者血清S100B蛋白浓度很低，当脑损伤发生时，脑脊液中S100B蛋白的浓度升高，脑损伤同时可破坏血脑屏障，使其通透性增加，S100B蛋白从脑脊液进入血液[16]，从而导致血液中S100B蛋白浓度升高，因此，在神经系统损伤早期、影像学未出现异常且临床上尚未出现相应症状体征时，可以通过检测血液中的S100B蛋白浓度来预测，并且可作为判断脑损伤程度的指标。本研究结果显示，三组HIE患儿出生后第1天的血清S100B蛋白浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），提示S100B蛋白参与了HIE 脑损伤过程。本研究结果还显示，三组HIE患儿出生后第3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于出生后第1天，差异有统计学意义（P<0.05）；重度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于中度HIE组和轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；中度HIE组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于轻度HIE组，差异有统计学意义（P<0.05）；有后遗症组患儿出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白浓度均高于无后遗症组，差异有统计学意义（P<0.01），与吴松笛等[17]的大鼠缺血再灌注实验结果相一致，提示S100B蛋白参与了HIE的发病过程，且在早期浓度已明显升高，其用于早期诊断HIE及早期评估预后的敏感性强，HIE 病情较轻者或者病情渐恢复则其浓度下降，原因是S100B蛋白的半衰期短，若血清中S100B蛋白持续升高或下降后再升高，则应注意可能是在原本脑损伤的基础上又发生其他脑损伤。

综上所述，通过本研究对HIE患儿血清S100B蛋白浓度的早期检测及动态观察，血清中S100B蛋白浓度与HIE患儿脑损伤程度的轻重及HIE 预后的评估有较高的临床实用价值，值得临床推广和应用。