环维黄杨星D对大鼠长期肝毒性试验研究

戴平 黄凤香 韦汉燕 廖迎

摘要：目的：研究环维黄杨星D长期给药对雌性大鼠产生急性毒性的情况。方法：将SD雌性大鼠随机分为四组，分别为空白组、低剂量组（2mg/kg）、中剂量组（6mg/kg）和高剂量组（12mg/kg）连续灌胃3 个月，三个月后处死雌鼠标本收集，检测血清AST，ALT，MDA的活性，并且观察雌鼠肝脏的变化。结果：高剂量组（12mg/kg）血清谷草转氨酶（196.29±24.16），谷丙转氨酶（167.54±40.23）显著高于空白组（P*<0.05），且肝脏表面有一定程度变性坏死。结论：大剂量环维黄杨星D（12mg/kg）灌胃可导致SD大鼠出现显著的肝毒性。

关键词：环维黄杨星;SD大鼠;肝毒性

[Abstract]Objective：to study hepatotoxicity of cyclovirobuxine D which has been given to the female rats for a long time.Methods：female rats are divided into4groups，control group，the low dosage group，middle dosage group，high dosage group of cyclovirobuxine D.Female rats are given with cyclovirobuxine D for3months.All rats were sacrificed at the3month and samples were collected.Serum ALT，AST，MDA level were determined and observe livers pathology changes.Results：serum AST（196.29±24.16）and ALT（67.54±40.23）in dose group are higher significantly than those in control groups.Besides，the livers in dose group（12mg/kg）are thanatosis in a certain.Conclusion：dose group（12mg/kg）given cyclovirobuxine D for a long time appears hepatotoxicity significantly.

[Keywords]cyclovirobuxine D;SD rats;hepatotoxicity

环维黄杨星D系小叶黄杨木黄杨宁中提取的生物碱加辅料制成的中药片剂的有效成分，为黄杨科植物中的小叶黄杨及其同属植物中提取的有效单体成份，临床上主要用于治疗心血管疾病，是我国首创的治疗心脑血管的新藥。本文通过连续三个月给药，观察不同剂量的环维黄杨星D对雌性大鼠肝脏的影响情况。

1材料

黄杨宁片，每片含环维黄杨星D1mg，由山西同达药业有限公司提供。

SD大鼠，体重120～150g，雌鼠，采自桂林医学院SPF级实验动物室。

谷草转氨酶（ALT）（批号：C010-2）、谷丙转氨酶（AST）（批号：C009-2）、丙二醛（MDA）（批号：A003-1）生化试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

2方法

黄杨宁片实验前研磨至粉状，用双蒸水配成所需浓度，加入适量冰醋酸助溶，用碳酸氢钠调节PH至中性。大鼠适应性喂养一周随机分为四组，每组8 只。分别为空白对照组（给予同体积蒸馏水）、低剂量组（2mg/kg/d）、中剂量组（6mg/kg/d）和高剂量组（12mg/kg/d）。各组采用灌胃给药，灌胃体积6ml/kg，每天给药1 次，每周根据体重变化调整给药剂量。连续给药3个月，于第三个月末次给药24小时后眼眶取血，脱椎处死，检测血清生化指标，并取肝脏进行病理观察。

2.1  一般检查

每天观察并记录动物的一般活动及精神状态;每隔2 天称量1 次体重以及摄食量，观察体重与摄食量的动态变化。

2.2  血液生化检测

大鼠眼眶取血，离心3500rpm离心10min，取上清液，用酶标仪检测血清谷草转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）的活性及丙二醛（MDA）的含量。

2.3  病理学观察

取大鼠肝脏，肉眼观察肝表面病变情况。

2.4  统计学处理

计量资料以X±S n=8表示，采用SPSS1.6统计软件处理，各组间比较用t检验，多组间比较用方差分析。

3     结果

3.1  对大鼠体重的影响

动物一般体征：大鼠灌胃2 周后，高剂量组体重出现增长缓慢的现象，而其他组大鼠体重正常增长。在给药3 个月后高剂量组总体出现反应迟钝、精神不振、呼吸急促、体重增长缓慢的现象，其中有4 只大鼠在给药一个月后出现大便稀溏的现象，并有2 只大鼠在给药2 个月后死亡。各组摄食量均在正常范围内，与高剂量给药组相比具有统计学差异，P<0.05，反应灵活，精神状况良好。见表1。

3.2  对大鼠血液生化指标的影响

环维黄杨星D连续给药三个月，高剂量组血清AST、ALT显著高于其他组（P<0.05），见表2。

3.3  肝表面现象

各组环维黄杨星D连续给药三个月的大鼠肝脏变化对比明显。空白对照组肝脏表面光滑，边缘整齐，低剂量和中剂量给药组无明显变化。而高剂量给药组肝脏表面较其他组有明显肝脏表面粗糙，表面可见白色不规则形状，边缘不规则，肝细胞大片状坏死，炎细胞浸润，有少量纤维组织增生。

4讨论

本实验初步研究结果发现高剂量环维黄杨星D的实验大鼠血清生化指标ALT，AST，MDA与对照组和低剂量组比较有显著升高，肝脏表面现象观察结果显示，一定剂量的环维黄杨星D连续灌胃给药可致肝脏损伤。

参考文献：

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[基金]广西壮族自治区高等学校科学研究项目（自然科学类），项目编号：KY2015LX278