联合Y-STR家系分型及ITO分析法鉴定祖孙关系1例

陈润珍 张蓓蕾

关键词Y-STR ITO法 祖孙关系鉴定

日常亲权关系鉴定中，祖孙关系鉴定尤其是缺少生母（父）的祖孙关系鉴定较为复杂，这类鉴定可以通过检测性染色体STR基因座分型提供排除信息，并利用ITO法分别计算祖父-孩子、祖母-孩子之间的祖孙亲缘关系似然率（LR）来提供判定依据。参照规范，累积祖孙亲缘关系似然率（LRs）大于10000时可以认定两个体为祖孙关系或小于0.0001时可以排除两个体的祖孙关系，但由于ITO法计算时缺少一方的遗传信息。，累积祖孙亲缘关系似然率（LRs）往往数值较小而达不到认定标准。本文报道1例联合利用Y-STR分型与ITO法提供明确结论的祖孙关系鉴定。

一、案例资料

（一）简要案情

郑某（疑似祖父）与沈某（疑似祖母）为给父母双亡的小郑（孩子）上户口，委托本鉴定中心进行祖孙亲缘关系鉴定。采集郑某、沈某与小郑3人指尖末梢血各1份，留作鉴定之用。

（二）检验方法

1.DNA提取。将采集的3份血样用Chelex-100法分别提取DNA。

2.STR基因座分型检测。将提取的3份DNA用AGCUEX22、AGCU 21+1（无锡中德美联生物技术有限公司）对39个常染色体STR基因座和性别基因座Amelogenin进行复合PCR扩增，将提取的郑某与小郑的DNA用Microreader“24YDirect ID System（阅微基因技术有限公司）对24个Y-STR基因座进行复合PCR扩增，并对全部的扩增产物用3130xl遗传分析仪（美国AB公司）进行毛细管电泳，用GeneMapper ID-X进行基因型分析。

3.祖孙亲缘关系计算。利用ITO法分别计算郑某-小郑、沈某-小郑的祖孙亲缘关系似然率（LR）及其累积祖孙亲缘关系似然率（LRs）。

（三）检验结果

1.STR基因座分型检测结果。用AGCU EX22、AGCU21+1檢测得到的3人39个常染色体STR基因座和性别基因座Amelogenin分型结果见表1。由表1可知，小郑在FGA、D3S4529、D5S2500等3个基因座的等位基因从郑某与沈某中找不到来源。

用Microreader24Y Direct ID System检测得到的郑某与小郑Y-STR基因座分型结果见表2。由表2可知，小郑在DYS393，DYS570，DYS392、y GATA H4，DYS458、DYS635，DYS448、DYS533、DYS456、DYS389 I、DYS390、DYS389 II、DYS438、DYS576、DYS391、DYS439、DYS385ab、DYS643等19个基因座的等位基因从郑某中找不到来源。

2.祖孙亲缘关系计算结果。按文献的基因频率，采用ITO法分别计算郑某-小郑、沈某-小郑共39个常染色体STR基因座的LR及LRs值结果见表1。由表1可知，最终郑某.小郑的LRs值为0.0008，沈某-小郑的LRs值为20627.9411。

二、讨论

根据孟德尔遗传规律，孩子的等位基因分别来源于亲生父母双方，则孩子必然会有1个等位基因来源于其祖父母。观察郑某、沈某与小郑三人39个常染色体STR基因座的分型结果，发现小郑在3个基因座的等位基因从郑某与沈某中找不到来源，无法得出明确的结论。则按照双亲皆疑分别判定郑某-小郑、沈某-小郑之间的祖孙亲缘关系。

表1显示，在检测21个常染色体STR基因座分型后，沈某-小郑的LRs值为1576.7075，未达到判定标准。而增加检测至39个常染色体STR基因座分型后，沈某.小郑的LRs值为20627.9411，祖孙亲缘关系概率为0.99995152，达到判定标准，可以得出明确结论，支持沈某与小郑存在祖孙亲缘关系。

由于所有Y-STR基因座均连锁遗传，故Y-STR基因座分型可以提供排除信息。利用Y-STR基因座的这一特性，观察郑某与小郑的Y-STR基因座分型结果，发现小郑在19个基因座的等位基因从郑某中找不到来源，可以排除郑某与小郑的祖孙亲缘关系。同时，在增加检测至39个常染色体STR基因座分型后，郑某-小郑的LRs值由0.0512累积变为0.0008，也可以辅助验证Y-STR基因座的排除结论。

在本案例中，疑似祖母与孩子一方可以直接通过计算39个常染色体STR基因座的LRs值得到明确的支持结论，而疑似祖父与孩子这一方则需要通过增加检测Y-STR基因座提供排除结论，LRs值仅作为辅助验证，这提示我们：在鉴定双亲皆疑又缺少生母（父）参与的祖孙亲缘关系时，需要根据案例情况，在常染色体STR基因座的基础上增加检测性染色体STR基因座补充验证;在利用ITO法计算LRs值时，不一定能得到明确结论，但仍需要增加检测常染色体STR基因座的数量，提高结论的准确性。