三种杀虫剂对七星瓢虫的急性毒性评价

袁文悦

(上海市农药研究所有限公司，上海 201702)

化学杀虫剂因高效、便捷和经济等特点而被广泛用于害虫的治理。然而，化学杀虫剂的长期大量使用不仅破坏了害虫种群的自然调控，而且也造成了对人类健康和环境有益生物的不利影响。寄生性和捕食性昆虫与杀虫剂的靶标害虫常共栖息于同一环境，并通过不同途径直接或间接暴露于各种杀虫剂中。因此，杀虫剂对害虫天敌的潜在影响已经受到公众和科学家的高度关注。

七星瓢虫(Coccinella septempunctata)属鞘翅目瓢虫科的捕食性天敌昆虫，可捕食危害各种农作物及果树的蚜虫，在我国各省均有分布[1]。目前关于杀虫剂对七星瓢虫的急性毒性效应，大多数集中于对传统杀虫剂，例如有机磷、氨基甲酸酯类农药等的研究，而对近年来新上市的杀虫剂的研究相对较少[2-4]。基于此，本文选择阿维菌素(abamectin)、高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)和除虫菊素(pyrethrins II)为对象，在室内条件下，开展了七星瓢虫毒性评价，以期为这些药剂的生态毒理风险评价提供依据。

1 材料及方法

1.1 供试仪器与药剂

1.1.1 试验仪器

AUY 220型电子分析天平(日本岛津公司)、超声波清洗器、BIC-300型人工气候箱(上海博迅)、RTS-6型温湿度计(深圳瑞特斯)、DY型滚动式烤香肠机(浙江瑞安东银)、TES-1334A型照度计(台湾泰仕)、移液管、移液器、容量瓶、指形管(直径2.5 cm，长度8.0 cm，内表面积53.4 cm2)等。

1.1.2 供试药剂

10%高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂和 5%阿维菌素微囊悬浮剂，均系江苏明德立达作物科技有限公司提供；5%除虫菊素水乳剂，系浙江威尔达化工有限公司生产；5%阿维菌素水乳剂及乳油，系河北兴柏农业科技有限公司产品；98.6%乐果原药，是上海市农药研究所有限公司实验室自存。

1.2 供试靶标

七星瓢虫(Coccinella septempunctata)，是上海市农药研究所有限公司实验室用蚜虫饲养的品系。选取孵化3～4 d的2龄幼虫供试验用，孵化环境条件与毒性试验条件均为室温：23～27 ℃，相对湿度 60%～90%，光暗比16 h∶8 h，光照强度不低于1 000 lx。

1.3 试验方法

采用NY/T 3088-2017《化学农药 天敌(瓢虫)急性接触毒性试验准则》推荐的方法进行。

1.3.1 供试药液配制

称取一定质量被试物，以丙酮溶解，超声溶解15 min后定容得母液，用丙酮逐级稀释，从各药剂最高浓度向下以2倍的级差间距共设置5～6个梯度浓度。同时用丙酮配制浓度为500 mg/L的乐果母液，并稀释10 000倍后得到参比试验用乐果浓度(0.2 g a.i /hm2)，并设空白对照和丙酮助溶剂对照，具体浓度设计见表1。

1.3.2 试验过程

首先取相应浓度的试验药液2 mL于指形管中，倾斜放置于烤香肠机上缓慢转动，待丙酮药液挥发后制成均匀药膜管，注意倾斜放置时避免药液洒落。然后，选择大小一致的2龄瓢虫幼虫单头接入药膜管中，每个指形管放入1头，饲喂足量的活蚜虫，并以纱布、皮筋封紧管口，置于人工气候箱内培养，注意指形管应平放，保证瓢虫能够自由爬行，减少重力对其不利影响。每个处理组设3个重复，每重复不少于10头2龄瓢虫幼虫。每天观察记录药膜管中瓢虫的中毒症状和死亡数。

