原发免疫性血小板减少症患者Th1、Th17和Treg细胞的检验及其临床价值

郭煜　冯红梅　钟惠英　汤颖思

【摘要】 目的：探讨原发免疫性血小板减少症患者Th1、Th17和Treg细胞的检验及其临床应用价值。方法：随机选取2016年12月-2018年12月笔者所在医院接收的30例原发免疫性血小板减少症患者，作为观察组。选取同时期于笔者所在医院行健康体检者30例，作为对照组。对所有患者实施血清检测。观察比较两组外周血Th1、Th17和Treg细胞表达情况及白细胞介素-17和γ干扰素的表达情况。结果：两组外周血中Th17表达水平比较，差异无统计意义（P>0.05）。观察组外周血中Th1细胞表达水平高于对照组，Treg细胞表达水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。两组白细胞介素-17表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。观察组γ干扰素表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。

结论：Th1和Treg细胞能够作为疾病评估指标，为原发免疫性血小板减少症疾病的治疗提供临床依据。

【关键词】 原发免疫性血小板减少症; Th1; Th17; Treg细胞; 检验; 价值

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.22.026 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）22-00-03

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical application value of Th1，Th17 and Treg cells in patients with primary immune thrombocytopenia.Method：A total of 30 patients with primary immune thrombocytopenia admitted in our hospital from December 2016 to December 2018 were randomly selected as the observation group.30 patients who underwent physical examination in our hospital at the same time were selected as the control group.Serum tests were performed on all patients.Serum tests were performed on all patients.The expression of Th1，Th17 and Treg cells in peripheral blood of the two groups and the expression of interleukin-17 and gamma interferon were observed and compared.Result：There was no statistically significant difference in the expression of Th17 in the peripheral blood between the two groups（P>0.05）.The expression of Th1 cells in peripheral blood of the observation group was higher than that of the control group，and the expression of Treg cells was lower than that of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The was no statistically significant in the expression of interleukin-17 between of the two groups（P>0.05）.The expression of interferon gamma in observation group was higher than that in control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Th1 and Treg cells can be used as disease evaluation indicators to provide clinical basis for the treatment of primary immune thrombocytopenia.

【Key words】 Primary immune thrombocytopenia; Th1; Th17; Treg cells; Inspection; Value

First-authors address：First Affiliated Hospital of Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510080，China

近年来，人们生活方式转变，原发免疫性血小板减少症发病率上升[1]。根據对该疾病的分析，发现其作为起病较为隐袭性疾病，发病特征不是十分明显。因此，采用血清检测相关指标的方式，实现对疾病的评估极为重要。临床认为Th1、Th17和Treg细胞的检验可实现对原发免疫性血小板减少症的评估，为疾病治疗提供依据[2-3]。为此，本次研究展开对原发免疫性血小板减少症患者Th1、Th17和Treg细胞检验的分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2016年12月-2018年12月笔者所在医院接收的30例原发免疫性血小板减少症患者，将其作为观察组。选取同时期于笔者所在医院行健康体检者30例，将其作为对照组。纳入标准：（1）观察组所有患者均为原发免疫性血小板减少症疾病;（2）观察组所有患者均为初次治疗;（3）所有研究对象在采集标本前均未接受过免疫治疗与糖皮质激素治疗。排除标准：（1）严重内分泌系统疾病患者;（2）严重肝肾功能障碍、精神障碍的患者。其中，观察组男16例，女14例;年龄16～74岁，平均（45.23±0.57）岁;病程1～8个月，平均（4.86±0.25）周。对照组男17例，女13例;年龄15岁～75岁，平均（45.63±0.27）岁。两组患者年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），有可比性。所有研究对象均自愿参与本次研究，本次研究经过笔者所在医院伦理委员会批准同意。

1.2 方法

对所有患者实施血清检测。

检测仪器与试剂：采用型号为Epics-xl的流式细胞仪（美国GE公司）、型号为Sunrise的酶标仪仪器（德国西门子）。试剂包括异硫氰酸荧光素标记-抗人CD3单克隆体、抗人CD4单克隆体，藻红蛋白青色素标记-抗人CD4单克隆体等。

标本的采集与处理。向所有研究对象讲述标本采集的流程及注意事项，提高研究对象的认知水平。于入院后第2日清晨保持空腹，抽取静脉血容量6 ml，将静脉血抽至肝素抗凝管中，送往检验室进行检验。采用密度梯度离心法，将外周血单个核细胞分离，用于检测Th1、Th17;直接选取1 ml静脉血检测Treg细胞。分离的血浆要放置于-20 ℃中冷冻保存，将其应用于细胞因子的检测中。所有血液标本均无溶血现象。分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验法，对患者血清中的Th1、Th17、Treg细胞、白细胞介素-17和γ干扰素进行检验。

