百合病原菌米根霉的寄主范围

徐 丹，李润根，肖世杰

(宜春学院 生命科学与资源环境学院，江西省作物生长发育调控重点实验室，江西 宜春 336000)

根霉属(Rhizopussp.)和匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)、黑根霉(Rhizopusnigvicans)等是果蔬采后病原菌，能为害蓝莓[1]、荸荠[2]、西瓜种子[3]、番茄[4]、哈密瓜[5]、棉苗[6]、郁金香[7]、菠萝蜜[8]、板栗[9]、 [10]、茄子[11]、桃树[12]、竹荪[13]、紫花苜宿[14]、白兰瓜[15]、华重楼[16]、金针菇[17]、太子参[18]、水蜜桃[19]、葡萄[20]、玉米[21]、西葫芦[22]、草莓[23]、枸杞[24]、茄子[25]、梨[26]、猕猴桃[27]和甘薯[28]等作物。

百合病原菌米根霉(Rhizopusoryzae)[29]属根霉属真菌，是本实验室在2017年从采后储藏的龙牙百合(Liliumbrowniivar.viridulum)种球上分离、鉴定的新病原菌，会导致百合种球严重腐烂，目前对于米根霉的寄主范围研究甚少。本试验采用离体叶片(果实)接种法，通过将米根霉菌接种到不同科属作物，观察研究其侵染效应，了解其寄主范围，检测其对作物的致病能力，研究其发病情况，掌握其致病特性，为保证农林作物的经济效益以及对其病害进行科学预防提供保障和指导作用。

1 材料与方法

1.1 材料

菌种 米根霉(Rhizopusoryzae)，本实验室保存。

植物材料 参试果实：南瓜，黄瓜，甜瓜，冬瓜，番茄，李，沙梨，草莓，苹果，玉米；叶片：茄子，辣椒，菊花，南瓜，三角梅，大白菜，空心菜，柳树，慈竹，葡萄，球茎甘蓝，结球甘蓝，桃，桑，甘薯，百合；块根：甘薯，土豆，胡萝卜。

马铃薯(PDA)培养基 土豆200 g，琼脂15-20 g，葡萄糖20 g，定容至1 L，分装至锥形瓶中，121℃高温灭菌30 min，待用。

1.2 实验方法

1.2.1 米根霉菌培养

将米根霉菌转接到马铃薯培养基(PDA)，将接好的菌种放入25℃培养箱中培养5-7d，供后续试验使用。

1.2.2 寄主范围测定

采用离体材料(叶片或果实)接种法，取自学校试验基地的南瓜、黄瓜、冬瓜等作物的健康叶片或果实，用流水冲洗后，70%乙醇消毒30 s，再用2%次氯酸钠消毒5 min，切取适宜长度用无菌滤纸吸干水分，放在事先灭过菌的垫有滤纸的培养皿中，背面朝上，每皿放2-3片(块)，保湿培养，将5 mm菌饼接种在叶片背面，以接种无菌PDA块为对照，置于25℃恒温培养箱中培养，观察叶片、果实被浸染的情况。所有处理均设3次重复，ck(接无菌PDA块)2次重复。

1.2.3 病情分级标准

参照Flood[30]等分级标准进行修改，将作物侵染分为四级：0级，米根霉未在作物材料上生长，无水浸状现象，无腐烂现象；1级，米根霉菌丝覆盖作物材料表面占比小于1/2，作物材料出现水浸状现象或者出现轻微腐烂现象；2级，米根霉菌丝覆盖作物材料表面占比在1/2至3/4之间，作物材料出现水浸状以及腐烂现象，3级，米根霉菌丝几乎覆盖住作物材料的整个表面，出现严重的水浸状现象以及腐烂现象。

1.3 数据分析

采用SPSS22和Excel软件对参试材料发病等级进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 蔷薇科作物发病等级及症状

米根霉对同为蔷薇科作物的侵染效应存在一定的差异，其中，草莓和沙梨存在极显著的差异，米根霉对草莓有较强的侵染性，但对沙梨不侵染(图1)；草莓与李、桃叶和苹果之间差异显著，(表1)。

表1 蔷薇科Rosaceae作物发病情况

图1 草莓(左)和沙梨(右)发病情况

2.2 葫芦科作物发病等级及症状

米根霉对葫芦科作物的侵染效应存在显著差异。其中最为明显的是黄瓜和南瓜果实，发病等级为2.67，与冬瓜果实和南瓜叶显著差异(图2)；而且米根霉对南瓜与南瓜叶的侵染效应存在显著差异，对果实的侵染效应明显大于对叶片的侵染效应(表2)。

表2 葫芦科Cucurbitaceae作物发病情况

图2 南瓜正面(左)和背面(右)发病情况

2.3 其他科属作物发病等级及症状

米根霉对土豆、胡萝卜、甘薯(块根，图3左)、三角梅、柳叶和茄叶五种作物材料致病性强，与其他作物材料之间的受侵染程度存在显著差异；对茄科、十字花科等作物叶片也致病；但慈竹叶和玉米(图3右)不受侵染，与其他作物之间都存在显著差异(表3)。

图3 甘薯块根(左)和玉米(右)发病情况

表3 其他科属作物致病情况

3 小结与讨论

米根霉对蔷薇科、葫芦科、茄科三种科属作物有很强的侵染效应，但其中也存在不被侵染的作物——沙梨；米根霉对胡萝卜、空心菜、球茎甘蓝、结球甘蓝、大白菜、甘薯叶、葡萄叶、菊叶、三角梅和柳等植物都具有一定的侵染效应，对沙梨、慈竹和玉米两种作物不侵染；米根霉对同种作物的不同部位的侵染能力有所差异，对果实的侵染效应要强于叶片。米根霉可侵染甘薯(块根)、桑和百合，与Holmes等[31]、方水琴等[32]和巩慧玲等[33]研究结果相同。有研究报道，米根霉还可侵染向日葵[34]、马铃薯[35]、烟叶[36]、[37]、花生[38]、忍冬[39]、枣[40]、香菇[41]和芦荟[42]等，由此可见，米根霉的寄主范围包括蔷薇科(Rosaceae)，葫芦科(Cucurbitaceae)，茄科(Solanaceae)，十字花科(Brassicaceae)，伞形科(Umbelliferae)，旋花科(Convolvulaceae)，紫茉莉科(Nyctaginaceae)，杨柳科(Salicaceae)，旋花科(Convolvulaceae)，桑科(Moraceae)，菊科(Compositae)，葡萄科(Vitaceae)，百合科(Liliaceae)、忍冬科(Caprifoliaceae)、鼠李科(Rhamnaceae)、伞菌科(Agaricaceae)等十六个科属作物，对禾本科作物几乎无侵染效应。米根霉对农林作物有危害广、侵染性强，不仅是果蔬采后病原菌，还可在造成茄科、十字花科等作物生长过程中引发病害等特点，生产上需引起特别注意。

研究表明，米根霉对玉米和沙梨不致病，但马秉元等[21]研究表明黑根霉(R.nigvicans)对玉米致病； Kwon等[26]研究表明匍枝根霉(R.stolonifer)引起梨软腐病，可能是不同菌种致病性不同的缘故，陈晓琳等[43]在玉米内发现有根霉属(Rhizopus)内生菌，这也证明玉米中根霉属真菌并不一定就是病原菌。试验探讨了米根霉对不同科属的植物的侵染情况，研究其寄主范围，旨在避免植物在生长发育的过程中遭受病原菌的侵染，减少大规模发病现象的发生，寻找抗病育种的新种质资源，为防治米根霉提供理论依据。