血清甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体、异常凝血酶原、鳞状细胞癌抗原联合检测对肝细胞癌的诊断价值

李薇薇

[摘要]目的 探究血清甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）、异常凝血酶原（DCP）、鳞状细胞癌抗原（SCCA）联合检测在肝细胞癌（HCC）的诊断价值。方法 选取2017年5月～2019年5月我院就诊的40例HCC患者、42例肝硬化（LC）患者、54例慢性乙型肝炎（CHB）患者、50例健康体检者的血清学指标及临床资料。检测各组受试者血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA的水平，比较4项血清标志物单独及联合诊断的工作特征曲线下面积。结果 与健康组比较，HCC组、LC组、CHB组血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差异有统计学意义（P<0.01）;与LC组、CHB组比较，HCC组血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差异有统计学意义（P<0.01）。4项指标联合检测的曲线下面积均大于四者的单独检测。结论 AFP、AFP-L3、DCP、SCCA联合检测具有较高诊断效能，可为早期诊断HCC提供参考。

[关键词]肝细胞癌;甲胎蛋白类;异常凝血酶原;鳞状细胞癌抗原;诊断

[中图分类号] R735.7          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2020）8（a）-0094-04

Diagnostic value of combined detection of serum alpha-fetoprotein， alpha-fetoprotein heterogeneity-L3， des-gamma-carboxyprothrombin， squamous cell carcinoma antigen in hepatocellular carcinoma

LI Wei-wei

Department of Laboratory， Qingdao sanatorium of Shandong Province， Shandong Province， Qingdao   266071， China

[Abstract] Objective To explore the diagnostic value of combined detection of serum alpha-fetoprotein （AFP）， alpha-fetoprotein heterogeneity-L3 （AFP-L3）， des-gamma-carboxyprothrombin （DCP）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA） in hepatocellular carcinoma （HCC）. Methods From May 2017 to May 2019， 40 patients with HCC， 42 patients with liver cirrhosis （LC）， 54 patients with chronic hepatitis B （CHB）， and 50 healthy people were selected from our hospital for serological indicators and clinical data. The levels of serum AFP， AFP-L3， DCP and SCCA were measured in each group， and the area under the curve of receiver operating characteristic （ROC） of 4 serum markers， alone or in combination， were compared. Results The levels of AFP， AFP-L3， DCP and SCCA in HCC group， LC group and CHB group were higher than those in the healthy group， the differences were statistically significant （P<0.01）. The levels of AFP， AFP-L3， DCP and SCCA in HCC group were higher than those in LC group and CHB group， the differences were statistically significant （P<0.01）. The area under ROC curve of the combined detection were all higher than those of four individual detections. Conclusion The combined detection of AFP， AFP-L3， DCP， and SCCA has a high detection efficiency， and provide a reliable reference for the early diagnosis of HCC.

[Key words] Hepatocellular carcinoma; Alpha-fetoproteins; Des-gamma-carboxyprothrombin; Squamous cell carcinoma antigen; Diagnosis

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球第六位常见恶性肿瘤，位列第三的肿瘤致死病因，按病理类型占肝癌的85%～90%[1-2]。由于肝癌进展快、预后差的特点，多数肝癌患者确诊时已处于肿瘤中晚期，因此对肝癌患者的早期发现和早期诊断尤为重要。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是肝癌诊断中最常用的指标，但单独使用血清AFP诊断肝癌的特异性和灵敏性尚有欠缺，仍有部分肝癌患者血清AFP检测呈阴性，一定程度上增加了早期诊断HCC的难度。近年来，其他血清标志物也逐步应用于HCC的早期诊断，本研究联合检测血清AFP、甲胎蛋白异质体（alpha-fetoprotein heterogeneity-L3，AFP-L3）、异常凝血酶原（des-gamma-carboxyprothrombin，DCP）、鳞状细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）在HCC患者血清中的表达水平，以确定这4项血清标志物联合检测对HCC的诊断价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2017年5月～2019年5月我院就诊采集的HCC患者血清标本40例（HCC组），肝硬化患者血清标本42例（LC组），慢性乙型肝炎患者血清标本54例（CHB组）和健康体检者血清标本50例（健康组）。HCC组中，男24例，女16例;年龄34～85岁，平均（55.2±11.4）岁。LC组中，男25例，女17例;年龄41～76岁，平均（57.1±9.2）岁。CHB患者组中，男30例，女24例;年龄24～85岁，平均（52.6±13.9）岁。健康组中，男20例，女30例;年龄21～74岁，平均（47.0±13.1）岁。四组患者一般资料进行比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

HCC组依据《原发性肝癌诊疗规范（2017年版）》[2]标准纳入;LC组依据《肝硬化中西医结合诊疗共识》[3]标准纳入，CHB组依据《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[4]诊断。排除标准：①合并严重的免疫系统、内分泌系统或血液系统疾病者;②伴有其他器官或组织的肿瘤者;③近3个月口服过华法林、维生素K、抗菌药物者;④曾行肝动脉化疗栓塞、射频消融、肝脏外科切除等相关治疗者。本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求，经我院医学伦理委员会同意，所有患者对本研究知情同意。

