鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)的田间试验

周震祥，张俊平，何锡忠，李春华，杨惠萍，蒋凤英，倪建平

(上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海201106)

鸽副黏病毒Ⅰ型病(又称鸽瘟、鸽新城疫)是由鸽副黏病毒I型(Pigeon paramyxovirus type I，PPMV-I)感染引起的鸽的一种急性传染病，主要临床症状为肠炎、下痢和神经症状,传播迅速，发病率和死亡率高[1-3]。近年来，国内部分地区鸽群呈暴发流行，给我国养鸽业造成了巨大损失。疫苗接种是预防鸽副黏病毒Ⅰ型病的有效方法，目前市场仅有进口的鸽瘟疫苗，且价格昂贵，国内大部分鸽场采用鸡新城疫疫苗免疫，虽能起到一定的预防作用，但免疫效果不理想，使该病仍时有发生[4-6]，因此研制鸽副黏病毒Ⅰ型病疫苗意义重大。本研究在进行鸽副黏病毒Ⅰ型S-1株的分离与鉴定、生物特性鉴定、疫苗试制、免疫效力试验[7-11]的基础上，用实验室制备的5批鸽副黏病毒灭活疫苗(S-1株)，在松江、青浦、嘉定等几个规模化养鸽场进行田间试验，以期验证该疫苗对鸽子的安全性和免疫效果。

1 材料与方法

1.1 材料

鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)，由上海佳牧生物制品有限公司试制，批号：20131018、20131108、20131122、20131206、20140107。鸽副黏病毒Ⅰ型(川沙株)，由上海市农业科学院畜牧兽医研究所分离、鉴定、保存，病毒含量为107.5ELD50/(0.1mL)。HI试验用抗原为鸡新城疫标准抗原，购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。HI试验用红细胞为1%红细胞，由采自健康青年鸡新鲜抗凝血按常规方法制备而成。

1.2 试验动物

30日龄抗体阴性幼龄鸽(HI抗体≤2)，120日龄抗体阴性青年鸽(HI抗体≤2)，180日龄抗体阴性种鸽(HI抗体≤2)由上海松江、青浦、嘉定等规模化养鸽场提供。

1.3 试验分组与免疫

分别在松江、青浦、嘉定等几个规模化养鸽场取30日龄抗体阴性幼龄鸽、120日龄抗体阴性青年鸽各3 000只，随机分为5组，600只/组；180日龄抗体阴性种鸽1 000只，随机分为5组，200只/组。各试验组鸽分别肌肉注射鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)20131018批、20131108批、20131122批、20131206批、20140107批，幼龄鸽0.25mL/只，青年鸽和种鸽0.5mL/只；另分别取30只相同日龄的幼龄鸽、青年鸽和种鸽作为空白对照组，不免疫任何疫苗。各组试验鸽在相同条件下隔离饲养。

1.4 抗体检测

分别于免疫后0d、14d、28d、60d、90d、120d、150d、180d每组随机抽取10只采血测定HI抗体。

1.5 攻毒保护

各年龄试验鸽挑选2组在免疫后30d、90d、180d进行攻毒保护试验，每组随机抽取10只肌肉注射鸽副黏病毒Ⅰ型强毒株(川沙株)，攻毒剂量为105.5ELD50/只，攻毒后观察14d，统计试验鸽发病率/死亡率。

2 结果与分析

2.1 鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)对幼龄鸽免疫效果

用实验室试制的5批鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)免疫30日龄抗体阴性幼龄鸽，试验期内未见任何不良反应。免疫后14d抗体水平逐渐升高，于28—60d达到高峰，最高的抗体水平可达到26.3，之后抗体水平逐渐下降，免疫后180d抗体水平保持在25.0左右，高滴度抗体水平可维持6个月以上。具体抗体水平测定情况见表1。

表1 30日龄幼龄鸽免疫后平均抗体水平(log2)

挑选2组在免疫后30d、90d、180d进行攻毒保护试验，结果表明免疫后30d、90d、180d 攻毒保护率均在90%以上。具体攻毒保护情况见表2。

表2 30日龄幼龄鸽免疫后的攻毒保护率

Table 2 The protective rate of 30-day-old pigeons immunized with pigeon paramyxovirus type 1 inactivated vaccine(S-1 strain)against pigeon paramyxovirus type 1 virulent chuansha strain%

2.2 鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)对青年鸽的免疫效果

用实验室试制的5批鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)免疫120日龄抗体阴性青年鸽，试验期内未见任何不良反应。免疫后14d抗体水平逐渐升高，于28—60d达到高峰，最高的抗体水平可达到28.7，之后抗体水平逐渐下降，免疫后180d抗体水平保持在25.2左右，高滴度抗体水平可维持6个月以上。具体抗体水平测定情况见表3。

表3 120日龄青年鸽免疫后抗体水平

挑选2组在免疫后30d、90d、180d进行攻毒保护试验，结果表明免疫后30d、90d、180d攻毒保护率均在90%以上。具体攻毒保护情况见表4。

表4 120日龄青年鸽免疫后的攻毒保护率

Table 4 The protective rate of 120-day-old pigeons immunized with pigeon paramyxovirus type 1 inactivated vaccine(S-1 strain)against pigeon paramyxovirus type 1 virulent chuansha strain%

2.3 鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)对种鸽的免疫效果

用实验室试制的5批鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)免疫180日龄种鸽，试验期内未见任何不良反应。免疫后14d抗体水平逐渐升高，于60d达到高峰，最高的抗体水平可达到210.4，之后抗体水平逐渐下降，免疫后180d抗体水平保持在27.2左右，高滴度抗体水平可维持6个月以上。具体抗体水平测定情况见表5。

表5 180日龄种鸽免疫后抗体水平

挑选2组在免疫后30d、90d、180d进行攻毒保护试验，结果表明免疫后30d、90d、180d攻毒保护率均为100%，具体攻毒保护情况见表6。

表6 180日龄种鸽免疫后的攻毒保护率

Table 6 The protective rate of 180-day-old pigeons immunized with pigeon paramyxovirus type 1 inactivated vaccine(S-1 strain)against pigeon paramyxovirus type 1 virulent chuansha strain%

3 结论

3.1 幼龄鸽及青年鸽免疫前抗体水平普遍较低，种鸽免疫前抗体水平普遍较高，免疫后14d抗体水平逐渐升高，于28—60d达到峰值，幼龄鸽、青年鸽、种鸽的最高抗体水平分别达26.3、28.7、210.4，之后抗体水平逐渐下降，幼龄鸽、青年鸽、种鸽180d抗体水平分别保持在25.0、25.2、27.2左右，高滴度抗体水平可维持6个月以上。

3.2 5批鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)实验室制品免疫抗体阴性鸽，免疫后30、90、180d攻毒保护率均可达到90%以上。

3.3 试验结果证明，应用鸽副黏病毒油乳剂灭活疫苗(S-1株)对控制鸽副黏病毒Ⅰ型病安全有效。