枳饮对酒精性肝损伤保护作用的实验研究

莫桂芸 吴 英 马端鑫 叶 勇*

（云南中医学院第一附属医院，云南 昆明650000）

饮酒不当及饮酒过量均可导致全身多系统的损伤，尤其对消化道损伤、肝脏损伤更为显著。但在日常生活中，纠正酒精性所引起的肝脏损伤则是一个长期性、世界性的难题[1-2]。云南省名老中医赵淳教授、祁涛教授经多年临床经验总结，应用枳饮方取得很好的临床疗效。叶勇教授在两位教授的经验基础上，结合现代营养治疗学及现代中药、食品工艺技术调配而成枳饮颗粒，更方便的应用于临床。本文对枳饮对酒精性肝损伤保护作用进行实验研究。

1 实验材料

1.1 试剂及试药

乙醇：食品级

联苯双酯：武汉东康源科技有限公司生产。

氯化钠注射液：山东省齐都药业有限公司，生产批号：1D09090302。

1.2 实验仪器

台式低速自动平衡离心机；KHB 酶标仪ST-360

1.3 实验动物

小鼠120 只，雄，体重20+2g，由成都市达硕实验动物研究中心提供，质量合格证：SCXK（川）2008-24，检疫后备用，用SPF级饲养房饲养1 周后使用。

2 实验方法

实验分两部分同时进行，随机选取60 只大鼠，建立急性酒精肝损伤实验模型和慢性酒精性肝损伤实验模型。

2.1 急性酒精肝损伤实验模型

将动物随机分为6 组，设置每组10 只，分别为正常组、模型组，联苯双酯组（阳性组），枳饮高剂量组、中剂量组、低剂量组。灌胃给药，正常组和模型组予以氯化钠注射液，阳性组1.5mg/kg，枳饮高剂量是0.6mg/kg，中剂量组是0.3mg/kg，低剂量组是0.15mg/kg。连续给药15 天，在最后给药1 小时，除正常组外，其他各组灌胃浓度为50%乙醇12ml/kg，并且禁食16h，处死并采集实验鼠的肝组织及血液。

2.2 慢性酒精性肝损伤实验模型的建立

将动物随机分为6 组，设置每组10 只，分别为正常组、模型组以及联苯双酯组（阳性组），枳饮高、中、低剂量组。正常对照组予以氯化钠注射液，其他阳性组15mg/kg，枳饮高剂量0.42mg/kg，中剂量组0.21mg/kg，低剂量组0.11mg/kg，给药后每天上午定时对给药组予同等剂量50%乙醇6ml/kg，正常对照组同样的灌胃相同剂量组供试样品，连续给药8 周，在最后给药1小时后，将模型组大鼠处死，并取其血液以及其相应的肝组织[3-4]。

2.3 指标测量

2.3.1 血清的制备

将上述血液样品经低速自动平衡离心机离心后取血清，测定其ALT、AST、TG 含量。

2.3.2 肝脏组织学观察

将实验鼠处死后立即取其肝脏，泡入新鲜配制4℃的预冷标准10%标准福尔马林溶液中。对实验肝组织予以相应石蜡切片，并将其脱蜡至水，进行HE 染色，其中实验步骤包括分化、脱蜡、染色、脱水、促蓝、透明、侵水等实验相关过程，待染色处理完毕后，用高倍显微镜完成实验观察[3]。

3 实验结果

数据采取标准均数±标准差（x±s），分析采用spss13.0 统计软件进行相关分析。P<0.05 表示其实验结果有统计学差异，p<0.01 表示其实验结果有显著差异。两组间比较均采用t 检验；多组间用方差分析，多组间多两两进行比较，若方差齐采用LSD 检验；若方差不齐，采用Tamhane’s T2法。

3.1 急性酒精肝损伤结果分析（表1）

与模型组比较：*p<0.05, **p<0.01；与给药前自身比较：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

3.2 慢性酒精性肝损伤结果分析（表2）

与模型组比较：*p<0.05, **p<0.01; 与给药前自身比较：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

表1 枳 饮高、中、低剂量组中对急性肝损伤中ALT、AST、TG 的影响

表1 枳 饮高、中、低剂量组中对急性肝损伤中ALT、AST、TG 的影响

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表2 枳 饮高、中、低剂量组中对慢性肝损伤中ALT、AST、TG 的影响

表2 枳 饮高、中、低剂量组中对慢性肝损伤中ALT、AST、TG 的影响

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