严重脂血对Sysmex XE-2100全自动血液分析仪血细胞检测结果的影响

李寿敏，张 茜，赵 府，郭子微，惠 维，王 诚

（1.六盘水市人民医院检验科，贵州六盘水 553001；2.遵义医科大学，贵州遵义 563000）

Sysmex XE-2100全自动血液分析仪是国内目前较为普及的全自动五分类血液分析仪，血细胞分析是病人门诊和入院必做的常规检查之一，保证结果的可靠性尤为重要。既往同行研究脂血对血细胞分析的影响主要是对Hb及相关参数影响，本研究实验过程中还发现过高的脂血还会对WBC计数及分类造成影响，既往没有相关报道。本研究模拟临床上常见脂血和输注脂肪乳后造成的不同程度脂血对Sysmex XE-2100分析仪血细胞分析主要指标影响进行研究，旨在找出受影响的指标及相应的对策，应对检验工作中不可避免的脂血问题。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2019年7月本院健康体检标本30例，其中男性15例，女性15例；年龄18～59岁，平均年龄36岁，样本要求清晨空腹采血3ml（EDTA-K2抗凝），常温保存，所有标本均排除脂血、溶血、黄疸、高白细胞等影响。

1.2 仪器试剂 Sysmex XE-2100全自动血液分析仪及原装配套试剂,德国Roche cobas-8000全自动生化分析仪及TG配套试剂(LOT:38236801)，湘仪牌CTK120离心机。血细胞检测质控品由山东卓越生产(LOT:E514502)，生化质控品有易控(LOT:20212112)和RANDOX(LOT:983VE)，中长链脂肪乳由四川国瑞药业有限公司生产(LOT:1901282)，以上试剂均在有效期内使用。

1.3 方法

1.3.1 血细胞参数检测：空腹采血30例先进行血细胞检测，记录的项目主要是白细胞计数（white blood cell,WBC）,红细胞计数（red blood cell,RBC）,血红蛋白（hemoglobin,Hb）,血细胞比容（hematorit,HCT）,平均红细胞体积（mean corpuscular volume，MCV），平均红细胞血红蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）,平均红细胞血红蛋白浓度水平（mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC）,血小板计数（platelet,PLT）和白细胞五分类比例:中性粒细胞百分比（NEUT%）,淋巴细胞百分比（LYMPH%）,单核细胞百分比（MONO%）,嗜酸性粒细胞百分比（EOS%）,嗜碱性粒细胞百分比（BASO%）。DIFF通道X轴测的是侧向散色光，Y轴测的是侧向荧光（DIFF-Y,NEUT-Y,DIFF-WY,LYMPH-Y），BASO通道X轴测的是侧向散色光（DIFFX,NEUT-X,DIFF-WX,LYMPH-X,BASO-X,BASOWX），Y轴测的是前向散色光（BASO-Y,BASO-WY），记录结果做对照组。

1.3.2 制备不同程度脂血及检测：将每一例标本平均分成两管，为A，B两组，将A，B两组上层血浆分别吸出70μl和120μl，加入等量脂肪乳，用生化仪检测TG浓度。A组TG=91.5±13.3mmon/L，B组TG=137.8±12.6mmol/L。所有样本同时上机检测，将血细胞检测结果按照分组与对照组进行比较分析。

1.4 统计学分析 所有数据采用SPSS 23.0统计软件分析，检测结果以均数±标准差（±s）表示，各组与对照组比较作配对t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 A组与对照组各检测指标比较 见表1。Hb,RDW-SD,RDW-CV,MCH,MCHC,WBC,LYMPH%和MONO%两组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），RBC，PLT，MEUT%，EOS%，BASO两组比较，差异无统计学意义。

2.2 B组与对照组各项检测指标比较 见表1。Hb,HCT,MCV,RDW-SD,RDW-CV,MCH,MCHC,WBC,NEUT%,LYMPH%和MONO%两组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），RBC，PLT，EOS%，BASO%与对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 脂血对白细胞分类的影响 见表2。检测过程中A组有1例是分类失败，B组有10例分类失败，当脂血程度达到一定程度还会对白细胞分类有影响，将A，B组分类散点图敏感度（scattergram sensitivity）与对照组进行比较，DIFF通道分类参数Y轴方向的侧向荧光值除NEUT-Y信号值无影响，其余信号值与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.01），X方向的侧向散色光信号值与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）；BASO通道分类参数Y轴方向的前向散色光均受到影响，其中BASO-Y下降，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），而BASO-WY增加，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），X方向的侧向散色光值均增加，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。而且信号值的改变程度随脂血程度的增加而加大，由于信号值的改变超过仪器的分辨能力造成的白细胞不能分类，见表3。

3 讨论

现代实验室在仪器、人员、试剂等方面都能够很好的控制，标本本身的异常情况更容易引起结果的异常，轻度脂血对XE-2100血液分析仪的检测指标均无影响，徐玉兵等[2-3，5]已进行过相关报道。特殊病人如高脂血症、输注脂肪乳的病人、急性胰腺炎病人等都是脂血标本来源，往往这类病人的血脂可能达到TG＞100mmol/L，脂血会对血细胞检测一些重要指标产生影响，这对检验结果的准确性提出了很大的挑战。

本实验研究结果显示，无论脂血程度如何都对RBC，PLT,EOS%和BASO%检测结果没有影响。重度脂血时会造成Hb,HCT,MCV,MCH和MCHC水平升高，这项研究也与相关文献相符[5,10]，同时还会造成RDW-SD和RBW-CV水平升高。当TG≥137.8±12.6mmol/L时NEUT%检测结果上升明显，同时还会造成白细胞的不分类情况，而且脂血程度越高分类失败情况越多，对白细胞分类受到影响的组别的信号值进行比较分析，DIFF和BASO通道检测信号值均受到干扰。

