广东省人类精子库捐精志愿者TORCH检测结果分析

钟恺欣 张欣宗 叶桂芳 伍欣 林维新 钱洁友 王奇玲

TORCH是可引起宫内感染而导致新生儿畸形或发育异常的一组病原体的英文名称缩写，其中T(Toxoplasma，TOX)是弓形虫，O(Other)是其它病原体，R(Rubella virus，RV)是风疹病毒，C(Cytomegalovirus，CMV)是巨细胞病毒，H(Herpes simplex virus，HSV)是单纯疱疹病毒[1]。孕妇感染TORCH后，病原体可通过胎盘及产道进入胎儿身体，引起宫内感染和新生儿感染，严重时可导致流产、早产、死胎、胎儿畸形及胎儿发育障碍等各种结果[2]。人体感染TORCH后能产生特异性抗体，IgM抗体阳性提示机体近期感染，而IgG抗体阳性是既往感染的标志，表明机体有一定免疫力，传播感染的风险较小。因此，为做好优生优育工作，降低新生儿的出生缺陷率，提高人口素质，TORCH的检测十分必要。TORCH相关病原体可通过多种方式传播，如飞沫传播、接触传播等[3]，在临床实践中，男性也会感染TORCH。按照《人类精子库基本标准和技术规范》中的健康检查标准，人类精子库必须对捐精志愿者进行TORCH检测。现对广东省人类精子库2 808例捐精志愿者的TORCH检测结果进行回顾性分析。

对象与方法

一、研究对象

研究对象来源于2016年1月至2018年6月在广东省人类精子库接受捐精筛查的2 808例捐精志愿者。入选标准是精液筛查结果达到人类精子库捐精标准，后抽血进行传染病、性传播性疾病、优生四项和遗传性疾病等检测。本研究通过医院伦理委员会审查后开展。

二、方法

1.TORCH检测方法：采集志愿者静脉血5 ml，3000 r/min离心10 min，取血清；未及时检测的标本置-20℃保存。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TORCH相应特异性抗体IgM。

2.仪器和试剂：所用仪器为TECAN全自动酶标仪；试剂由亚特斯生物医学技术(无锡)有限公司生产，实验步骤均严格按照说明书进行操作。

3.志愿者TORCH筛查方案：根据人类精子库采集部门相关SOP，如果捐精志愿者初次TORCH检查结果异常，则根据以下原则进行处理： HSV-IgM抗体阳性的志愿者直接淘汰；其余三项阳性者在不用药干预的情况下，一个月后抽血复查。复查结果再次阳性者，一个月后还可再次复查。针对两次复查阳性的志愿者，我们会建议其去男科门诊咨询医师。复查结果阴性且其他结果正常者可合格捐精。

4.统计学分析：采用 SPSS 21.0 软件进行统计分析。TORCH感染情况计算阳性率，复查后转阴情况计算自然转阴率。率的比较采用卡方检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

结 果

18例HSV阳性志愿者直接淘汰，占比15.3%(18/118)；另有17例TORCH抗体阳性志愿者因G6PD缺乏、肝炎病毒或地中海贫血筛查等结果异常而淘汰，占比14.4%(17/118)；25例志愿者不愿回来复查，放弃捐精，占比21.2%(25/118)。其中55例志愿者(TOX 11例、RV 18例、CMV 23例、TOX和RV两项阳性3例)在规定时间内回来复查，另外有3例志愿者(TOX 1例、CMV 1例、TOX和CMV两项阳性1例)在初次抽血检测半年后回来复查。

一、志愿者初次TORCH感染情况

共2 808例志愿者抽血检测了TORCH IgM抗体，118例检测结果阳性，阳性率为4.2%。其中有16例两项同时阳性， TOX、RV、CMV、HSV的感染率分别为0.9%、1.3%、1.9%、0.6%。TORCH各病原体的感染情况见表1，RV、CMV感染率相对较高。

表1 筛选期2 808例志愿者TORCH感染情况Table 1 TORCH infection in 2808 volunteers in the screening period

