精神分裂症患者CYP2D6基因多态性与利培酮血药浓度及临床疗效关系探究

王 皓， 徐红林， 钱博文， 黄永祥

精神分裂症(schizophrenia， SCH)是由于多种因素引起的临床综合征，主要表现为思维、认知功能和情感交流等障碍，严重影响了患者及其家人的正常生活[1]。利培酮(risperidone， RISP)是目前临床常用的第二代抗精神分裂症药物，可有效改善SCH患者的精神病理症状，但仍有部分患者治疗效果并不十分理想[2-3]。研究显示，遗传因素是造成药物的治疗反应出现个体差异的主要原因之一[4]。近年来，药物基因组学分析了多种药物在体内的代谢标记物，发现基因多态性可以影响药物在体内的代谢过程，从而影响药物治疗反应，临床应根据基因组学检测结果和其他临床因素来选药和确定剂量[5-6]。

细胞色素P450家族2D6(CYP2D6)属于CYP450酶家族，参与多种药物在体内的代谢[7]。有研究显示，RISP在体内可以经CYP2D6酶代谢分解为活性代谢产物9羟基利培酮(9 hydroxykirisperidone， 9-OH-RISP)，发挥其抗精神分裂症作用[8]。但SCH患者的CYP2D6多态性和RISP的血药浓度及治疗效果之间的关系尚不清楚。因此，本研究分析了CYP2D6多态性与RISP的血药浓度及治疗效果之间的关系，以期指导临床RISP的用药治疗。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析2019年1月—8月本院收治的196例SCH患者的临床资料。①纳入标准：符合中国精神疾病分类与诊断标准第Ⅲ版(CCMD-Ⅲ)中SCH诊断标准[9]，简明精神病量表(BPRS)总分≥40分；通过医院医学伦理委员会审核。②排除标准：治疗期间联合服用其他抗精神病药物者；对RISP过敏者；合并其他精神障碍疾病(抑郁症、精神发育迟缓等)者，合并严重心、肝、肾功能障碍者；临床资料不完整者。根据CYP2D6携带的等位基因将其分为正常功能组(CYP2D6*1或*2)40例、低功能1组(携带一个CYP2D6*10)89例及低功能2组(携带2个CYP2D6*10)67例。正常代谢组男28例，女12例；年龄20～63(46.73±9.21)岁。低功能1组男60例，女29例；年龄21～65(47.95±9.38)岁。低功能2组男46例，女21例，年龄21～65(48.54±9.87)岁。3组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法 所有纳入患者均给予口服RISP(西安杨森有限公司生产，批号：110215218)，起始剂量为1 mg/d，口服8 d后给予4 mg/d，根据患者的症状调整剂量，最高剂量为6 mg/d，第14天给予RISP 3 mg/d维持剂量，8周为1个疗程。患者治疗过程中若出现失眠等不良反应，可给予相应药物处理，不合并应用其他抗精神病药物。

1.3RISP在SCH患者体内的代谢分析 SCH患者采用3 mg/d维持剂量RISP治疗2周后，于早晨服药前抽取静脉血3～5 ml，乙二胺四乙酸抗凝，离心(3500 r/min，10 min)，取上清。一份用于检测RISP和9-OH-RISP的血药浓度，一份用于CYP2D6基因多态性的检测。采用高效液相色谱串联质谱分析仪分析血RISP和9-OH-RISP浓度，取100 μl血清，采用0.5 ml乙腈提取，离心(10 000 r/min，5 min)，取上清，进样分析。参考已有文献[10]，设置色谱条件为色谱柱：Waters Atlantis Hilic Silic C18，150×4.6 mm (i.d.)，粒径5 μm；流动相：乙腈：甲酸铵(60∶40)；质谱条件：电喷雾离子源，正离子电离模式，多反应监测扫描。

1.4SCH患者CYP2D6基因多态性的检测 取患者血清，并于48 h内提取血液白细胞DNA，以Sequenom MassArray系统基因分型检测CYP2D6基因多态性。采用DNA提取试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)提取DNA；Sequenom Mass ARRAY技术检测基因多态性，检测CYP2D6基因位点分别为：rs1065852(上游引物5'-ACGTTGGATGAGTCCACATGCAG-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTGGTGGACCTGATGCACCG-3');rs16947(上游引物5'-ACGTTGGATGTGAGAGCAGCTTCAATGATG-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTGGTCGAGGTGGTCACCATC-3');rs1135840(上游引物5'-ACGTTGGATGCACAGCCACTGTTTCCAACC-3'，下游引物5'-ACGTTGGATGTTTCTCACTCGTCCTGGTAG-3')。

1.5RISP治疗SCH患者的疗效观察 分别于治疗前和治疗8周后，采用BPRS量表评估患者的精神症状，计算BPRS减分率=[(治疗前-治疗后)/(治疗前-18)]×100%，共18项，每项0～7分，总分126分，得分越高，症状越严重。于治疗8周后，采用不良反应症状量表(TESS)评定患者的不良反应，分值0～100分，分值越高，不良反应症状越严重。采用BPRS减分率评估临床疗效[11]，治愈为BPRS量表评分减少≥80%；显效为BPRS量表评分减少60%～80%；好转为BPRS量表评分减少30%～60%；无效为BPRS量表评分减少<30%。

