芪苓水煎剂对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的显微结构影响

黄丽娜 龙海市动物疫病预防控制中心 福建漳州 363100

肝脏在代谢、物质转化与合成、排泄等方面均起着重要的作用，是动物体内最大的代谢器官[1]。本课题前期研究结果表明，“芪苓散”超微粉可一定程度上提高河田鸡的抗氧化性能、免疫功能，降低血脂水平。马绍伟等[2]、孙铭君等[3]将中药芪苓制剂应用于仔猪、河田鸡养殖生产，通过养殖场观察以及实验室研究，表明芪苓制剂在增强动物机体的抗氧化性能、免疫功能、生产性能等方面呈现良好效果。刘英等[4]研究总结发现保护肝脏在预防和治疗动物疾病方面是十分必要的。本论文主要研究在肝毒物质四氯化碳的影响下，中药芪苓水煎剂是否对试验小鼠肝脏细胞形态学方面产生保护作用及保护的程度，旨在探讨中药芪苓制剂对动物的保肝作用机制，为芪苓制剂在畜禽生产及兽医临床上的应用提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 主要药剂及仪器 中药芪苓水煎剂的主要组成：黄芪、白术、防风、党参、茯苓等。主要试剂与仪器：四氯化碳（CCl4）、10%福尔马林、苏木精染液、1%伊红染液、1%盐酸酒精等；Leica双目显微镜、DM2000显微照相系统（Leica公司）、LeicaRM2135显微切片机、载玻片及其他玻璃器皿等。

1.1.2 试验动物及分组 试验小鼠昆明系若干只，体重18～22 g，按试验设计分为3组，每组10只。A组为空白对照组；B组为阳性对照组；C组为芪苓水煎剂组。各组隔离饲养，每日定时供给日粮和干净饮水。

1.2 方法

1.2.1 配制0.3%CCl4石蜡油 将300μLCCl4加入100mL石蜡油中，混合均匀。

1.2.2 制备芪苓水煎剂 称取中药芪苓方剂300 g，先加水1 800mL，煎煮40min，纱布过滤，再在滤渣中加水1 200 mL，重复上述煎煮过滤步骤，最后合并两次滤液并浓缩至120 mL。

1.2.3 参试动物的用药 A组和B组生理盐水灌胃，C组小鼠芪苓水煎剂灌胃（0.2 mL/20 g），每日1次，共7次。7 d后，B组和C组按0.2mL/20 g灌胃0.3%CCl4石蜡油，1次/3 d，连用3次。在CCl4灌服期间，仍然按芪苓水煎剂原剂量对C组给药。

1.2.4 病理采样、光镜制样及观察 在最后一次造模16 h后处死参试小鼠和按病理学要求采样。剖检取每组小鼠肝脏的同一部位置10%福尔马林固定，再进行石蜡包埋切片，HE染色，光镜下(200×)观察和拍照。

2 结 果

空白对照组小鼠的肝细胞排列致密、均一，形状规则，细胞核较大、圆形（见图1）。阳性对照组小鼠肝细胞明显肿胀、脂肪变性，细胞核消失，有的固缩而深染，形状不规则（见图2）。芪苓水煎剂组小鼠大多数肝细胞结构保留完整状态，小静脉附近的肝细胞有一定程度的变性和坏死（见图3）。

3 讨 论

四氯化碳模型组小鼠肝组织显微结构变化特点是坏死灶区域明显大于芪苓水煎剂组，而芪苓水煎剂试验组小鼠肝脏组织虽然有变质性变化，但限制在肝小叶周边较为狭小的区域，大多数肝组织结构病变明显轻于四氯化碳阳性对照组。由此可说明芪苓水煎剂可缓解四氯化碳所致急性肝损伤的病理组织学变化，显示出了一定的抗肝损伤作用，这可能是由于芪苓水煎剂通过中药含有的多种成分协同作用而表现为多种功效的集合。因此，芪苓水煎剂可能通过影响自由基的形成及抗氧化反应，稳定肝细胞膜，从而降低膜的通透性，减少肝细胞坏死，使肝细胞变性和坏死等病理变化减轻等可能机理而保护肝脏。

图2 阳性对照组小鼠肝组织

图3 芪苓水煎剂组小鼠肝组织