1.2方法

用一次性采血管采集各组受试者空腹静脉血5 ml，静置10 min后3000 r/min离心15 min，分离血清，当日检测。采用化学发光酶免疫分析法检测DCP;化学发光免疫分析法检测血清总AFP和AFP-L3的含量，计算出AFP-L3%，即为AFP-L3占血清AFP总量的百分比，化学发光免疫分析法检测SCCA含量;仪器为安图Auto Lumo A 2000全自动化学发光分析仪，试剂及标准品均由安图公司配套提供，各指标检测均按试剂盒说明书和仪器标准操作步骤进行，并且室内质控在控，室间质控合格。

阳性判断标准：血清AFP诊断原发性肝癌的阳性界值定为400 μg/L，AFP-L3%>10%，DCP>40 m AU/ml，SCCA>1.5 ng/ml。样本检测值超过正常值上限为阳性，低于正常值上限为阴性。本研究采用平行试验，即联合检测时其中1项阳性就认为是4项联合检测为阳性。

1.3统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件分析数据，进行数据的正态性检验、方差齐性检验。正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组比较采用方差分析，多组之间两两比较采用LSD-SNK检验;不符合正态分布的计量资料采用中位数和四分位数间距[M（Q25，Q75）]描述，多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。用Logistic回归筛选变量并建立回归方程，对新变量及各单项指标绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，并比较曲线下面积（area under curve，AUC）。P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1四组血清标志物表达水平的比较

与健康组比较，HCC组、LC组、CHB组血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差异有统计学意义（P<0.01）;与LC组、CHB组比较，HCC组血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差異有统计学意义（P<0.01）（表1）。

2.2单项及联合诊断HCC的ROC曲线分析

绘制血清AFP、AFP-L3、DCP及SCCA单项及联合检测的ROC曲线（图1，封四），四项指标联合检测的曲线下面积（AUCROC）最大（0.943），诊断准确性较高（表2）。单项检测时AFP-L3%的AUCROC（0.910）>DCP的AUCROC（0.878）>AFP的AUCROC（0.829）>SCCA的AUCROC（0.604）。

3讨论

血清AFP是目前诊断肝细胞癌使用最广泛血清标志物[5]，但敏感性和特异性仍不够理想。据报道，血清AFP的敏感性和特异性分别在39%～64%和76%～91%之间[6]。在检测小肝癌或早期肝癌时，部分患者血清AFP水平仍存在假阴性的情况，而在肝硬化或无HCC的慢性重型肝炎患者中，血清AFP常常显著升高[7]。血清AFP单项检测对HCC诊断的灵敏性和特异性已无法满足临床需求。近年来越来越多的血清标志物出现，在一定程度上弥补了血清AFP敏感性不足的问题，也显著提高了诊断的特异性。

AFP-L3是HCC早期诊断高特异性标志物。研究表明，即使HCC尚处于早期阶段，恶性肝细胞也会产生AFP-L3，如大约有35%的小肝癌（直径<2 cm）患者可检测出血清AFP-L3升高[8]。一项临床试验表明，确诊HCC前1年，有34.3%的患者AFP-L3升高，且AFP-L3%≥7%患者的生存率明显低于AFP-L3%<7%的患者[9]。因此，在血清AFP水平较低且超声未见可疑结果的情况下，AFP-L3可作为HCC发展的早期预测因素。既往研究[10]提示，血清AFP-L3和AFP水平存在很强的相关性，但AFP-L3%的升高不依赖于血清AFP的升高，故为提升肝癌的诊断效能，血清AFP宜与AFP-L3%进行联合检测，而不是AFP-L3。

DCP是由于肝细胞在恶性转化过程中，维生素K依赖的羧化酶系统受损，羧化作用缺陷，从而产生的异常凝血酶原分子。在这一过程中，DCP失去了其正常的凝血酶原功能，可能在HCC中起到促进恶性增殖的作用。一项前瞻性研究[11]表明，HCC患者与肝硬化和慢性肝炎患者相比，DCP的敏感性为72.7%，特异性为90.0%。由于血清AFP和DCP并没有严格的相关性，且DCP的特异性优于AFP，因此联合检测可以有效提高HCC的检出率[12]。联合检测DCP、AFP及AFP-L3对HCC检测显示出较好的灵敏性和特异性[13]。

