三种类型黑木耳菌种制作及应用比较试验

王庆武 兰玉菲 孔 怡 唐丽娜 崔 晓

（泰安市农业科学研究院，山东泰安271000）

食用菌菌种类型按照物理性状主要分为固体菌种和液体菌种两大类，固体菌种又分为木屑菌种和枝条菌种。菌种制作是食用菌栽培的重要环节[1]，不同类型菌种制作流程及菌种质量不一。优良菌种菌龄短，活力强，纯度高，接种后萌发快、菌丝长势旺，产量高，抗病性强。目前栽培黑木耳用种主要是固体菌种，而液体菌种因前期投入大、技术复杂，尚未广泛推广[2]。固体菌种制作较为繁琐、制种时间长，菌龄不一致，活力低，用工多，但发菌过程中易发现并剔除杂菌污染菌包[3]；液体菌种制作时间短，菌龄一致，活力强，萌发快，用工少，但培养菌种技术要求高。菌种需求量随着黑木耳产业的快速发展而急剧上升[4]。为探索不同类型菌种应用于黑木耳生产的效果，笔者进行了几年相关试验，现将试验结果总结如下，以期为黑木耳规模化栽培用种提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）供试黑木耳品种：山东泰安市农业科学研究院保藏菌株TH02。

（2）试验培养基

母种培养基配方：马铃薯200 g（去皮煮汁），麸皮40 g（煮汁），葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，琼脂20 g，加水1 L。

木屑菌种培养基配方：木屑60%，棉籽壳30%，麸皮8%，葡萄糖1%，石膏1%。培养料含水量（60±2）%。

枝条菌种培养基配方：枝条90%，木屑7%，麸皮2%，葡萄糖0.5%，石膏0.5%。

液体菌种培养基配方：玉米粉3%，淀粉4%，酵母膏0.1%，麸皮0.2%，KH2PO40.3%，MgSO40.15%，维生素B10.15‰，消泡剂0.3‰，水1 L。

栽培料配方：木屑86.5%，麸皮10%，玉米面2%，石膏1%，石灰0.5%。培养料含水量（60±2）%。

1.2 试验方法

1.2.1 菌种制作

1.2.1.1 母种活化

采用18 mm×180 mm 玻璃试管制作斜面培养基，无菌条件下接入一块0.4 cm×0.4 cm 原始母种块，25～28 ℃暗培养，菌丝满管后备用。

1.2.1.2 木屑菌种培养

采用15 cm×30 cm×0.005 cm 聚丙烯折角袋。按照培养基配方配料、装袋，无棉盖体封口，高压蒸汽灭菌后冷却至室温。无菌条件下每袋接入一块2～2.5 cm长母种块，25～28 ℃暗培养。

1.2.1.3 枝条菌种

选用7 mm×7 mm×150 mm杨木枝条，1%石灰水浸泡48 h，捞出沥干水。培养袋为15 cm×30 cm×0.005 cm 聚丙烯折角袋。按照培养基配方配料、装袋，无棉盖体封口，高压灭菌后冷却至室温，无菌条件下每袋接入一块 2～2.5 cm 长母种块，25～28 ℃暗培养。

1.2.1.4 液体菌种培养

摇瓶液体菌种培养：采用1 000 mL 三角烧瓶，装入液体培养基700 mL，封口膜封口，高压蒸汽灭菌后冷却至室温，无菌条件下接入7～8块2～3 mm 见方母种块，28 ℃静止24 h后置于140～160 r/min 恒温摇床上，25～28 ℃暗培养10 d。

发酵罐液体菌种培养：采用100 L 发酵罐，装入80 L 液体培养基，高压蒸汽灭菌后冷却至25 ℃，无菌条件下接入700 mL 摇瓶菌种，通入无菌空气，调节罐压0.2～0.3 MPa，25～26 ℃培养7 d即可。

1.2.2 接种栽培袋及出耳管理

采用16.2 cm×34 cm×0.003 cm 聚乙烯折角袋。机械装料，中间打孔，每袋装折干料0.6 kg，封口棒封口，常压蒸汽灭菌后冷却至室温。无菌条件下中轴接种，分别接入木屑菌种30 g、枝条菌种2根、液体菌种25 mL，接种后培养室内22～28 ℃暗培养。

菌丝满袋后采用大棚吊袋立体小孔出耳方式，接种三种类型菌种栽培袋各选取无污染袋150 袋，试验棚内随机吊袋。3 次重复，每重复50 袋。按照《黑木耳大棚吊袋栽培技术规程》（DB3709/T 132—2016）进行管理，采收第一潮耳晒干称重。

1.2.3 调查统计

调查记录各处理菌丝生长、出耳、产量等情况，进行综合评价。

表1 三种类型菌种制作周期比较

表2 三种类型菌种接种栽培袋发菌比较

图1 接种不同类型菌种栽培袋发菌比较

2 结果与分析

2.1 三种类型黑木耳菌种制作周期比较

三种类型菌种制作周期见表1。

由表1可以看出，三种类型菌种制种周期不同，液体菌种制种周期最短为27 d，木屑菌种制种周期最长为61 d，液体菌种制种周期相比木屑菌种和枝条菌种分别缩短34 d、31 d；三种类型菌种质量均好。

2.2 三种类型菌种接种栽培袋的发菌比较

三种类型菌种接种栽培袋后发菌结果见表2。

由表2可以看出，三种类型菌种接种栽培袋后，菌丝均在48 h 内萌发；液体菌种吃透料时间最短为13 d，相比木屑菌种、枝条菌种分别缩短2 d、5 d；液体菌种菌丝满袋时间最短为35 d，相比木屑菌种、枝条菌种分别缩短18 d、15 d，且菌丝长势最好；接种液体菌种的发菌污染率最低为1.33%，相比木屑菌种、枝条菌种均降低50%；接种液体菌种的菌袋成品率最高为97.3%，相比木屑菌种、枝条菌种分别提高4.29%、3.51%。

2.3 接种三种类型菌种栽培袋出耳比较

试验结果见表3。

表3 三种类型菌种接种栽培袋出耳比较

由表3 可知，接种液体菌种栽培袋出耳芽最早为17 d，相比木屑菌种、枝条菌种分别提前5 d、3 d，且耳芽整齐；液体菌种出耳期最短为45 d，相比木屑菌种、枝条菌种分别缩短7 d、5 d；液体菌种产量最高，袋均干耳产量为63.42 g；接种液体菌种栽培袋出耳期污染率最低为1.33%，相比木屑菌种、枝条菌种出耳期污染率均降低60.06%。

2.4 应用三种类型菌种经济效益比较

经济效益比较见表4。

表4 应用三种类型菌种经济效益比较

由表4可知，应用液体菌种成本最低，为0.04元/袋，总成本也最低，为2.03元/袋。应用液体菌种经济效益最高，为3.81元/袋，每袋利润最高，为1.79元/袋。

3 小结

选用生产中常用的三种类型菌种栽培黑木耳，结果表明，液体菌种制种周期最短，接种后发菌快，出耳早，整齐，抗性强，综合效益最高；木屑菌种、枝条菌种相比液体菌种制种周期长，菌龄不一致，菌丝满袋时间长，出耳晚，产量低，生产效率低，综合成本高。

综合试验结果，黑木耳规模化生产应用液体菌种，综合效益较高，建议有条件的企业或栽培户采用液体菌种。