张欣欣
(福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002)
绿茶是中国主要茶类之一,其茶汤较多的保存了鲜茶叶的绿色格调[1]。绿茶中的天然营养成份对防衰老、防癌、抗癌、杀菌、消炎等是其他茶类所不及的[2]。绿茶对辐射病、心脑血管病、癌症等有一定的药理功效[3]。
膳食纤维(DF)是指不易被消化酶消化,也不被小肠吸收,在大肠发酵的以多糖为主体的高分子物质的一种总称[4]。DF具有预防冠心病和高血压、清除重金属等功效[5]。DF能够提高SOD抗氧化酶的活力,从而增强机体的抗癌能力[6]。由IDF所制作而成的减肥药剂在欧美市场大受好评[7]。DF促进肠道内的有益菌群生长,增强免疫力,改善腹泻[8]。长期饮用添加DF的乳制品,可调节血脂、血糖,协助减肥,尤其适合中老年人、糖尿病人及肥胖者[9]。
DF的提取方法主要有热水提取法、化学提取法、发酵法、酶法等[10]。以化学法分离膳食纤维的制备成本较低,产率较高[11]。国内学者武阳[12]等利用红雪茶渣为提取原料,黄艳[13]、陈仕学[14]等主要以南方绿茶渣为原料,采用碱解提取法制备DF。但利用北方绿茶渣为原料提取IDF的工艺研究报道较少。
本文以青岛的崂山绿茶渣为原料,采用酸碱法提取IDF。选择pH、温度、时间三个因素,通过正交表L9(33)设计,优化提取IDF的工艺。旨在探究北方绿茶渣IDF的最佳提取工艺及其性能,充分挖掘绿茶渣的利用价值,使其变废为宝,为绿茶渣IDF的深入开发、应用研究提供实验依据,为进一步开发绿茶的研究提供参考资料。
绿茶(胶州康乐购超市采购)。
1.2.1 提取流程
取绿茶渣样品→加入H2SO4溶液→水解→抽滤、取滤渣→洗涤→加NaOH溶液→水解→抽滤、取滤渣→滤渣干燥,称重。
原料预处理:按工业化提取茶叶水不溶性固形物的方法,浸泡离心分离后,以60℃干燥至恒重,加入石油醚浸泡脱脂、粉碎,过40目筛得茶渣备用。
1.2.2 酸解单因素试验设计
分别以酸解 pH(1、2、3、4、5)、温度(50、60、70、80、90℃)和时间(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5h)进行单实验因素研究酸解因素对绿茶渣IDF提取率的影响。
1.2.3 酸解正交试验设计
在以上单因素试验的基础上,选择酸解pH、温度和时间三个因素,采用正交表L9(33)设计,以IDF提取率为目的指标,优化酸解制备IDF的提取工艺。
1.2.4 碱解单因素试验设计
在最佳酸解条件下以碱解pH(10、11、12、13、14)、温度(75、80、85、90、95℃)和时间(1.5、2.0、2.5、3.0、3.5h)进行单实验因素研究碱解因素对绿茶渣IDF提取率的影响。
1.2.5 碱解正交试验设计
在以上单因素试验的基础上,选择碱解pH、温度和时间三个因素,采用正交表L9(33)设计,以IDF提取率为目的指标,优化碱解制备IDF的提取工艺。
图1
酸解实验结果表明,当酸解pH为2时,绿茶渣IDF提取率达到最大。此后酸解pH继续增加,提取率降低。因此酸解pH以2为宜;酸解温度在80℃时达到最大。因此,确定酸解温度80℃为最佳温度;当酸解时间达到2.0h时,IDF提取率最高。故,确定最佳酸解时间为2.0h。
实验结里表明,三个因素对绿茶渣IDF提取率影响的主次顺序,依次为C>A>B,对应影响绿茶渣酸解过程IDF提取效果因素的顺序,为酸解时间>酸解pH>酸解温度,且最佳提取工艺为A2B1C3,即:酸解pH2,酸解温度70℃,酸解时间2.5h。见表2-1。
表2-1 酸解过程正交试验结果
图2
实验结果表明,当pH为13时,绿茶渣中IDF提取率达到最高;pH大于13时,绿茶渣中提取的IDF含量降低明显;在碱解温度达到85℃时,IDF提取率最高,故,选择85℃为最佳碱解温度;碱解时间为3.0h时,提取率达到最大值。当碱解时间为3.0h~3.5h时,IDF提取率随碱解时间的增加而减少,因此,确定最佳碱解时间为3.0h。
试验中的三个因素对绿茶渣IDF提取率影响的主次顺序依次为A>C>B,对应影响绿茶渣碱解过程IDF提取效果因素的顺序为碱解pH>碱解时间>碱解温度时间,且最佳提取工艺为A2B2C3,即:碱解pH13,碱解温度85℃,碱解时间3.5h。在此条件下,绿茶渣IDF的提取率为83.09%。见表2-2。
表2-2 碱解过程正交试验结果
2 3 4 5 6 7 8 9 k1k2k3R 1 1 2 22333 2 3 1 2 3 1 2 3 232 3 1 3 1 1 79.11 76.72 79.49 81.78 83.09 80.53 73.72 71.51 74.82 81.45 75.25 6.63 76.22 78.20 77.11 1.99 75.15 76.70 79.68 4.53
结果实验表明,酸解过程最佳提取工艺为:酸解pH 2,酸解温度70℃,酸解时间2.5h,绿茶渣IDF提取率为79.52%。酸性较强时,导致IDF中的纤维素或半纤维素等发生水解,形成水溶性的低分子聚合物或葡萄糖,致使IDF的提取率降低。温度适度升高可提高IDF的提取率,当酸解温度超过80℃,导致部分纤维素和半纤维素及其次级产物进一步酸解,同时果胶、淀粉溶解量也增多,造成提取率下降。酸解时间较短时,体系得不到充分反应,绿茶渣中的果胶、淀粉溶出量不足,造成IDF提取率较低。随着酸解时间的延长,IDF中的部分纤维素物质也溶解在酸液中,导致IDF软化,不仅造成提取率下降,而且使得绿茶渣IDF的品质下降。
碱解过程最佳提取工艺为:碱解pH13,碱解温度85℃,碱解时间3.5h,绿茶渣IDF提取率为83.09%。碱液浓度过高时,导致IDF部分水解。温度升高有利于纤维素与半纤维素之间氢键的破坏,可使提取率升高。碱解时间超过3.0h,由于碱解时间过长,导致部分IDF水解,从而导致提取率下降。利用酸碱提取方法提取绿茶中的IDF,可以充分的使绿茶渣中的糖类、蛋白质类物质分离出来,从而得到更加纯净的IDF。而且操作方法简单,且相对比酶解提取IDF成本低,适合大小规模绿茶中IDF的提取。
本文通过在酸碱法单因素试验的基础上,选择酸解或碱解的三单因素,采用正交表L9(33)设计。提出了酸解正交最佳提取工艺为:酸解pH2,酸解温度70℃,酸解时间2.5h;碱解正交最佳提取工艺为:碱解pH13,碱解温度85℃,碱解时间3.5h。这为绿茶渣变废为宝的开发利用研究,为降低提取IDF的成本,为绿茶的综合性深入研究提供了参考依据。