湖北荆州地区高危型HPV感染状况及流行病学特征研究

訚璠，李滔，唐全，彭长华，欧阳耀灵，李承彬，汤璇

(湖北省荆州市中心医院检验医学部，湖北 荆州 434020)

0 引言

按照人乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)与恶性肿瘤发生相关性分为低危型HPV(low risk HPV, LRHPV)(如HPV6和HPV11等)和高危型HPV(high risk HPV, HRHPV)(例如HPV16和HPV18等)[1].LRHPV感染易导致低度鳞状上皮内病变与良性生殖器疣[2].HRHPV的慢性持续感染是宫颈鳞状上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)和宫颈癌的主要原因[3].大量研究表明，HPV感染是诱发宫颈癌变的至关因素之一，大部分宫颈癌患者身上能检测出HPV DNA[4]，且持续的HPV感染更易造成宫颈癌的发生[5].因此，防治HRHPV的感染是预防女性宫颈癌的重要途径之一.国际癌症研究所(IRAC)对全球浸润性宫颈癌中人乳头瘤病毒的类型进行了一项Meta分析，结果发现不同地区与人群存在不同的HPV优势型别，如除亚洲地区外的所有地区中HPV16(46%～63%)、HPV18(10%～14%)、HPV45(2%～8%)、HPV31(2%～7%)和HPV35(3%～5%)为主要类型，其中HPV58(6%)与HPV52(4%)的识别频率更高[6].湖北省地处长江中游，洞庭湖以北，地理位置比较独特，尤其是荆州作为三国古都，地处江汉平原的腹地，人口密度大，同时其医疗水平较低，看病并不容易，因此进一步探究多型别HRHPV在荆州地区女性中流行特点及年龄分别特征，具有重要意义.故本研究通过荧光PCR方法对本地区女性进行HRHPV基因分型检测，探索本地区女性HRHPV的流行病学特征，为荆州女性HRHPV的防治及HPV预防性疫苗接种在荆州本地的效用监测提供流行病学依据，现将结果报道如下.

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2018年1月至2018年8月期间至荆州市中心医院首次筛查HRHPV分型的女性3 677例，年龄18～87岁，平均年龄(41.57±9.59)岁.以10岁为一个年龄段，20岁以下受检者3人纳入≤29组，80岁以上者1人纳入≥70组.使用专用的宫颈取样刷取受检对象宫颈脱落细胞，置于无菌细胞保存液中密闭保存，立即送检.

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 高危型人乳头瘤病毒分型核酸测定(荧光PCR法)试剂盒由上海之江生物科技股份有限公司提供，可对15种HRHPV(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68和HPV82)进行基因分型检测.用ABI 7500荧光定量PCR仪(美国应用生物公司生产)进行PCR扩增、荧光监测与结果判读.

1.2.2 检测方法 严格按照高危型人乳头瘤病毒分型核酸测定(荧光PCR法)试剂盒说明书进行操作.

1.3 统计学处理应用SPSS 23.0软件对所有数据进行统计学分析，感染率以阳性率(%)表示.混合感染者各基因型感染率重复计算.两组样本相关性的比较采用四格表χ2检验；多组样本相关性的比较采用行列表资料χ2检验，以P<0.05为差异具有统计学意义.

2 结果

2.1 HRHPV总感染率与优势型别3 677例受检者HRHPV的总感染率为20.64%(759例).15种型别的HRHPV均被检出，感染率由高到低依次为HPV52(6.53%，240例)、HPV58(3.51%，129例)、HPV16(2.99%，110例)、HPV39(2.64%，97例)、HPV68(2.04%，75例)、HPV51(1.93%，71例)、HPV18(1.88%，69例)、HPV35(1.50%，55例)、HPV66(1.44%，53例)、HPV56(1.39%，51例)、HPV33(1.28%，47例)、HPV59(1.03%，38例)、HPV31(0.82%，30例)、HPV45(0.54%，20例)、HPV82(0.33%，12例).HRHPV在荆州地区女性中流行的优势型别依次为HPV52、HPV58、HPV16、HPV39、HPV68.

2.2 HRHPV感染模式单一型别感染率14.11%(519例)，双重感染率4.81%(177例)，三重感染率1.12%(41例)，四重感染率0.35%(13例)，五重感染率0.22%(8例)及九重感染率0.03%(1例)，HRHPV感染模式以单一型别为主.HPV52(30.44%，158例)、HPV16(13.29%，69例)与HPV39(10.01%，52例)是主要的单一感染型别，HRHPV检出型别与感染模式见表1.HPV58(37.08%，89例)、HPV52(34.17%，82例)与HPV68(27.08%，65例)是主要的多重感染型别.另一方面，HPV68与HPV82主要在多重感染中被检出.双重感染中HPV58+HPV68检出率最高(18.64%，33例)，HPV33+HPV35(8.47%，15例)次之.三重感染中HPV52+HPV58+HPV68检出率最高(17.07%，7例).

表1 HRHPV检出型别与感染模式

2.3 HRHPV感染率年龄特征

2.3.1 不同年龄段HRHPV感染率与感染型别 各年龄段HRHPV感染率如下：≤29岁年龄段HRHPV阳性率19.96%(92例/461例)；30～39岁18.10%(187例/1 033例)；40～49岁19.52%(287例/1 470例)；50～59岁24.92%(147例/590例)；60～69岁37.61%(41例/109例)；≥70岁35.71%(5例/14例).从各年龄群体感染比率来看，60～69岁女性HRHPV检出率最高，随后依次为≥70岁、50～59岁、≤29岁、40～49岁，30～39岁检出率最低.各年龄段间的HRHPV感染率比较有统计学差异(χ2=33.01，P<0.01)，说明各群体间由于个人生活方式的差异以及自身免疫力的特点所造成年龄群体间HRHPV感染的差异性.

