茚虫威对柞蚕幼虫的毒性试验

赵世文 李喜升* 陈增良 董绪国 赵鸿宇 毛庆发

(1.辽宁省蚕业科学研究所，辽宁凤城 118100；2.敦化市蚕业工作站，吉林敦化 133710)

茚虫威通用名称：indoxacarb，商品名称：Avaunt(DuPont)、Steward(DuPont)、安打、全垒打、安美等，化学名称为(S)-N-[7-氯-2,3,4a，5-四氢-4a-(甲氧基羰基)]-4＇-(三氟甲氧基)苯氨基甲酸甲酯，是美国杜邦公司开发的新型噁二嗪类(oxadiazine)低毒杀虫剂。主要是阻断害虫神经细胞中的钠离子通道，使神经细胞丧失功能，导致靶标害虫麻痹、协调差，最终死亡。药剂通过触杀和摄食进入虫体，0～4 h内昆虫即停止取食，因麻痹、协调能力下降，故从作物上落下，一般在药后4～48 h内麻痹致死，对各龄期幼虫都有效。害虫从接触到药液或食用含有药液的叶片到其死亡会有一段时间，但害虫此时已停止对作物取食，即使此时害虫不死，对作物叶片或花蕾也没有损害作用。茚虫威具有较好的亲脂性，仅具有触杀和胃毒作用，虽没有内吸活性，但具有较好的耐雨水冲刷性能。对鱼类、哺乳动物、天敌昆虫及螨类安全，因此是可用于害虫的综合防治和抗性治理的理想药剂[1]。

茚虫威于2000年10月在美国获得登记，2001年在我国首先取得登记，2011年专利到期后，我国登记茚虫威的企业和产品数量快速增长。2011年销售额为1.65亿美元，占杜邦公司杀虫剂销售第二位。由于杀虫机理独特，其对甜菜夜蛾、小菜蛾、棉铃虫、菜青虫、稻纵卷叶螟等多种鳞翅目抗性害虫和大龄幼虫防效较好，也可以防治茶小绿叶蝉等[2]。

随着茚虫威销量的的增加，蚕区周边使用面积增大、频率增高。为进一步掌握茚虫威对柞蚕的毒性特点，是否适合蚕区使用以及对柞蚕生产有什么样的影响，我们于2019年8月采用喷施法测定茚虫威对柞蚕的毒性及安全性，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 供试材料及场地

供试柞蚕品种：抗大×辽蚕582(秋期3龄第3 天柞蚕幼虫)，辽宁省蚕业科学研究所提供。

试验地点： 辽宁省蚕业科学研究所四台子研发基地试验柞园。

供试树种： 4年生辽东栎(QuercusliaotungensisKoidz)。

供试药剂：茚虫威乳油，含量150 g/L(美国杜邦公司)

药械：背负式喷雾器、试验量具等。

1.2 试验方法

1.2.1 触杀与胃毒毒性试验(喷施法)

150 g/L茚虫威乳油用水稀释，质量浓度为30 mg/L、15 mg/L、7.5 mg/L、3.75 mg/L、1.875 mg/L、0.937 5 mg/L、0.468 75 mg/L，另设清水对照。供试柞蚕为秋期3龄第3天的柞蚕幼虫，挑选龄期相同，个体大小一致的3龄第2天的柞蚕幼虫布于试验柞树(4年生辽东栎)上，待试蚕完全上树取食后进行药剂试验。每个浓度3次重复，每个重复50头试蚕，对照4次重复，每个重复50头试蚕。试验区需进行清理，无杂草和枯枝落叶等，以备有蚕掉地的时候能迅速发现。各试验区要间隔2 m以上，防止药液漂移影响试验结果。喷药和喷水时，试蚕和树叶要全部喷到,以叶面布满雾滴为度。随时调查并记录试蚕中毒及死亡情况[3]。

1.2.2 熏蒸毒性试验

将150 g/L茚虫威乳油稀释成500倍、1 000倍、2 000倍液，以清水为对照。分别取配置好的各浓度药液10 mL，均匀滴在10 cm半径的滤纸上，把滤纸平置于容量为100 L(高110 cm、直径55 cm)的塑料桶底部，桶口用3根1 cm宽木条做隔板，隔板上放置一个150cm×75cm的纱网袋，纱网袋内放入带枝叶的柞树条，每个纱网袋内放入30头3龄第3天的柞蚕幼虫进行熏蒸试验，随时补充新鲜柞叶，每个处理重复3次。塑料桶放置于阴凉通风柞树下，熏蒸24 h后取出，调查死亡蚕数，熏蒸期间随时补充新鲜柞叶；调查后再把剩余试蚕放入纱网袋内置于原塑料桶上，喂食新鲜柞叶，继续下一个24 h熏蒸试验，连续调查72 h，然后把剩余试蚕转移柞园内标记饲养。