1.3 观察指标

观察两组外周血中的Th1、Th17和Treg细胞表达情况，并观察两组白细胞介素-17和γ干扰素的表达，详细记录检测结果，并对比分析。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 19.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组外周血中Th1、Th17和Treg细胞的表达情况对比

两组外周血中Th17表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;观察组外周血中Th1细胞表达水平高于对照组，Treg细胞表达水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 两组白细胞介素-17和γ干扰素的表达对比

两组白细胞介素-17表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;观察组γ干扰素表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

原发免疫性血小板减少症是临床常见病，发病原因较为广泛。根据对该疾病的分析，其属于获得性出血疾病，原因不明确[4-5]。疾病主要特征为，骨髓巨核细胞正常或增多，血小板减少等。流行病学显示，原发免疫性血小板减少症的发病率为8.6%[（5～10）/10万]，男性与女性的发病比例差异不大[6-7]。一般情况下，依据疾病的持续性时间，可将该疾病分为新诊断疾病、持续性疾病、慢性疾病，疾病持续时间依次延长。该病起病隐袭，临床症状不明显。为此，采用科学的方式，实现对疾病的诊断和病情评估，是极为重要的。曾有研究指出，血清检测方式下的Th1、Th17和Treg细胞表达水平，可实现对原发免疫性血小板减少症的评估[8-9]。基于该研究成果的论述，本次研究重点分析了Th1、Th17和Treg细胞检验对于原发免疫性血小板减少症的价值。

在本次研究中，通过分析原发免疫性血小板减少症患者Th1、Th17和Treg细胞的检验及其临床价值，从比较全面的角度上明确了Th1、Th17和Treg细胞，对于该疾病的影响。一般而言，调节T细胞与临床自身免疫性疾病具有较为密切的关系[10-11]。临床实践证实，T淋巴细胞亚群积极参与了原发免疫性血小板减少症免疫应答的诱导，尤其是T淋巴细胞的活化，导致了免疫细胞的损伤。因此，Treg细胞作为来自胸腺的天然性细胞，能够有效实现对病原Th1和Th17细胞增殖的抑制，实现对外周免疫耐受的维持。由此，充分避免其自身免疫及组织的损伤。然而，在系列性的自身免疫系统紊乱中，T淋巴细胞比例若存在失调的现象，Treg细胞的功能将会受损，致使T细胞打破了正常的免疫性平衡，使免疫系统呈现出促使炎性细胞发展的倾向[12-13]。本研究结果显示，观察组Treg细胞为（3.62±0.27）%，对照组Treg细胞为（6.12±0.48）%。与对照组健康体检者相比，患有原发免疫性血小板减少症疾病的患者，其体内存在Treg细胞减少的现象。该研究结果也能够充分证实原发免疫性血小板减少症疾病患者调节T淋巴细胞，多出现功能异常的现象。在此种情况下，T淋巴细胞减少，能够发挥免疫机制的细胞减少，机体免疫功能下降，耐受水平降低，使得自身免疫性反应T淋巴细胞激活，产生大量的炎症效应因子。此外，本次研究结果显示，观察组γ干扰素为（19.67±5.34）ng/L，对照组γ干扰素为（10.35±2.42）ng/L，观察组患者与对照组健康体检者的γ干扰素比较，差异有统计学意义（P<0.05）。有研究指出，Th17可实现对Th1的抑制，促使γ干扰素的产生[14-15]。分析原因，Th17在应答局部细胞因子的影响下，会在不同程度上产生白介素细胞-2或是肿瘤因子等，此种现象表明Th17細胞在逐渐向Th1细胞转化，白细胞介素-17与γ干扰素的相互调节，可在原发免疫性血小板减少症自身免疫耐受中发挥较大的作用。同时，由于γ干扰素的升高，会阻抑Th17的相关诱导因子，从而降低其表达，而Th17细胞是一类产生白细胞介素-17的Th细胞亚群，其表达低导致白细胞介素-17降低。本研究结果中两组Th17与白细胞介素-17比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。

综上所述，在原发免疫性血小板减少症患者中，Th1、Th17和Treg及其细胞因子的表达，存在明显的差异，提示Th1、Th17和Treg细胞可在原发免疫性血小板减少症疾病中发挥不同的作用。其中，Th1和Treg细胞能够作为疾病评估指标，为原发免疫性血小板减少症疾病的治疗提供临床依据。

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（收稿日期：2019-06-21） （本文编辑：桑茹南）