在试验中，为了验证瓢虫的敏感性，采用乐果作为参比物质。当乐果在0.20 g/hm2剂量时，瓢虫幼虫死亡率在40%～80%时，该种群可进行试验。试验期间，每天观察记录药膜管中瓢虫的中毒症状和死亡数，并清除残渣，加入足量的蚜虫饲喂，将死亡的幼虫、蛹与行为异常的瓢虫一起记录(如活动不灵活的、抽搐的)直至化蛹。化蛹后，蛹继续保持在药膜管内观察至成虫羽化，计算成虫羽化率，未羽化成虫均计为死亡虫。当幼虫或蛹的减少是由于操作失误(例如，幼虫逃走或再饲养、清洁过程中被杀 死)，受试瓢虫幼虫初始数量应减去减少的幼虫数量。

表1 供试药液梯度浓度

限度试验的上限剂量设置为被试物田间最大推荐有效剂量乘以多次施药因子(MAF，一般选取默认值3)。当受试瓢虫在被试物达到上限剂量时未出现死亡，则无需继续试验。当被试物在水中或其他有机溶剂中的溶解度小于田间最大推荐有效剂量时，则采用其最大溶解度作为上限剂量进行试验。试验期间对照组死亡率不超过20%[5]。

1.4 数据处理与计算公式

LR50的计算可采用机率值法估算，也可应用有关毒性数据计算软件进行分析和计算。使用寇氏法可用于计算瓢虫在不同观察周期的LR50及95%置信限。当对照组受试生物出现死亡时，各处理组的死亡率计算应根据对照组死亡率用Abbott公式进行修正。

LR50的计算公式如下：

式中：Xm为最高浓度的对数；j为相邻浓度比值的对数；ΣP为各组死亡率的总和(以小数表示)。

95%置信限的计算公式：

95%置信限=logLR50±1.96SlogLR50

标准误差S的计算公式：

式中：P为1个组的死亡率(%)；N为各浓度组瓢虫的数量(头)。

限度试验中施药因子MAF按以下公式计算，当缺少任何数据时，MAF可选取默认值3。

式中：k为农药在植株表面的降解速率常数；n为施药次数(次)；i为施药间隔(d)。

降解速率常数k的计算公式：

式中：DT50为农药在植株表面的降解半衰期(d)。当缺少DT50的实测数据时，采用默认值10 d。

2 结果与分析

几种杀虫剂及不同剂型对七星瓢虫的急性毒性试验结果见表2。由表2可见，3种杀虫剂及3种不同剂型的同含量阿维菌素对孵化3～4 d的2龄七星瓢虫幼虫均具有一定的杀伤力，且死亡率随给药浓度的升高而增大。

采用寇氏法计算了3种不同杀虫剂及3种不同剂型的同含量阿维菌素农药对七星瓢虫的急性毒性值，结果见表3。可见，3种不同杀虫剂中，以高效氯氟氰菊酯对3～4 d的2龄七星瓢虫幼虫的毒性最高，阿维菌素其次，除虫菊素最安全。阿维菌素对七星瓢虫的毒性大小因剂型不同而表现出显著不同，其中以微囊悬浮剂对2龄七星瓢虫幼虫的毒性最高，而水乳剂最安全，乳油介于两者之间。

表2 几种杀虫剂及不同剂型对七星瓢虫的急性毒性试验结果

表3 3种杀虫剂及3种不同剂型的同含量阿维菌素对七星瓢虫的急性毒性

3 结 论

本试验研究初步证实3种杀虫剂对七星瓢虫的急性毒性因杀虫剂种类和剂型而显示出明显差异，其毒性大小顺序为高效氯氟氰菊酯＞阿维菌素＞除虫菊素，而3种不同剂型的阿维菌素对七星瓢虫幼虫的毒性大小顺序为 5%阿维菌素微囊悬浮剂＞5%阿维菌素乳油＞5%阿维菌素水乳剂。

本文结论仅是室内急性毒性试验的结果，而实际田间施药过程中还会受田间用量、施用方法、现场气候、环境条件等复杂因素影响，其田间毒性风险情况尚有待于进一步研究。