一例犬耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的诊断

赵景利/辽宁省大连市长海县动物卫生监督所

刘华勇/辽宁省大连博爱动物医院

2018年7月，大连市某动物医院接诊皮肤病患犬一例，初诊为蠕形螨与细菌混合感染，用多拉菌素与头孢噻肟治疗一段时间后，皮肤仍不断出现脓疱，采集皮肤病料进行实验室检验，分离到一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），根据药敏试验结果采用磷霉素配合万古霉素治疗后治愈，对该犬的诊治过程报告如下。

一、发病情况及早期治疗

一只6月龄腊肠犬，皮肤多处可见数量不等的丘疹、红斑、脓疱，严重的部位伴有脱毛、液体渗出。初步诊断为蠕形螨和细菌混合感染。皮下注射多拉菌素，同时静脉滴注头孢噻肟，一周后皮肤红斑、丘疹有消退，但皮肤脓疱仍有蔓延。

二、实验室检验

1.样本采集与镜检。用无菌棉棒擦拭皮肤脓疱液及渗出液获取样本数份，首先将样本涂片，革兰氏染色镜检，可见G+球菌，散在或三两个聚集，镜检细菌种类单一。

2.细菌分离培养。将样本在含5%绵羊血的TSA上划线，37℃培养24h后，可见直径2mm左右、扁平、黄白色、边缘整齐的圆形菌落，菌落周围有β溶血环。菌株在血平板上的形态见图1。将分离培养的细菌涂片，革兰氏染色镜检，可见G+排列成葡萄状的球菌。根据细菌培养特征和形态特征疑似金黄色葡萄球菌。

3.细菌鉴定。将分离到的细菌在TSA上纯化一代，将纯化的细菌接种7.5%NaCl肉汤，37℃培养24h后肉汤呈均匀混浊。取商品化冻干兔血浆一支，用0.5mL灭菌生理盐水完全溶解，加入肉汤培养物0.3mL，混匀，37℃培养2h后兔血浆呈凝固状。根据7.5%NaCl肉汤生长特征和血浆凝固酶试验阳性初步鉴定为金黄色葡萄球菌。挑取18～24h培养的新鲜菌落用0.45%NaCl溶液配成0.5个麦氏单位的菌悬液，将菌悬液灌注到梅里埃VITEK2革兰氏阳性菌生化鉴定卡中，经梅里埃VITEK2全自动细菌鉴定系统鉴定为金黄色葡萄球菌。

4.药敏试验。先进行耐甲氧西林/苯唑西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）的测定：将纯化的金黄色葡萄球菌用灭菌生理盐水制成0.5个麦氏单位的菌悬液，用灭菌棉棒蘸取菌悬液涂布在含4%NaCl（W/V）的MH琼脂平板上，贴上青霉素（含药量为10IU）和苯唑西林（含药量为1μg）药敏纸片，35℃培养24h，结果两种药敏纸片的抑菌圈均为0。分离菌鉴定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。MRSA测定试验如图2所示。选用β-内酰胺类和头孢类抗生素以外的其他抗生素继续做药敏试验，结果仅美罗培南、磷霉素、万古霉素表现为敏感。

三、更换抗生素治疗

MRSA具有广谱耐药性，对β-内酰胺类和头孢类抗生素均耐药，已知碳青霉烯类对MRSA抗菌作用也较差，因此虽然本次试验美罗培南表现敏感，仍不宜选用。最终选用磷霉素钠配合万古霉素静脉滴注，1周后患犬痊愈。

图1 分离菌在5%绵羊血TSA上的形态

图2 MRSA测定试验

四、小结

犬感染螨虫后，被螨虫寄生的毛囊膨胀，破溃，易引起细菌感染，螨虫也产生免疫抑制性血清因子助长细菌感染。本病例早期采用抗蠕虫药与抗菌素的联合治疗方案是正确的，但由于患犬感染了MRSA，导致头孢类抗菌素治疗失败。

MRSA是我国人医临床重要的致病菌之一，MRSA具有多重耐药性，对青霉素类、头孢菌素类、氯霉素类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、喹诺酮类以及林可霉素都不敏感，不仅能引起严重的临床感染，还可能引发公共卫生问题。兽医临床对MRSA报道较少。近年来动物疫控部门对细菌耐药性监测发现动物源细菌耐药性逐渐增强，新的耐药菌株不断出现，因此广大兽医临床工作者要重视动物细菌学检验，必要时运用药敏试验筛选敏感药物用于临床治疗，避免盲目、超量使用抗菌药物，以免加剧细菌的耐药性，发现耐药菌株要做好患病动物的隔离及饲养场所、用具的消毒工作，避免动物源耐药菌株向人类传播。