云芝多糖特征及其对运动耐力的影响*

王方雨

（宜春学院体育学院，江西 宜春 336000）

云芝（Coriolus versicolor）是多孔菌科（Polyporaceae）一种具有药用价值的真菌，多生长在枯木、倒木和腐木之上，由于其子实体无柄，菌盖呈半圆扇形，有灰、白、褐、蓝、紫等多种色彩并呈云纹状，酷似云朵而得名[1]。

市面上已有云芝肝泰冲剂、云芝菌胶囊等临床药物，用于慢性迁延性肝炎和调节免疫等综合性治疗中，具有清热解毒、消炎、预防机体氧化损伤等作用[2]。云芝的药理作用主要是云芝多糖，云芝多糖具有抗肿瘤、调节免疫力等功效，云芝多糖一般为含蛋白质的葡聚糖，是一种以单糖组成的同型多糖，其中的β-葡聚糖具有很强的生理活性，是增强免疫力的主要功效物质，具有抗细菌、抗病毒感染的能力，从而减轻运动训练时体能大量消耗对免疫细胞的伤害[3]。

云芝多糖具有抗氧化能力，可以清除大运动量训练后机体产生的过多自由基，过量自由基是人体细胞受损的主要原因之一，由于竞技比赛的需要，运动员一般都要通过高强度的训练来提升成绩，身体组织时常要处于无氧工作状态，产生大量的乳酸和过量自由基，出现过氧化现象，而云芝多糖则可以清除各种过量的自由基，从而减轻大运动量训练带给运动员身体上伤害、延长无氧运动时间，改善高强度运动训练带来的不良影响[4]。

通过对云芝多糖的性质特征进行研究，探讨云芝多糖对运动耐力的影响。

1 材料和仪器

1.1 材料和试剂

试验采用昆明种小鼠，购自广东省医学实验动物中心。购买时体重13 g～16 g，集中适应性饲养2周，控制小鼠体重在18 g～28 g。饲养方法为平均日饲料消耗量按5 g·100-1g-1、平均日饮水消耗量6 mL·100-1g-1～7 mL·100-1g-1；环境条件为温度（21±2）℃、相对湿度30%～70%、光照周期12 h/12 h。试验用主要试剂药品如表1所示。

表1 试验主要试剂Tab.1 Main test reagents

1.2 试验仪器

HH-80数显恒温水浴锅，常州市亿能试验仪器厂；BSA224S-CW电子分析天平，深圳市林涛仪器有限公司；X5型紫外可见分光光度计，上海元析仪器有限公司；自制带水泵水箱。

2 试验方法

云芝多糖是一种大分子化合物，含有蛋白质等其它物质。在发酵提取的工艺上，需要进行纯化分离去除杂质，湿度、pH和分离技术都会影响其得率[4]。

为了检验云芝多糖的提纯效果，也为了确定云芝多糖对运动健康的影响，对云芝多糖的化学稳定性、抑菌性等特征开展试验研究。

2.1 多糖室温稳定性试验

多糖室温稳定性试验取云芝多糖样品溶液，每30 min测定一次吸光度，连续测定4 h，观察云芝多糖样品溶液的室温化学稳定性，绘制稳定性曲线。

2.2 多糖对常见微生物的抑菌试验

配制15%、30%、45%、60%、75%、90%、100%浓度的云芝多糖精制样品溶液7份，将预先灭菌处理过的圆形滤纸片分别放入7种浓度的样品溶液中浸渍，另加1份蒸馏水的对照组共8份样品。

按不同浓度将浸渍过的滤纸依次摆放到带菌种的培养皿中，培养皿所带菌种为大肠杆菌（Escherichia coli）、圆褐固氮菌（Azotobacter chroococcum）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 等3种革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）、四联球菌（Micrococcus tetragenus） 等3种革兰氏阳性菌共6个试验菌种。放入恒温箱在（35±2）℃条件下培养24 h，观察抑菌圈的大小变化，测量最低抑菌浓度（morphology immunology cytogenetic，MIC）。

2.3 小鼠负重游泳试验

试验小鼠随机分成2组，每组20只。两组小鼠均按饲养条件正常喂养试验组每天使用浓度为50%的云芝多糖的溶液灌胃1次，灌胃剂量为2 g·kg-1体重，连续灌胃4周；对照组（CK）每天使用同等剂量的纯净水灌胃1次，连续4周。

在小鼠最后1次灌胃1 h后进行负重游泳试验，在小鼠尾部1/3处系2 g重铅皮，放置于水深30 cm、水温25℃的水箱中，开水泵使水向小鼠头部流动迫使小鼠游泳，用秒表记录小鼠放入水中后到头部沉入水不能上浮10 s后的时间，即为负重游泳时间。

3 试验结果

3.1 多糖室温稳定性试验

云芝多糖的室温稳定性试验结果见图1。

由图1所示，多糖稳定性曲线波动范围很小，云芝多糖样品在4 h内的吸光度变化不大，其化学性质相对稳定。

3.2 多糖对常见微生物的抑菌试验

云芝多糖对常见微生物的抑菌试验试验结果见表2。

表2 多糖对常见微生物的最小抑菌浓度Tab.2 MIC of polysaccharides to common microorganisms

由表2可以看出，云芝多糖对铜绿假单胞菌没有抑制效果，对其它几个菌种都有较好的抑菌效果。但对大肠杆菌和圆褐固氮菌等革兰氏阴性菌，其MIC应大于30%；而对枯草杆菌和四联球菌2种革兰氏阳性菌的抑制效果也需要MIC在30%以上才能显示出较好的抑制效果；但总体上云芝多糖对革兰氏阳性菌的抑制效果更好。

云芝多糖的抑菌作用机制分析，可能是由于多糖大分子具有较好的表面活性，能够促进有害细菌外细胞壁的溶解，破坏有害细菌的生存繁殖；而且试验结果显示其对多种细菌均会产生抑制效果，因此，云芝多糖的抑菌作用是广谱性的。

试验结果表明，革兰氏阴性菌和阳性菌与空白对照组比较，不同温度条件下加热后，仅有1项显示阳性，基本没有变化，表明云芝多糖在不同加热温度下也能保持良好的抑菌效果。

3.3 多糖对小鼠负重游泳时间的影响

负重游泳时间反应了机体的运动耐受力，负重游泳时间可以用于直观反应机体的抗疲劳效果。对2组小鼠分别进行负重游泳实验，试验结果如表3所示。

表3 多糖对小鼠负重游泳时间的影响Tab.3 Effect of polysaccharide on weight-bearing swimming time in mice

由表3可知，试验组小鼠负重游泳至力竭的时间较对照组（CK）组明显增加，具有非常显著性差异（P<0.05），说明云芝多糖对提高小鼠的游泳耐力有较好的效果。

4 结论

对云芝多糖的稳定性、安全性和运动耐力方面进行了研究。

稳定性和抑菌特性试验表明，云芝多糖的室温稳定性良好，对革兰氏阳性阴性菌的均具有抑菌效果，具有广谱的抑菌作用，在室温下不会发生变质等食品安全问题，是一种安全的人体多糖来源。

小鼠负重游泳试验表明，云芝多糖对运动耐力有提高小鼠的游泳耐力有较好的效果，具有一定的抗疲劳功效。

后期将对云芝多糖的抗氧化性开展试验，进一步研究其对运动能力的影响。