皮损组织Cx26 蛋白及信使RNA 表达与PV 患者PASI 评分的关联性

张雪娇 高丁 石卫华

寻常型银屑病（psoriasis vulgaris ，PV）为临床常见慢性炎症性皮肤病，临床表现为红色丘疹、银白色鳞屑，具有病程长，易复发等特点，约30%银屑病患者发病机制与遗传、免疫、感染及环境等因素相关[1-3]。目前，部分学者认为PV 发生、发展同细胞间信息传递异常有关。相关研究指出，Cx26蛋白为缝隙连接功能单位，主要作用于细胞间信息传递，Cx26 蛋白高表达可能与PV 发病相关，但PV 患者Cx26 蛋白水平是否与健康人群有别，临床研究较少[4-6]。基于此，本研究选取我院PV 患者60 例，旨在探究皮损组织Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达与其皮损面积和严重程度指数（psoriasis area and severity index ，PASI）评分的关联性。现报告如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

经本院伦理委员会审批通过，2018 年7 月—2019 年7 月选取本院PV 患者60 例作为研究组，其中女24 例，男36 例；年龄24 ～65 岁，平均（44.12±8.12）岁；另选同期健康体检者32例作为对照组，其中女14 例，男18 例；年龄25 ～67 岁，平均（43.78±7.89）岁。两组基线资料差异无统计学意义（P ＞0.05）。

1.2 选例标准

纳入标准：（1）研究组患者均符合PV 相关诊断标准[7]；（2）对照组均为体检健康者；（3）所有研究对象均知晓本研究，已签署同意书。排除标准：（1）脓疱型银屑病；（2）有精神疾病史者；（3）关节病型银屑病；（4）血液系统疾病患者；（5）合并其他肾脏疾病者；（6）免疫功能缺陷者。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 采用环钻孔器获取研究组皮损处组织及对照组正常皮肤组织，进行液氮速冻保存。

1.3.2 检测方法 采用免疫荧光染色法和B203LED 型光学显微镜（重庆奥特光学仪器有限公司）检测皮损组织Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平，所用免疫组化试剂盒、DAB 显色试剂盒、基因组扩增试剂盒均购自美国Sigma 公司，由相同检验科高年资医师严格依照仪器、试剂盒说明书完成操作规程。

1.4 观察指标

（1）比较两组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平。（2）比较研究组不同病情程度之间（轻度、中度、重度）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平。病情程度根据PASI 评分分级，重度≥30 分、中度15 ～29 分、轻度＜15 分[8]。PASI 评分=皮损面积×[0.1×（Dh+Ih+Eh）+0.2×（Du+Iu+Eu）+0.3×（Dl+Il+El）+0.4×（Dt+It+Et）]，E：红斑，I：浸润，D：鳞屑，h：头（包括颈），u：上肢，t：下肢，l：躯干。皮疹部位均为5 个等级：0 ～4分。皮损面积为0 ～6 分，总分0 ～72 分，得分越高，皮损越严重。（3）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平与PASI 评分的关联性。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 两组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较

研究组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平均高于对照组（P＜0.05），见表1。

2.2 研究组不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较

研究组轻度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平低于重度（P＜0.05），见表2。

2.3 Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平与PASI 评分的关联性分析

经Pearson 分析可知，PASI 评分与Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平存在明显正相关关系（r1=0.625，P1=0.004；r2=0.541，P2=0.012）。

3 讨论

Cx 蛋白为细胞缝隙连接基本功能单位，细胞之间通过缝隙连接进行物质、信息及能量传递交换，Cx 蛋白水平可直接影响细胞增殖、分化、新陈代谢[9-10]。相关研究指出，Cx26 可调节细胞间信息传递及分化，于机体毛囊外毛根鞘及内耳呈现高表达，Cx26异常突变与皮肤损伤、耳聋密切相关[11-12]。本研究结果显示，研究组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平均高于对照组，提示PV患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平呈异常高表达状态。相关研究指出，PASI 评分系统对评估银屑病患者病情严重程度及预后具有重要临床意义，评分越高皮损越严重[13]。本研究结果发现，研究组轻度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平低于重度，可见，随着银屑病患者PASI 评分升高，Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平逐渐升高；进一步经Spearman 分析可知，PASI 评分与Cx26蛋白含量及信使RNA 表达水平存在明显正相关关系。可见，Cx26蛋白含量及信使RNA 表达水平与PASI 评分关系密切，动态监测Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平有助于判断银屑病患者病情进展及严重程度。

表1 两组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较（）

表1 两组Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较（）

组别 例数 Cx26 蛋白含量 Cx26 信使RNA研究组 60 0.60±0.04 1.76±0.09对照组 32 0.38±0.03 1.48±0.06 t 值 - 29.752 17.824 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

表2 研究组不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较（）

表2 研究组不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平比较（）

注：a 表示与中度比较，P ＜0.05；b 表示与重度比较，P ＜0.05

病情程度 例数 Cx26 蛋白含量（bp） Cx26 信使RNA（ng/mL）轻度 20 0.48±0.02a 1.56±0.08a中度 26 0.59±0.04b 1.78±0.09b重度 14 0.72±0.05 1.94±0.11 F 值 - 169.432 73.922 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

综上所述，PV 患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表达水平与PASI 评分密切相关，可作为评判疾病进展、预后的指标，为临床治疗提供指导依据。