二、志愿者复查TORCH感染情况

有58例初次TORCH抗体阳性的志愿者一个月后参加第一次复查，复查比例分别为TOX 61.5%、RV 58.3%、CMV 46.3%。志愿者第一次复查TORCH结果如表2所示。TOX、RV、CMV抗体的自然转阴率分别为50.0%、42.9%、20.0%。有16例志愿者第一次复查结果阳性后进行了第二次复查。结果如表2所示，TOX、RV、CMV抗体的转阴率分别为0、16.7%(1/6)、0。

经过两次复查后，总自然转阴率分别为TOX 50.0%、RV 47.6%、CMV 20.0%。最终有15例志愿者因TORCH阳性淘汰。

表2 初次检测抗体阳性后复查情况Table 2 Reexamination after initial antibody test

各项目第二次复查转阴率与第一次复查相比差异无统计学意义(P>0.05)。

讨 论

有研究报道TORCH多为隐性感染，感染时人体常无明显临床症状。但TORCH病原体可通过胎盘和产道传染给胎儿和新生儿，可能导致早产、流产、死胎、胎儿畸形、胎儿发育异常等多种不良妊娠结局[4,5]。母亲孕期感染TORCH后有幸存活下来的新生儿，也常出现生长发育迟缓、神经缺陷、先天性心脏病、视力、听力障碍、智力发育不全及疱疹等疾病[6]。TORCH四种常见病原体均可寄宿于孕妇体内，通过干扰细胞遗传物质的稳定性产生致畸效果[7]。妊娠期妇女由于内分泌改变和免疫功能减弱，容易受到病原体感染。另外，对于曾经感染过TORCH的孕妇来说，其体内潜伏的病毒更容易被激活而导致复发感染[8]。CMV可通过各种途径传播，在包括精液等多种体液中可检测到病原体[3]。有研究报道，TORCH感染会使男性患者精液质量下降以及损伤精子DNA的完整性[9-11]。TORCH检测是优生优育的重要检测项目之一，在降低胎儿感染率和出生缺陷率等方面具有重要意义[2]。因各地区的经济、文化和生活环境不同，TORCH感染率存在地区差异，文献报道成都地区感染率为12.02%[12]，包头地区为5.38%[13]，天津地区为5.84%[14]。作为供精辅助生殖技术精源的提供者，人类精子库常规对志愿者进行TORCH筛查。广东省人类精子库捐精志愿者TORCH感染率为4.2%，与江西省人类精子库报道的3.9%相近[15]。

随着辅助生殖技术的不断发展，临床对供精精液的需求不断增加，但近年不少报道显示人类精子库捐精志愿者合格率逐渐降低，志愿者招募困难，出现了供精精液供不应求的局面[16-17]。湖南省人类精子库志愿者精液筛查合格率仅为21.3%[18]。捐精志愿者精液、血液各项检查均须达到规定标准才能合格捐精。张欣宗等[19]研究结果显示，广东省人类精子库精液质量筛查合格的志愿者占所有志愿者的32.1%，而本研究结果显示TORCH感染占精液质量筛查合格志愿者的4.2%，对于仅TOX、RV、CMV等一过性感染的志愿者，在抗体转阴后可捐精。

本研究对广东省人类精子库捐精志愿者TORCH IgM抗体检测结果进行分析，结果显示经两次复查后TOX、RV、CMV分别有50.0%、47.6%、20.0%自然转阴，总转阴率为37.1%，考虑可能为本研究复查人数较少，比刘善忠[20]报道的9.8%高。有研究表明，对TOX感染的病人使用乙酰螺旋霉素，RV感染使用病毒灵，CMV感染使用更昔洛韦治疗后，复查TORCH IgM抗体总转阴率有98.9%[20]，甚至可达100%[21]。用药治疗一疗程为7-14d，停药两周后复查，与本精子库现行复查方案相比，复查间隔时间为一个月，两种方案所需时间一样，但用药治疗的抗体转阴率比自然转阴率高很多。由此看出，对TORCH感染的患者进行抗病毒治疗，可起到很好的效果。

综上所述，建议人类精子库可考虑对第一次复查TORCH IgM抗体阳性的捐精志愿者给予相应药物治疗，以提高捐精志愿者的合格率，减少志愿者流失。