围产期孕妇B族链球菌和支原体共感染情况分析

郭淑丽， 罗先道， 贾海英， 杨丽玮， 黄国虹， 王昌敏

（1.新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心，新疆 乌鲁木齐 830001；2.乌鲁木齐市友谊医院心内三科，新疆 乌鲁木齐 830001）

B族链球菌（group BStreptococcus，GBS）为革兰阳性球菌，又称无乳链球菌，是一种条件致病菌，常寄居于阴道和直肠。GBS的荚膜多糖是其主要致病因子，还可产生某些细胞外物质，如溶血素、核酸酶、蛋白酶、神经氨酸酶和脂磷壁酸等，后2种物质可增强GBS的毒力和侵袭力[1-2]。美国有25%～40%的孕妇产道携带GBS，其中40%～70%在分娩过程中会传递给新生儿，若新生儿携带该菌，1%～3%会出现早期侵入性感染，5%会死亡[3-4]。生殖道支原体是一种重要的传播感染病原体，可导致生殖道疾病综合征，包括盆腔炎、尿道炎、宫颈炎或不良妊娠等，并可引起严重并发症。目前，已发现存在于泌尿生殖道的支原体有7种，其中有致病作用的主要为解脲支原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原体（Mycoplasma hominis，Mh），通过性接触传播或母婴垂直传播等方式，引发女性的阴道炎、输卵管炎、宫颈炎及子宫内膜炎等。近年来，女性泌尿生殖道的支原体感染呈现不断上升趋势，并且由于抗菌药物的不合理使用，耐药情况也呈逐年加重趋势[5]。本研究对围产期孕妇GBS及Uu的感染情况进行分析，以期为临床抗感染治疗提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2017年12月—2018年8月新疆维吾尔自治区人民医院孕35～37周常规产检孕妇894例，年龄（30.54±5.26）岁。纳入标准：单胎宫内妊娠，经B超证实胎儿存活。排除标准：多胎妊娠者、免疫缺陷者、精神病患者、不愿意合作者。所有研究对象均自愿加入本研究，并签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂

GBS培养分析系统及配套试剂、DL-96细菌测定系统、DL96-STREP链球菌鉴定药物敏感性试剂盒均购自珠海迪尔生物工程公司，激光解析电离飞行时间质谱仪和配套试剂购自法国生物梅里埃公司；支原体采用分离固体培养基和鉴定药物液体培养基（河北众爱生公司）进行培养。

1.3 方法

1.3.1 细菌、真菌鉴定和体外药物敏感性试验 用无菌拭子于研究对象阴道下段1/3处及肛门括约肌处取样，接种于血平板和麦康凯平板（法国生物梅里埃公司）及科玛嘉显色平板（郑州安图公司），同时进行肉汤增菌自动检测GBS，35～37 ℃培养18～24 h，挑取可疑菌落涂片行革兰染色，采用激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定细菌和真菌。制备2.0麦氏单位菌悬液进行药物敏感性试验。所有操作严格按照试剂说明书进行，结果判读根据2017年美国临床实验室标准化协会M100文件相关标准进行。

1.3.2 支原体鉴定和体外药物敏感性试验 用无菌拭子在固体培养基表面以曲线方式进行划种，再将拭子于液体培养基中转动并充分搅拌，制成菌悬液，接种到药物敏感性试验板，每孔滴加石蜡油后，35～37 ℃培养72 h观察生长情况。依据菌落生长情况，结合液体/微孔板培养颜色变化判断支原体（Uu、Mh）的鉴定结果和体外药物敏感性。所有操作均严格按照试剂说明书进行。

1.4 统计学方法

采用 SPSS 17.0软件进行统计分析。计量资料以±s表示，计数资料采用频数及率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原体构成情况

894例孕妇中，检出病原体感染者130例（14.54%），其中细菌感染者118例 （大肠埃希菌感染31例、GBS感染65例、阴道加德纳菌感染17例、金黄色葡萄球菌感染5例），真菌感染者32例，支原体感染者41例（均为Uu感染）；2种或2种以上病原体共感染者56例，其中GBS+Uu感染33例、阴道加德纳菌+真菌感染8例、GBS+阴道加德纳菌感染7例、GBS+真菌感染4例、大肠埃希菌+真菌感染2例、金黄色葡萄球菌+GBS感染1例、大肠埃希菌+真菌+Uu感染1例。细菌感染者最多（90.77%），细菌感染中以GBS感染为主（55.08%）（χ2=68.44，P＜0.0 5），混合感染中以G B S+U u为主（58.93%）（χ2=97.00，P＜0.05）。

