胰岛素样生长因子-Ⅰ及其受体在糖尿病足溃疡的表达及临床价值

王亭

（济宁市第一人民医院检验科，山东济宁 272000）

糖尿病患者常并发严重的足部溃疡，研究表明，约有15%的糖尿病患者可能会并发足部溃疡，而糖尿病足部溃疡的患者其死亡率高达29%[1-2]。临床上，导致糖尿病足的因素多种多样，目前有研究表明，胰岛素样生长因子-I(ICF-I)和伤口的愈合有密切的关系[3]。为进一步的研究ICF-I的表达和糖尿病足的关系，现该院以2018年6月—2019年6月为研究时段，开展深入探究，详细报道见下。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

经患者和患者家属同意以及医院伦理委员会的批准实施，选该院治疗的30例糖尿病足患者（A组），30例单纯糖尿病患者（B组）和30例非感染非糖尿病手术患者(C组)作为本次研究对象。A组患者年龄：57～78 岁，平均年龄（64.43±12.24）岁，病程在 4～12 年，平均病程(7.45±2.20)年，餐后 2 h 的血糖为（13.31±2.34）mmol/L；空腹血糖为（8.45±1.21）mmol/L；B 组患者的年龄为 50～78 岁，平均年龄（59.67±14.33）岁，病程在3～14年，平均病程(8.18±2.54)年;C组病患的年龄为 61～80 年，平均年龄（58.37±19.34）岁，病程在 4～13年，平均病程(7.17±2.92)年。上述患者进行一般资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。 纳入标准[4]：（1）确诊为2型糖尿病；（2）无严重脏器损伤。排除标准：（1）患者昏迷或存在精神障碍；（2）患者在90 d内有糖尿病并发症史；（3）严重的肾肝功能不全；（4）其他疾病导致的周围神经病变和血管病变；（5）不署知情协议书。

1.2 方法

获取足部组织标本：A组：在手术中或是清创换药时取病变交界处的皮肤组织；B组、C组：在手术中取切缘皮肤的全层组织，组织的厚度约为2.5 mm，大小取1 cm×1 cm。用10%的甲醛将所取标本固定2 d，脱水，包埋，最后制备为石蜡切片，厚度4 μm，至少2张，其中1张进行常规的HE染色，另1张进行ICF-I抗体的免疫化学染色。在400倍的显微镜下对3组标本进行观察。

1.3 组织ICF-I的表达强度依据组织免疫组化的染色深浅

棕褐色是3分，棕黄色是2分，淡黄色是1分，无色是0分。依据阳性细胞概率打分：细胞阳性概率，10%是 1分，11%～50%是2分，51%是3分，无阳性的细胞评分为0分。组织的表达强度可用染色强度乘以细胞阳性率表示：0～2 分是(-)，3～4 分是(+)，5～7 分是(++)，8～9分是(+++)。组织ICF-1阳性指数的测定方式：首先用低倍镜下选出ICF-I(+)细胞分布最密集的区域，之后在400倍镜下对5个视野中的阳性细胞和上皮细胞数计数，阳性指标可用（阳性细胞/上皮细胞）%来表示，由2人完成，计数采用双盲法，差异大于10%，便需要重新计数。

1.4 统计方法

使用SPSS 20.0统计学软件进行数据的统计分析，使用（±s）表示计量资料，使用[n(%)]表示计数资料。P＜0.05为差异有统计学意义。

2. 结果

2.1 组织IGF-ⅠRα的免疫组化

在IGF-ⅠRα的免疫组化染色中，上皮细胞的胞膜与胞浆内出现棕黄色颗粒则为阳性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纤维细胞与表皮细胞的胞膜上。

2.2 组织IGF-ⅠRβ的免疫组化

在IGF-ⅠRβ的免疫组化染色中，上皮细胞的胞膜与胞浆内出现棕黄色颗粒则为阳性。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒细胞、巨噬细胞和表皮细胞的胞膜上。

2.3 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的阳性指数

在三组皮肤标本检测中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的组织阳性指数存在统计学差异，B组较C组的表达减弱，A组较B组的表达则进一步减弱，差异有统计学意义（P＜0.05）。 详见表1。

表1 各组皮肤组织中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα阳性指数比较（±s）

表1 各组皮肤组织中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα阳性指数比较（±s）

组别IGF-Ⅰ Rα IGF-Ⅰ Rβ A 组（n=30）B 组（n=30）C 组（n=30）74.45±20.45 46.97±14.08 19.45±8.45 69.87±15.51 53.24±12.48 16.09±9.45

2.4 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的表达强度

在三组皮肤标本检测中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的表达强度存在统计学差异，B组较C组的表达减弱，A组较B组的表达则进一步减弱，差异有统计学意义（P＜0.05）。 详见表2。

表2 各组皮肤组织中IGF-ⅠRα和IGF-ⅡRβ表达强度比较

3 讨论

糖尿病足溃疡是一种严重的糖尿病并发症，导致慢性溃疡，最终引起截肢，影响患者的生活质量。由于糖尿病足的发病率较高，而且对患者的影响较大，所以更应引起人们对于该疾病的关注[5]。研究表明，ICFI和糖尿病足有一定的关系，ICF-I为一种由70个氨基酸共同组成的单链多肽，编码基因在12号染色体的短臂上，和胰岛素原具有高度同源性。ICF-I不仅可以能诱导多种细胞因子的表达，还能促进胶原、聚葡萄糖胺和纤粘连蛋白等胞外基质的分泌和合成，加速创面修复之后的组织改建，和糖尿病足部溃疡密切相关[6]。该次的研究表明，在IGF-Ⅰ Rβ和IGF-Ⅰ Rα的免疫组化染色中，上皮细胞的胞膜与胞浆内出现棕黄色颗粒则为阳性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纤维细胞与表皮细胞的胞膜上。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒细胞、巨噬细胞和表皮细胞的胞膜上。在三组皮肤标本检测中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的组织阳性指数以及表达强度均存在统计学差异，且B组较C组的表达减弱，A组较B组的表达则进一步减弱，差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，ICF-I的不足或是缺乏可能和糖尿病导致机体内皮细胞破坏有关，和糖尿病足部溃疡病人溃疡长期存在密切相关，建议在临床进行进一步研究。