1.2.3 残毒期试验

把茚虫威稀释质量浓度为30 mg/L、15 mg/L、7.5 mg/L、3.75 mg/L的药液,另设清水对照,每个处理区喷20墩柞树。用标签做好标记，各处理小区间隔2 m以上，防止药液漂移影响试验结果。喷药时浓度从低浓度往高浓度梯度喷施，以叶面布满雾滴为度，喷施前把柞树下杂草落叶清理干净。施药后5 d、10 d、15 d、20 d、30 d分5个批次布置试蚕，调查试蚕中毒情况。

采用SPSS统计软件中的Probit模块(概率单位回归)进行线性分析，统计分析茚虫威对3龄柞蚕幼虫的毒力测定数据[3]。

2 结果与分析

2.1 茚虫威对柞蚕幼虫的触杀与胃毒毒力试验

茚虫威喷施试蚕后，开始试蚕无明显反应，4 h后试蚕停止取食，把握力下降，陆续出现试蚕掉地现象；12 h后试蚕表现出吐液、蚕体收缩等症状；24 h后试蚕陆续死亡；48 h后中高浓度处理试蚕死亡率100%(见表1)。7.5 mg/L质量浓度茚虫威药液处理区48 h后试蚕全部死亡；1.875 mg/L质量浓度茚虫威药液处理区48 h后试蚕死亡率接近80%。茚虫威与敌敌畏比较[2]，中毒反应较慢，死亡时间较长，这与茚虫威独特的作用机理有关。

致死浓度毒力回归经过15次迭代到收敛并找到最优解；经过卡方检验，卡方值为14.208，Sig=0.014，由于显著性水平小于0.150，因此在置信限度的计算中使用异质因子。致死浓度毒力回归线[PROBIT(p)=a+bX]的截距a为0.528，其95%置信区间为(0.470,0.585)；坡度b为1.585，95%置信区间为(1.328,1.842)。回归方程为PROBIT(p)=0.528+1.585X，LC50为0.465(0.224～0.705)mg/L，LC95为5.069 mg/L，LC99为13.642 mg/L。参照农药对家蚕的毒性等级划分[4]，茚虫威对柞蚕幼虫的毒性等级为剧毒(LC50≤0.5 mg/L)。

表1 茚虫威对柞蚕幼虫的毒力

2.2 茚虫威对柞蚕幼虫的熏蒸毒性

茚虫威500倍、1 000倍、2 000倍液，分别熏蒸试蚕24 h后取出，未发现试蚕有中毒症状，继续放入新鲜柞叶饲养，重复到72 h后，仍未发现试蚕有中毒症状。将熏蒸72 h后的试蚕放于柞园内正常饲养至老眠起，未发现中毒症状及死亡蚕，生长发育与对照相似，未见异常。结茧率和茧蛹率与对照无差别。表明茚虫威在试验浓度下对试蚕无熏蒸毒性。

2.3 茚虫威对柞蚕幼虫的残毒期

质量浓度为30 mg/L、15 mg/L的茚虫威溶液喷施柞树20天后饲养试蚕，死亡率接近100%；30天后饲养试蚕，死亡率超过95%。质量浓度为7.5 mg/L、3.75 mg/L的茚虫威溶液喷施柞树20天后饲养试蚕，死亡率90%以上；30天后饲养试蚕，死亡率超过85%(见表2)。茚虫威试验最低浓度30天后的死亡率已经超过85%，表明茚虫威在柞树上的残毒期极长，可能超过柞蚕的生长期。

表2 不同浓度茚虫威对3龄柞蚕幼虫的残毒期

3 结论与讨论

本次试验测定的茚虫威对柞蚕幼虫的胃毒触杀毒性LC50为0.465 mg/L，属于剧毒级(LC50≤0.5 mg/L)，陈伟国等测定茚虫威对3龄起家蚕的LC50为0.360 4 mg/L[2]，说明茚虫威对柞蚕和家蚕的毒性相似，都属于剧毒级。熏蒸试验结果表明，茚虫威对柞蚕幼虫无熏蒸毒性。残毒期试验结果表明，茚虫威对柞蚕幼虫的残毒期极长，超过30 d。

茚虫威是一种安全、低风险、环境友好的杀虫剂，有很广的杀虫谱，可有效防治危害玉米、大豆、蔬菜、水果和棉花等作物的鳞翅目害虫及叶蝉、盲蝽、象甲科害虫等[5]。茚虫威有低毒高效的杀虫活性，该药在施用后，害虫即停止取食，对农作物的危害立即解除，农户喜用，使用面积逐年增加，施用农作物品种越来越多，对柞蚕的潜在危险也越来越大。茚虫威对柞蚕属于剧毒级，残效期极长，所以在柞园禁止使用。茚虫威对柞蚕幼虫无熏蒸毒性，柞园周围的果园、农作物等可以在无风天气施用，施用时严禁药液漂移到柞园柞树上[6]。