不同饵料对轮虫繁殖速率的影响

吕军 丁茂昌

[摘 要] 在同等生物量下，蛋白核小球藻培养的褶皱臂尾轮虫最先抱卵，平均带卵量最高，轮虫增长量也最多，其次是单体角毛藻、多体角毛藻。试验前后小球藻密度减少1/2，单体角毛藻密度几乎不变，多体角毛藻密度略有增长，说明小球藻培养轮虫效果最理想，其次是单体角毛藻、群体角毛藻。

[关键词] 轮虫;小球藻;角毛藻;繁殖速率

[中图分类号] S963 [文献标识码] B [文章编号] 1674-7909（2020）26-103-3

轮虫（Rotifera）是轮形动物门的一群小型多细胞动物，一般体长0.1～0.5 mm，最长不超过1.0 mm，轮虫生活时纤毛带和纤毛环上的纤毛不断协调旋转摆动，似转动着的轮子，故名为轮虫[1]。轮虫对水质的适应性较强，广泛分布于江河湖海、沟渠塘堰等各类水体中[2]。轮虫因营养价值高、繁殖速率快、几乎能被所有鱼类的幼体吞食而成为大多数经济水生动物幼体的优质饵料。山东省日照市水产研究所开展的试验表明，利用混合植物（藻类）、混合动物、动植物混合、卤虫幼体和轮虫5种饵料饲养对虾幼体时，轮虫饲养效果最佳[3]。

从20世纪二三十年代开始，日本等国就开始进行轮虫工厂化培养技术研究，近年来该技术日趋成熟，轮虫产量逐渐提高，室内水泥池培养密度在1 000个/mL以上。我国从20世纪50年代开始引进日本工厂化轮虫培养技术，但由于其投资大、费用高，在我国广泛推广尚存在困难。20世纪80年代，李永函等利用水体沉积物中轮虫休眠卵，采取人工措施促其萌發，繁衍成种群，为淡水鱼苗培养开辟了一个新的饵料途径[4]。但轮虫培养的高峰期持续较短，产量较低，而且饵料停留在池中发生什么藻就用什么藻、发生多少就喂多少的杂藻培养状态，轮虫培养数量随意性较大、质量不可控。同时，何种藻类能使轮虫数量与质量都保持在一个较高的水平，不得而知。为了寻找轮虫最适饵料，更好地服务于公司生态苗的培养，笔者就地取材，选用小球藻、单体角毛藻、群体角毛藻3种个体差异明显的藻类作为轮虫培养饵料，为公司生态苗轮虫专池培养提供理论参考。

1 试验材料

1.1 试验地点和轮虫来源

2019年5月，在河南省固始县海昌虾苗标粗场开展轮虫培育试验。褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis），由海南海昌对虾繁育有限公司提供的褶皱臂尾轮虫冬卵孵化所得。

1.2 饵料藻类

蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidesa）、单体角毛藻、群体角毛藻，均由海昌虾苗场提供。

1.3 主要器材

显微镜（奥林巴斯CX21），实验室pH计（PHS-25型），实验室用盐度计，48 μm生物网、25 μm生物网、铁架台、碱性滴定管、血球计数板、10 mL移液管、120 mL溶氧瓶和青霉素瓶等。

2 试验条件与方法

2.1 轮虫冬卵孵化

取一勺轮虫冬卵放入盐度24‰的海水中，充分搅匀后置于室温孵化72 h。

2.2 饵料藻类采样

将采样所需器皿经碘液消毒后进行采样，具体操作见表1。

2.3 饵料藻类密度调配与理性指标测定

运用显微镜目微尺量出饵料藻类长度，根据生物量近似相等，兼顾盐度、pH值相近的原则，计算出试验用饵料藻类密度，参照所采饵料藻类密度，稀释或浓缩饵料藻类，用血球计数法[5]测定饵料藻类试验密度，并测定基本理性指标，包括pH值、盐度、DO值（见表2）。

2.4 移取藻液与添加轮虫

取15个青霉素瓶，用移液管移取5 mL藻液至瓶中，之后在显微镜下挑选5个无明显差异的轮虫，用细口吸管移入相应青霉素瓶中，并做好标记（见表3），每种饵料藻液做5个平行组。

2.5 结果观察与数据记录

每间隔24 h取一个平行组用鲁氏试液固定，在显微镜下计数轮虫数量、最大带卵量和平均带卵量，试验结束后测定最后一个平行组中各饵料藻类密度。

3 结果与分析

3.1 轮虫增长量

试验48 h时各组轮虫量均未见增长，72 h时小球藻组轮虫量开始急剧增长，直至96 h时轮虫已经从试验开始时的5个增加至26个;单体角毛藻组在72 h时轮虫量开始有所增长，至96 h时轮虫量已有10个，增长速率明显低于小球藻组;而群体角毛藻组在整个试验区间轮虫量未见增长（见图1）。

3.2 轮虫带卵情况

3.2.1 最大带卵量。比较试验区间各饵料藻类中轮虫的带卵情况，可发现试验开始后48 h内各饵料藻类组轮虫均未抱卵，48 h时镜检发现小球藻组和单体角毛藻组轮虫开始抱卵，且小球藻组轮虫抱卵量明显高于单体角毛藻组;而群体角毛藻组72 h时轮虫才开始抱卵，抱卵时间晚于小球藻组和单体角毛藻组，而且整个试验区间其最大带卵量仅为1个，明显低于其他两组（见图2）。