表1 不同程度脂血对血常规检测结果的影响（±s）

项目 对照组 A组（91.5±13.3mmol/L）B组（137.8±12.6mmol/L）检测值 t p 检测值 t p RBC（×1012/L）4.91±0.27 4.92±0.30 -0.219 0.828 4.93±0.31 0.333 -0.740 HB(g/L) 140.19±10.50 166.91±13.78 -8.723 0.000 189.19±14.36 -15.585 0.000 HCT(%) 40.35±2.89 41.09±3.02 -0.995 0.324 42.52±3.21 -2.836 0.006 MCV(fl) 82.26±4.1 83.64±629 -1.036 0.304 86.4±6.51 -3.038 0.003 MCH(pg) 28.56±1.57 34.0±3.08 -8.903 0.000 38.47±3.25 -15.508 0.000 MCHC(g/L) 347.28±7.07 406.65±14.58 -20.722 0.000 445.8±15.7 -6.684 0.000 RDW-SD(Fl) 39.57±2.57 42.3±3.19 -3.773 0.000 44.14±3.17 -6.344 0.000 RDW-CV(%) 13.28±0.58 14.13±1.02 -4.087 0.000 14.14±0.93 -4.435 0.000 PLT（×109/L）288.27±68.18 295.67±67.87 -1.229 0.224 266.63±68.18 -0.421 0.675 WBC（×109/L）5.98±1.15 6.75±1.21 -2.623 0.011 7.56±1.49 -4.725 0.000 N(%) 47.46±7.97 48.9±10.65 -0.561 0.577 65.13±11.88 -5.829 0.000 L(%) 41.8±9.61 29.58±8.29 5.455 0.000 13.7±4.09 15.005 0.000 M(%) 7.48±1.93 18.96±5.11 11.877 0.000 18.18±7.66 -7.653 0.000 E(%) 3.0±2.41 2.95±2.41 0.143 0.887 3.09±4.35 -0.054 0.957 B(%) 0.2±0.14 0.18±0.15 -0.528 0.599 0.13±0.11 2.386 0.020

表2 不同程度脂血对白细胞分类参数的影响（±s，%）

表2 不同程度脂血对白细胞分类参数的影响（±s，%）

项目 对照组 A组（91.5±13.3mmol/L）B组（137.8±12.6mmol/L）检测值 t p 检测值 t p DIFF-X 141.6±1.9 149.1±2.8 -11.705 0.000 148.7±4.7 -7.304 0.000 DIFF-Y 40.0±1.5 35.0±1.5 12.711 0.000 37.0±3.5 4.167 0.000 NEUT-X 1 416.0±18.9 1 491.3±28.0 -11.709 0.000 1496.6±63.2 -6.269 0.000 NEUT-Y 388.8±59.2 350.4±14.7 3.544 0.001 369.7±34.9 1.528 0.132 DIFF-WX 83.5±±31.2 150.3±39.4 -7.028 0.000 186.1±19.0 -15.426 0.000 DIFF-WY 166.0±37.0 244.1±27.3 -9.256 0.000 226.4±20.2 -7.917 0.000 LYMPH-X 944.7±6.6 1 039.5±15.5 -29.131 0.000 1061.6±20.9 -27.459 0.000 LYMPH-Y 550.4±12.4 500.3±31.6 7.614 0.000 495.4±17.1 13.719 0.000 BASO-X 65.2±3.1 63.0±3.2 2.541 0.014 61.9±3.6 3.677 0.001 BASO-Y 69.0±6.4 61.9±4.0 5.166 0.000 57.7±5.7 7.138 0.000 BASO-WX 93.1±8.8 316.8±62.4 -18.122 0.000 346.3±14.1 -79.956 0.000 BASO-WY 65.3±6.8 160.4±16.0 -28.258 0.000 154.0±13.7 -30.12 00.000

分析原因：①脂血对XE-2100血细胞分析仪的检测指标影响中对RBC的相关参数有影响，其中以HB最为突出，因为HB所采用的是SLS-HB比色法[4,11]，比色测定法原理遵循朗伯-比尔定律[6]，脂血标本浊度的增加从而造成HB假性增高,MCH和MCHC都是计算项目,随HB假性升高而升高。MCV=HCT/RBC(×/L)×1015[9]，HCT假性升高而MCV升高。②仪器是通过检测细胞前向散色光、侧向散色光、侧向荧光的信号值来对白细胞进行分类，在脂血程度达到很高时WBC计数和分类都会受到影响，各类细胞信号值之间相互干扰造成的细胞分类结果改变，信号值的改变超过了仪器的分辨力，造成分类不全甚至不能分类。

综上所述，脂血会对血细胞检测的Hb及相关参数、白细胞计数及分类有影响，极大影响检测结果的准确性，当我们日常工作中遇到Hb,MCH和MCHC等异常升高且与RBC结果不匹配的情况即RBC×30=HB,HB×0.3=HCT时要注意是否受到脂血的影响，或全血静置后血浆部分呈现乳白色浑浊，均应高度怀疑为“脂血”标本[5]。HB校正，可以利用马骥等[3，6，11]提供的公式进行校正，也可离心后测血浆中HB然后进行换算[13]，或者用稀释液置换血浆的方法进行校正[1-2，7-8]，同时对MCH和MCHC进行校正[6，12]。估算结果只能是和真实结果相近，可以给临床报告修正后HB的结果作为参考，而WBC的结果则需要手工方法对分类和计数进行校正，注明“标本脂血”以便临床对患者情况做出准确的判断。