SCCA是一种肿瘤相关蛋白，是高分子量丝氨酸蛋白酶抑制剂家族的成员。Guido等[14]发现，SCCA在再生组织中表达较弱，而在HCC和发育异常结节中的表达却显著增加，表明其是早期发现HCC的潜在标志物。一项Meta分析[15]表明，SCCA在HCC筛查中均显示出中等诊断度。SCCA的高敏感性和低特异性对AFP进行了补充，并为辅助诊断HCC提供了一定证据。研究[16]表明，与较大的肝癌相比，SCCA在较小的肝癌中有更明显的表达，提示其在HCC早期诊断中可能起到重要作用。

邹珍珍等[17]发现，血清AFP-L3、DCP联合检测对HCC患者具有较强的诊断效能，两者联合检测可提高HCC的早期检出率，减少漏检率。张明跃等[18]证实，AFP、DCP及AFP-L3%联合检测能提高HCC的诊断效能。本研究结果显示，HCC组血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平高于LC组、CHB组、健康组（P<0.05），提示检测上述4项指标能为HCC的诊断提供依据。此外，本研究还探讨了上述4项指标联合检测对HCC的诊断价值，结果显示，4项指标联合检测的曲线下面积（AUCROC）最大（0.943），诊断准确性较高。

综上所述，血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA联合检测具有较高诊断效能，可为早期诊断HCC提供参考，但其在临床中大规模的推广应用有待进一步研究和验证。

[参考文献]

[1]Llovet JM，Burroughs A，Bruix J.Hepatocellular carcinoma[J].Lancet，2003，362（9399）：1907-1917.

[2]中华人民共和国卫生和计划生育委员会医政医管局.原发性肝癌诊疗规范（2017年版）[J].中华消化外科杂志，2017，16（7）：635-647.

[3]刘成海，危北海，姚树坤.肝硬化中西医结合诊疗共识[J].中国中西医结合消化杂志，2011，19（4）：277-279.

[4]王贵强，王福生，成军，等.慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）[J].临床肝胆病杂志，2015，31（12）：1941-1960.

[5]Galle PR，Foerster F，Kudo M，et al.Biology and significance of alpha-fetoprotein in hepatocellular carcinoma[J].Liver Int，2019，39（12）：2214-2229.

[6]Seo SI，Kim HS，Kim WJ，et al.Diagnostic value of PIVKA-Ⅱ and alpha-fetoprotein in hepatitis B virus-associated hepatocellular carcinoma[J].World J Gastroenterol，2015，21（13）：3928-3935.

[7]Choi JY，Jung SW，Kim HY，et al.Diagnostic value of AFP-L3 and PIVKA-Ⅱ in hepatocellular carcinoma according to total-AFP[J].World J Gastroenterol，2013，19（3）：339-346.

[8]Li D，Mallory T，Satomura S.AFP-L3：a new generation of tumor marker for hepatocellular carcinoma[J].Clin Chim Acta，2001，313（1-2）：15-19.

[9]Kumada T，Toyoda H，Tada T，et al.High-sensitivity Lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein assay predicts early detection of hepatocellular carcinoma[J].J Gastroenterol，2014，49（3）：555-563.

[10]关贵文，姚明解，钱相君，等.AFP和AFP-L3%联合检测在肝细胞癌诊断中的应用价值[J].临床肝胆病杂志，2019，35（7）：1514-1519.

[11]Carr BI，Kanke F，Wise M，et al.Clinical evaluation of lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein and desg-amma-carboxy prothrombin in histologically proven hepat-ocellular carcinoma in the United States[J].Dig Dis Sci，2007，52（3）：776-782.

[12]Tsuchiya N，Sawada Y，Endo I，et al.Biomarkers for the early diagnosis of hepatocellular carcinoma[J].World J.Gastroenterol，2015，21（37）：10 573-10 583.

[13]Best J，Bilgi H，Heider D，et al.The GALAD scoring algorithm based on AFP，AFP-L3，and DCP significantly improves detection of BCLC early stage hepatocellular carcinoma[J].Z Gastroenterol，2016，54（12）：1296-1305.

[14]Guido M，Roskams T，Pontisso P，et al.Squamous cell carcinoma antigen in human liver carcinogenesis[J].J Clin Pathol，2008， 61（4）：445-447.

[15]Liu CH，Gil-Gómez A，Ampuero J，et al.Diagnostic accuracy of SCCA and SCCA-IgM for hepatocellular carcinoma：A meta-analysis[J].Liver Int，2018，38（10）：1820-1831.

[16]Trerotoli P，Fransvea E，Angelotti U，et al.Tissue expression of Squamous Cellular Carcinoma Antigen （SCCA） is inversely correlated to tumor size in HCC[J].Mol Cancer，2009，（8）：29.

[17]鄒珍珍，高致远，童林，等.联合检测血清AFP-L3和DCP在肝细胞癌中的应用[J].中国现代普通外科进展，2019，22（9）：735-737.

[18]张明跃，陈浩.AFP、DCP和AFP-L3%联合检测对肝细胞肝癌的诊断价值[J].癌症进展，2019，17（6）：719-721.

（收稿日期：2020-03-11）