3.2.2 平均带卵量。对比整个试验区间，可发现小球藻组轮虫的平均带卵量明显高于其他两组，其平均带卵量最高时达到平均一个轮虫带2个卵，最低时平均一个轮虫带0.47个卵，而其他两组整个试验区间平均一个轮虫带卵量均小于0.47（见图3）。

3.3 藻密度对比

观察试验前后饵料藻类密度变化情况可发现，小球藻组试验后藻密度为170万个/mL，仅为试验前藻密度的1/3;单体角毛藻密度试验后为150万个/mL，与试验前实验密度154万个/mL差异不大;群体角毛藻试验前密度58万个/mL，试验后密度71万个/mL，密度略有上涨（见表4）。

4 讨论

试验结果表明，小球藻组轮虫增长量明显高于单体角毛藻组和群体角毛藻组，同时小球藻组轮虫带卵情况也明显优于其他两组，并且对比试验前后饵料藻类密度发现，仅有小球藻密度急剧减少，说明在这3种饵料中轮虫最喜食小球藻。同时，由于单体角毛藻组轮虫数量有所增长，而群体角毛藻轮虫量几乎无变化，可得出小球藻是轮虫培养最理想的饵料，其次是单体角毛藻、群体角毛藻，与Caric等的浮游植物的单体培养物是褶皱臂尾轮虫最适饵料[6]这一研究结果基本吻合。分析其原因，笔者认为主要是在于以下4个方面。

一是营养价值高。小球藻细胞含有丰富的蛋白质（约占为细胞干质量的50%）[1]，蛋白质中含有的8种必需氨基酸可达23.35%，接近优质鱼粉、啤酒酵母，高于绝大多数植物性蛋白，是优良的单细胞蛋白源[7]。此外，小球藻碳水化合物含量为5.7%～38.0%，一般不少于20.0%[8]。同时，小球藻细胞中脂类含量4.5%～86.0%，不饱和脂肪酸含量明显高于许多植物[9]，且含有二十二碳六烯酸（DHA）。

二是适口性好。轮虫一般体长0.1～0.5 mm，最大不超过1.0 mm，滤食最适直径10 μm左右[1]。本试验中所用小球藻直径经测量为2.86 μm，符合轮虫最适滤食范围，适口性较好。而单体角毛藻细胞直径虽为4.60 μm，但其含角毛直径15～30 μm不等，明显超过轮虫最适滤食范围，适口性不好。单体角毛藻组轮虫量仍有所增加，笔者推测是由于单体角毛藻在分裂时部分角毛脱落或未长出而被轮虫滤食，而群体角毛藻组个别轮虫带卵则是轮虫滤食脱落单体角毛藻的缘故。

三是可获得性大。轮虫一般在水層中分布比较均匀[3]，活动比较缓慢，运动速度小于0.02 cm/s。而小球藻无鞭毛，不会运动，水中均匀分布[10]，因而小球藻相对于其他同等大小的鞭毛藻类更易被轮虫滤食。

四是水质环境改良。小球藻叶绿素含量4%～6%，是自然界中叶绿素含量最高的植物，高于已商业化的脱水紫苜蒿叶绿素含量（0.2%）[11]。小球藻能通过光合作用提取细菌分解有机物产生的CO2，释放部分O2，有利于细菌对有机物的进一步分解，有改良水环境的作用[12]。同时，在大型水体中，小球藻能通同颤藻属、席藻属、栅藻属等藻类以某些菌类在自然水体组成生物薄膜，可以吸附水体中有机物并可以直接利用有机物作为碳源和氮源，分解一部分有机物[13]。

参考文献

[1]赵文.水生生物学[M].北京：中国农业出版社，2005.

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[3]李永函，李劲秋.饵料浮游生物的土池培养与增值7日通[M].北京：中国农业出版，2004.

[4]李永函.养鱼池轮虫休眠卵分布和萌发的研究[J].水生生物学报，1985（1）：20-30.

[5]赵文.水产饵料生物学[M].北京：中国农业出版社，2004.

[6]Cari M，Sanko-Njire J，Skaramuca B. Dietary effects of different feeds on the biochemical composition of the rotifer（Brachionus plicatilis Muller）[J].Aquaculture，1993（2）：141-150.

[7]Kraloveea J A，Meterea K I，Kumara J R，et al. Immunostimulatory principles from Chlorella pyrenoidosa--part 1：isolation and biological assessment in vitro [J].Phytomedicine，2007（1）：57-64.

[8]陈晓清，苏育才.小球藻的应用研究进展[J].生物学教学，2012（1）：8-9.

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[10]韩茂森，束蕴芳.中国淡水生物图谱[M].北京：海洋出版社，1992.

[11]陈锋，姜悦.微藻生物技术[M].北京：中国轻工业出版社，1999.

[12]Aslan S，Kapdan I K. Batch kinetics of nitrogen and phosphorus removal from aynthetic wastewarter byalgae[J].Ecological Engineering，2006（1）：64-70.

[13]美国能源部生物质项目署.藻类生物能源：基本原理、关键技术与发展路线图[M].胡洪营，李鑫，于茵，等译.北京：科学出版社，2011.