2.3.2 不同年龄段HRHPV感染模式 HRHPV多重感染患者占阳性患者的31.62%.各年龄段HRHPV感染模式见表2，≤29岁年龄段、30～39岁年龄段、40～49岁年龄段的多重感染率要小于平均感染率，而50～59岁(χ2=2.86，P=0.09)、60～69岁(χ2=3.85，P=0.05)与≥70岁(χ2=1.84，P=0.17)三个年龄段的多重感染率高于总体比率，各年龄段间有统计学差异(χ2=12.30，P=0.03)，这说明年龄越大的群体越易发生多重HPV感染.

表2 不同年龄段HRHPV感染模式

3 讨论

HPV的感染概率、感染型别与模式特征具有地域性差异.关于女性HPV感染率，多省市统计结果显示疑似感染女性的HRHPV感染率为23.20%[7]，而湖北地区门诊女性阳性率为17.29%(1 557例/9 007例)[8].在本次调查分析中，荆州地区就诊女性HRHPV检出率(20.64%)略低于全国水平，高于湖北地区水平(χ2=19.69，P<0.01).关于湖北地区的HPV总感染率，徐万州等[9]调查发现湖北地区HPV感染率为21.23%(高于全球HPV的平均感染率为10.5%[10])，不同年龄群体间HPV感染率存在一定差异，具体表现为随年龄增加HPV感染率呈现降低趋势，且以单一型感染为主.此外，湖北省不同地区的HPV感染特点也存在一定的差异，如秦豫培等[11]通过收集湖北十堰地区87例食管鳞癌组织和50例对照组食管组织，实时荧光定量PCR法检测组织中 HPV16 感染率，结果发现HPV16感染与食管鳞癌的发展之间显著相关，但其与食管鳞癌患者的临床病理特征之间关系不显著.魏英等[12]调查发现湖北十堰地区的女性HPV感染率比较居中，以单一高危感染为主，HPV52、16、58型为前三大常见感染亚型，且各年龄段HPV感染率构成比呈现“U”型走势.可见，湖北地区中HPV16在众多感染型别中占据着主要部分.李丽等[13]调查发现武汉地区A9型组HPV感染最易导致宫颈上皮内病变.汪明等[14]调查发现湖北地区的宫颈疾病患者HPV感染率较高且其分布具有一定特点.可见，湖北各地区HPV感染特点既存在共性也存在地区差异特点.

优势型别特点方面.荆州地区2002至2010年间HPV感染调查显示，HPV16与HPV18在女性中检出率为14.79%(138例/933例)[15].本研究中多型别检出率高于以往报道(χ2=32.57，P<0.01)，提示HPV16与HPV18型外的HRHPV型别感染检测不容忽视.15种HRHPV基因分型检测能显著提高检出率，有利于本地区HRHPV的流行监测与防控.荆州地区就诊女性HRHPV感染的优势型别为HPV52、HPV58、HPV16、HPV39与HPV68，与武汉地区优势型别(HPV16、HPV52、HPV58、HPV53与HPV18)略有差异[8]，以及与十堰地区的HPV感染型别[12]也存在一定的差异.HPV39和HPV68与本地区女性宫颈病变的相关性需要后续关注和研究.

感染模式特征方面.荆州本地门诊女性单一感染占14.11%(519例)，多重感染占6.53%(240例)，本地区多重感染比率高于前期文献报道(χ2=22.46，P<0.01).周漫等[8]报道的湖北地区HRHPV感染模式为单一型别感染占13.40%(1207例)，多重型别感染占3.89%(350例).另一方面，双重感染中HPV52+HPV68检出率最高，三重感染中HPV52+HPV58+HPV68检出率最高，HPV混合感染是否对特定型别具有一定的偏好性，需要后续扩大检测基数进一步分析.HRHPV的混合感染与恶性宫颈病变的关系尚存在争议.李松等[16]报道50岁以上CIN高分期(III-IV期)、鳞癌及淋巴结转移患者的HPV多重感染率更高.而在高爱华等[17]进行的宫颈癌患者HPV多重感染病原学特征分析显示不同分期、病理分型、组织分化以及淋巴结转移情况下，HPV的单一感染与多重感染间并无统计学差异.本地区HRHPV多重感染与宫颈癌疾病进展的相关性有待进一步研究.

年龄特点差异方面.国内多省市HRHPV感染分析显示女性HRHPV的感染一般存在两个峰值，不同地域峰值出现的年龄段略有差异[18-20].湖北武汉地区的两个峰值出现在30岁以下组和51～60岁组[8].但本次研究中HRHPV感染的峰值出现在60～69岁，年轻女性(≤29)的感染率甚至略低于总体感染率.综合荆州地区优势型别与年轻女性组未表现出高感染率的特征.这种差异可能源自地域性差异，HPV主要通过性活动进行传播[21].相比较于一线城市，荆州地区30岁以下人群比例较少且年轻人的性活跃度也比较低，所以年轻女性表现出较低的HRHPV感染率.

综上所述，HPV52与HPV58是荆州地区女性HRHPV感染主要优势型别，感染模式以单一型别感染多见.年龄与HRHPV的阳性率和多重感染正相关.