2 结果

2.1SCH患者CYP2D6基因多态性 SCH患者CYP2D6*1等位基因的频率为29.59%，CYP2D6*2等位基因的频率为13.52%，CYP2D6*10等位基因的频率为56.89%。正常功能组*1*1基因型22例，*2/*2基因型14例，*1/*2基因型4例；低功能1组*1*10基因型68例，*2*10基因型21例；低功能2组*10*10基因型67例。见表1。

表1 3组SCH患者的CYP2D6基因多态性[个(%)]

2.23组RISP血药浓度比较 RISP和9-OH-RISP在0.1～40 ng/ml范围内线性关系良好，回收率及方法学验证回收率均>80%，日内、日间相对标准差均<15%，符合国家标准对分析方法学考核要求。检测结果显示，正常功能组和低功能1组的RISP血药浓度显著低于低功能2组，9-OH-RISP血药浓度和9-OH-RISP/RISP比值显著高于低功能2组(P<0.01)。正常功能组的RISP和9-OH-RISP血药浓度与低功能1组比较差异无统计学意义(P>0.05)，9-OH-RISP/RISP比值显著高于低功能1组(P<0.01)。见表2。

表2 3组SCH患者的RISP血药浓度比较

2.3临床疗效比较 3组治疗总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 3组SCH患者临床疗效比较(例)

2.4BPRS减分率和TESS评分比较 与治疗前比较，正常功能组和低功能1组治疗后BPRS减分率和TESS评分均显著低于低功能2组，且正常功能组的BPRS减分率显著低于低功能1组(P<0.01)。见表4。

表4 3组SCH患者行RISP治疗后BPRS减分率和TESS评分比较

2.5CYP2D6基因多态性与9-OH-RISP/RISP比值、BPRS减分率和TESS评分之间的相关性 采用变量赋值，正常功能组(携带0个CYP2D6*10)=0，低功能1组(携带1个CYP2D6*10)=1，低功能2组(携带2个CYP2D6*10)=2。携带CYP2D6*10与9-OH-RISP/RISP比值呈显著的负相关关系(r=-0.378，P<0.001)，与BPRS减分率和TESS评分呈显著的正相关关系(r=0.242，P=0.016；r=0.284，P=0.004)。

3 讨论

RISP是一种临床常用的SCH治疗药物，在体内可代谢为活性产物9-OH-RISP，共同发挥其抗精神病作用[12-15]。近年研究显示，CYP2D6基因多态性可影响RISP在体内的代谢过程，从而影响药物的疗效和不良反应[16-17]，因此本研究分析了CYP2D6基因多态性与RISP血药浓度和疗效之间的关系。CYP2D6基因具有100多种等位基因变异，可以通过编码基因的碱基插入、位移或缺失等发生基因突变[18]。本研究结果显示，SCH患者的CYP2D6基因CYP2D6*1等位基因的频率为29.59%，CYP2D6*2等位基因的频率为13.52%，CYP2D6*10等位基因的频率为56.89%。与杨帏等[19]的研究结果基本一致，该研究分析了中国人的CYP2D6基因多态性，发现CYP2D6*10出现的频率>50%，提示我国人群的CYP2D6基因以CYP2D6*10为主。CYP2D6*2 基因多态性并不影响CYP2D6酶活性，而CYP2D6*10可不同程度影响CYP2D6酶活性[20]。因本研究根据患者携带CYP2D6*10数量将其分为正常功能组、低功能1组(携带1个CYP2D6*10)和低功能2组(携带2个CYP2D6*10)，以期分析携带CYP2D6基因多态性与RISP临床疗效之间的关系。

CYP2D6基因多态性可引起药物代谢的变化，导致药物代谢丧失、性质改变及药物代谢率下降或增强[21]。本研究结果显示，正常功能组和低功能1组的RISP血药浓度明显低于低功能2组，9-OH-RISP血药浓度和9-OH-RISP/RISP比值明显高于低功能2组，提示携带2个CYP2D6*10可明显降低9-OH-RISP血药浓度和9-OH-RISP/RISP比值。Stingl和Viviani[22]报道，根据CYP2D6基因多态性可将药物代谢分为快代谢型(携带野生型等位基因)、中代谢型(携带1个突变型等位基因)和慢代谢型(携带2个突变型等位基因)，提示本研究中正常功能组为快代谢型，低功能1组为中代谢型，低功能2组为慢代谢型，携带2个CYP2D6*10可明显降低RISP在体内的代谢速率。张婷等[23]报道，9-OH-RISP/RISP比值对RISP在体内的代谢速率具有较高的预测效能，可预测RISP的代谢速率，证实携带CYP2D6*10可明显降低RISP的体内代谢速率。

本研究结果显示，正常功能组和低功能1组治疗后的BPRS减分率和TESS均明显低于低功能2组，提示携带2个CYP2D6*10可明显改善SCH患者的精神症状并降低不良反应，分析原因可能是由于携带2个CYP2D6*10可明显降低RISP在体内的代谢速率，提高RISP血药浓度，在提高了临床疗效的同时，也降低了治疗的不良反应，与陈进东等[24]研究结果基本一致。本研究结果显示，携带2个CYP2D6*10与9-OH-RISP/RISP比值呈显著的负相关，与BPRS减分率和TESS评分呈显著的正相关，提示CYP2D6基因多态性可通过影响RISP的血药浓度，影响临床疗效，临床可根据患者的CYP2D6基因多态性，预测RISP在体内的代谢情况，设计个体化治疗方案。

综上所述，携带2个CYP2D6*10可以明显降低RISP在体内的代谢速率，提高RISP血药浓度，改善患者的精神症状，为临床SCH患者的个体化治疗提供临床指导。