刘艳梅
本文首先分析了我国种子产业发展中面对的主要问题,阐述了种子管理中分子检测技术的实际运用意义,研究了种子管理中分子检测技术的应用策略,以期能够对种子管理中分子检测技术的实际应用起到一定借鉴意义。
一、我国种子产业发展中面对的主要问题分析
首先,种子品种多且较为杂乱。当前市面上允许进行实际推广的品种多达上万种。选育品种的过程中,常常采用自交系的方式,导致不同品种之间遗传基础相对较为狭窄,具有比较严重的同质化倾向问题。另外,品种的命名也较为混乱,常常存在同一个品种使用不同的名字以及同一名字品种却不相同的情况。比如,某一年中,北京农科院针对1227株品种不同的玉米加以分析后看到,审定公告名称和新品种保护公告名称不相同,然而是相同玉米品种的多达141个;其次,企业信誉度相对较差。当前国内持证种子企业多达千余家,但70%左右企业的注册资本在500万元以下,不具有研发能力的占据95%之多,前十名种子企业在市场占据的份额仅为10%左右。一些企业诚信意识相对较弱,为了使企业能够获取更多经济收益,采用套牌经营的方式对品种进行授权,或是运用没有审定的品种进行冒充;最后,监督管理方式相对落后。针对品种真实性实施检测以及种子转基因成分的监督管理等,需要将分子检测技术作为基础,当前种子检测体系相应的检测条件与能力无法使监督管理的有效开展得到满足,应在人员配置、设备、技术等层面创建全新的体系。
二、种子管理中分子检测技术的实际运用意义
关于种子的管理,利用分子检测技术对其加以检测具有多方面作用。首先,检测品种区试以及新品种保护过程中,针对待检测品种和已知品种做出比较,看其是否存在特异性;其次,在种子市场监督管理检测过程中发挥重要作用。对待检测品种纯度、名称加以检测,检测其真实性;再次,在品种转基因成分检测中发挥作用,对品种可否包含转基因成分加以检测;最后,针对于种子携带病害的情况加以检测。
三、种子管理中分子检测技术的应用策略
1、品种特异性检测
在这几个特点中,特异性是实质审查工作开展中的重要内容。国际植物新品种保护联盟针对DUS测试中分子标记的实际运用,结合植物品种的不同应用如下几种不同的方案:第一,运用和传统性状存在密切关联的分子标记实施具体测试;第二,结合传统性状之间最细微的不同针对标记性状的阈值实施校验;第三,运用分子标记测试的方式;第四,将表型鉴定和分子标记测试两种方式互为融合对标准品种加以确立,之后针对进行测试的品种和标准品种之间相互比较。
近些年来,国内在品种区试和品种保护特异性检测方面采用分子检测的方式进行了积极探索。当前运用的是国际植物新品种保护联盟给出的方案,把参试品种、申请保护的品种与目前已知全部品种的DNA数据库做出对比,从中选取出和申请品种较为接近的已知品种,之后实施两两对照检测。这种方案通常采用的技术路线如下:首先,选取并确立符合某种农作物品种真实性检测数量相对固定的引物。其次,创建相关技术检测平台,包含确立合适的DNA提取方式、电泳分析系统以及最终结果判断标准等众多方面;最后,针对已知品种,建立相应的DNA数据库。
2、品种真实性检测
关于品种真实性的检测,指的是比较分析送检样品和标准样品。运用一套数量相对固定的引物,若是可以判断品种不具有真实性,便可以结束检测过程;若是无法判断品种的真实性,便需要运用引物继续进行检测,直至可以找出其中的差异并给出最终判断。针对品种真实性的检测,其和品种特异性检测技术路线大体相同,存在的不同在于和已知品种DNA数据库实施对照。相比较来讲,品种真实性检测的技術方案更加简便,最终得出的结论却更加准确。
3、品种纯度检测
基因型和分子标记之间存在着对应的关系,通过这种关系的运用能够对检测品种和其它品种进行区分。关于品种纯度SSR分子检测,其基本思路如下:首先,结合已经创建的品种DNA数据库相关信息,选取合适的引物实施初始阶段的检测,对导致纯度问题的原因加以分析;其次,针对符合该种样品纯度检测的引物组合加以确立,通常情况下是2-3对;最后,全面考量所选取引物针对每一株检测结果的影响,同时对品种纯度加以判断。
4、转基因成分检测
种子转基因成分的实际检测中,核酸检测是其中一个比较典型的方法。该种检测方式根据特异性由低至高的顺序,具体分成筛选,基因特异性,创建特异性以及品系特异性检测。其检测目标是转化受体基因组和外源插入载体二者的连接区域序列。具体种子转基因成分的检测路线如下:第一,整理并针对一种农作物的转化事件加以分析;第二,根据转化事件的基本分子特点,选取并确立合适的标记基因或是通用元件,同时对于样品采用筛选检测的方式;第三,关于筛选检测的结果,若是呈现阳性,利用创建特异性和基因特异性等方式对其所包含的转基因成分加以确立。
综上,最近几年,国内种业获取了一定发展,然而依然存在一些不足之处,套牌侵权、未审先批等情况时有发生,品种不真实的问题比较显著,严重扰乱了种子市场,给种业的良好发展造成了一定影响。而分子检测技术可以使这一问题得到解决,在技术上保障了种子管理工作的有效开展。因此,大力研发与运用种子分子检测新型技术是种业今后必然的发展趋势。
(作者单位:029400内蒙古自治区兴安盟科尔沁右翼中旗种子管理站)