2.2 GBS体外药物敏感性试验结果

65株GBS对利奈唑胺、青霉素、万古霉素、美罗培南、氨苄西林和头孢曲松的敏感率均为100.00%，检出对左氧氟沙星、四环素和克林霉素中介株，对左氧氟沙星、红霉素、四环素和克林霉素均耐药，其中对克林霉素的耐药率最高（86.15%）。见表1。

表1 65株GBS对10种抗菌药物的药物敏感性 株（%）

2.3 支原体体外药物敏感性试验结果

41株Uu对美满霉素、强力霉素、罗红霉素、交沙霉素和克拉霉素的敏感率均为100%，检出对环丙沙星、司帕沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、壮观霉素、左氧氟沙星和诺氟沙星中介株，对环丙沙星、司帕沙星、阿奇霉素、壮观霉素、左氧氟沙星和诺氟沙星均耐药，对环丙沙星的耐药率最高（92.68%），其次是氧氟沙星和诺氟沙星（均为87.80%）。见表2。

表2 41株Uu对12种抗菌药物的药物敏感性 株（%）

3 讨论

正常情况下，女性生殖道内存在乳酸杆菌、棒状杆菌、非溶血性链球菌及消化球菌等多种细菌，维持其内环境的自洁作用，并防御病原体入侵。当机体抵抗力降低或生殖道内微生态平衡被破坏时，可引起病原体大量繁殖、生殖道感染的发生[6]。妊娠是一个复杂且相互协调的过程，正常妊娠时，机体的免疫功能处于相对抑制状态[7-8]，并因激素水平的变化，为生殖道内病原体繁殖提供了有利环境。本研究中，围产期孕妇生殖道病原体检出率为14.54%，构成以细菌（尤其是GBS）、支原体和真菌为主，与蓝惠华等[9]报道的围产期孕妇病原体检出情况相近，且与该项研究中GBS为主要致病菌的结论一致，但他们提出孕妇阴道真菌感染或细菌性阴道病时GBS检出率会增加，而本研究中共感染的检出情况以GBS与Uu共感染为主。

围产期孕妇GBS筛查目前已成为多数地区的常规检查项目，且不同地区孕妇GBS带菌率也有所不同[10-11]，本研究中围产期孕妇GBS携带率为7.27%（65/894），与唐兴敏等[12]报道的6.24%相近。支原体作为一种原核型微生物，体积小、结构简单、无细胞壁、可自我复制。支原体属条件致病性病原微生物，当免疫失衡时可致上行感染，引起阴道炎、宫颈炎、盆腔炎等，孕妇感染可导致胎膜早破、稽留流产、早产、死胎等。目前，对人类有致病性且与生殖道感染相关的支原体主要有Mh和Uu，本研究中检出41株支原体均为Uu，且其中33例孕妇为Uu与GBS共感染，可能由GBS通过抑制乳杆菌生长，使阴道pH值增高引起[13]。本研究中GBS共检出65株，有45例孕妇为GBS与其他支原体、细菌、真菌共感染，表明医院围产期孕妇GBS感染具有特殊性，可能与地域、民族和用药习惯等不同相关，该结论还需进一步扩大样本量进行深入研究。

本研究中65株GBS对克林霉素的耐药率（86.15%）明显高于李娟等[14]报道的68.8%，对左氧氟沙星和四环素的耐药率分别为55.38%、46.15%。因支原体缺乏细胞壁，所以对以破坏细胞壁为主要作用机制的β-内酰胺类抗菌药物天然耐药，故临床上主要应用可以抑制微生物蛋白质合成的抗菌药物来治疗支原体感染。本研究中41株Uu对于环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星的耐药率均超过80%，高于相关报道[15]，提示该类药物不适用于新疆地区Uu感染的治疗，可选用长效四环素类药物强力霉素、美满霉素。由于新疆自治区人民医院GBS与Uu共感染多见，故使用抗菌药物时应分析利弊，尤其是四环素类、喹诺酮类药物。

综上所述，新疆自治区人民医院围产期孕妇生殖道病原体感染以GBS和Uu共感染为主，且GBS和Uu药物敏感性各有不同，临床应加以重视，在诊疗过程中综合考虑。另外，建议本地区医疗机构应不断加强女性健康卫生宣教工作，强化其对生殖道感染的认识，提高自我防护意识。