牛羊品种改良胚胎繁殖技术

齐勒盼·朱力地别克　阿布力孜

一、影响牛羊品种改良胚胎繁殖技术应用效果的因素

在牛羊品种改良胚胎繁殖技术的实际应用中，胚胎质量、操作手段，以及供体、受体同期发情性等因素，均会对牛羊品种改良效果产生影响。在冷冻存储、收集处理胚胎样品时，因为胚胎本身的生产方式存在差异性，使得不同胚胎发育潜能、胚胎质量难以保障。继而使得牛羊胚胎在移植后，不同母体其受胎率区别较大。所以为确保母牛、母羊可以正常受胎，相关人员应重视提供借助高质量牛羊胚胎，提高移植成功率。另外，胚胎在母体子宫内成长、发育的时候，母体子宫分泌、环境变化，以及供体、受体发情期是否同步，均会影响牛羊品种改良期间的胚胎繁殖情况。再者，牛羊品种改良胚胎繁殖技术在具体操作时，对人员技术要求较高。相关人员胚胎解冻、移植等操作的规范性与标准性，会直接影响胚胎移植的妊娠率，以及母体受胎率。

二、牛羊品种改良胚胎繁殖技术

在国家政策、资金的支持与引导中，新疆牛羊品种改良工作取得显著成效。而牛羊品种改良胚胎繁殖技术，在实践中，主要包括供体母牛、母羊，以及受体母牛、母羊的选择、同期发情的有效控制、供体母牛母羊排卵处理等工作，以及受胎成功的胚胎存储、回收、冷冻保存与胚胎质量检测、移植等内容。

1、有效处理同期发情

牛羊品种改良胚胎繁殖技术中，有效处理同期发情属于繁殖技术运用的基础性工作。具体措施如下。首先，供体、受体选择。在选择供体母牛、牛羊时，为确保其妊娠率、胚胎移植的成功率，应挑选年龄在2到6岁的经验性母羊及母牛。同时确保其品种的优良，从而肯定其育种价值，并且没有遗传、感染性疾病，遗传特征明显、性能稳定，身体较为壮硕，以及采食欲望强烈。而受体母牛与母羊的年龄应在2到5岁之间，保持着良好、稳定的发情周期，采食欲望同样强烈。没有生殖系统类的疾病，可以顺利完成生产任务，且生产经验丰富。

其次，健康检查。供受体选择完毕后，相关人员在实践牛羊品种改良胚胎繁殖技术前，应对其进行全面的身体检查，检测其健康指标。然后定期记录母羊、母牛发情时间，总结其发情规律。在正式移植胚胎前，为预防受体出现应激反应，应避免随意更改其饲养位置。

发情期信息记录完成后，可选择供体母牛母羊、受体母牛母羊完成同期发情处理工作。

最后，同期发情处理。在此期间，相关人员在临近排卵期、发情期后，借助P4、PGC、PMSG、LH等常用的外源性性激素，进行同期发情处理。上述外源性性激素中，由于PGC本身的溶解黄体能力较强，能够提高供体母牛母羊、受体母牛母羊同期发情率，且使用效果明显、性价比高，所以在牛羊胚胎繁殖技术运用中有着较强的实践优势。

2、供体的超排卵处理

供体的排卵处理时间，一般在母牛、母羊第一个发情周期内。相关人员在供体发情期内，选择合适时间，通过注射促性腺激素，促进供体卵巢的成长发育，提高其排卵数量。而供体的超排卵处理环节，在牛羊品种改良胚胎繁殖期间，有助于提高供体母牛或母羊的胚胎数量。据了解，规范且标准的供体的超排卵处理后，供体排卵时，可回收10～15枚胚胎。若是胚胎数量少，不仅会导致胚胎回收难度大，还会影响受体受精率。

3、胚胎样品采集

胚胎样品采集，主要集中在供体母牛、母羊在成功受精后的一周内进行。在此期间，相关人员会在母牛或母羊在保定架正常绑定后，利用少许的普鲁卡，对供体母牛、母羊的尾椎硬膜外腔区域进行麻醉处理，以便于减少供体不适感，确保胚胎收集的顺利。需要注意的是，保定架应按照前高后低的方式摆放，前后距离应保持在18厘米。正式收集胚胎前，相关人员需在供体后期肢体、外阴卫生消毒后，借助开张器慢慢将供体子宫扩张开，并同步清理供体子宫内部粘液。然后借助儿通管，冲洗供体子宫，同时使用消毒、清洁完毕的锥形瓶，将冲洗液收集。

4、胚胎质量检测

检测胚胎质量前，相关人员应在提前将锥形瓶内的冲洗液静置处理，在30分钟后，使用高精度的实体显微镜，查找冲洗溶液内存有的胚胎，并记录胚胎数量。然后将消过毒的习惯，将冲洗液吸取并移放至PBS保存滴液内。在冲洗溶液与滴液逐渐融合后，将其放置在200倍显微镜下分析滴液中的胚胎质量。之后结合现有的胚胎质量标准分级，将其划分为A、B、C、D 等四个等级，并将其分开存放，再选出优质胚胎，用于牛羊品种改良中的胚胎繁殖。

5、胚胎的冷冻保存

牛羊品种改良胚胎繁殖技术中，胚胎的保存方式主要为冷冻保存。直接冷冻、常规冷冻、玻璃化冷冻等都属于当前时期，牛羊胚胎的冷凍保存方式。在哺乳类动物胚胎保存中，常规冷冻应用较为广泛。相关人员可将选出的优质胚胎，及时放置在冷冻液中，在平衡放置一段时间后，根据每分钟0.5摄氏度速度，将试管温度调至零下35摄氏度，并迅速投入液氮罐保存。但选择此种冷冻方式时，还应将糖类、丙乙醇、乙二醇等常用防冻剂添加到胚胎中。

而直接冷冻法与常规冷冻法较为相同，其区别在于冷冻剂的选用，该冷冻方式，多选择乙二醇。除此之外，玻璃化冷冻法在实际运用中，是将提前收集的优质胚胎，静置在玻璃冷冻液之后，直接放置在液氮罐内保存。这一冷冻过程，可直接绕过胚胎的冰晶化时期，直接将液态胚胎调整至玻璃化状态。无需对胚胎进行缓慢降温处理，有助于简化胚胎冷冻环节，高效预防胚胎冷冻存储期间，出现损伤现象，影响牛羊胚胎的成功率。

6、胚胎的移植处理

移植胚胎时，应全面检查受体母牛身体状态，确保受体母牛、母羊卵泡直径在20 毫米左右。一般情况下，受体母牛、母羊在发情处理后的36 小时后，会逐渐产生排卵现象。另外，正式移植胚胎移植时，还应检查受体母牛黄体直径是否大于15 毫米，且凹凸感明显。然后使用已消毒习惯，分三次吸取PBS保存液中的胚胎，并将其输送至受体牛母牛或母羊的子宫内部，取出移植腔。

（作者单位：1.834600 新疆塔城地区额敏县喀拉也木勒镇畜牧兽医站;2.830001 新疆农业大学动物科技学院）