龙眼叶乙酸乙酯部位ABTS自由基清除活性研究

李培源 鄢宏俊 霍丽妮 贾智若

摘要 [目的]探讨龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除活性。[方法]采用乙酸乙酯为提取溶剂，通过冷浸法得到龙眼叶乙酸乙酯部位，测定其ABTS自由基清除能力，并研究龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除能力与浓度之间的关系。[结果]在较低药液浓度下龙眼叶乙酸乙酯部位显示出一定的ABTS自由基清除率，随浓度增加，ABTS自由基清除率迅速增加。研究龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除能力与时间之间的关系，结果表明随反应时间增加，ABTS自由基清除率迅速增加。[结论]龙眼叶乙酸乙酯部位具有较好的ABTS自由基清除活性。

关键词 龙眼叶;乙酸乙酯部位;ABTS;清除活性

中图分类号 R285.5文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2019）17-0159-02

Abstract [Objective] The research aimed to study ABTS free radical scavenging activity of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan. [Method]The ABTS radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan was studied. The relationship between ABTS free radical scavenging ability and concentraion was investigated. [Result]At a low concentration， ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan exhibits some ABTS free radical scavenging ability. With increasing concentration， ABTS free radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan quickly increased. The relationship between the ability of ethyl acetate in longan leaves to scavenge ABTS free radicals and time was studied. The results showed that the ABTS free radical scavenging rate increased rapidly with the increase of reaction time.[Conclusion] Ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan has good ABTS free radical scavenging activity.

Key words Leaf of Dimocarpus longan;Ethyl acetate extract;ABTS;Scavenging activity

科学研究证明，中风、关节炎等多种慢性疾病与体内自由基超量相关，当体内的抗氧化物质不足以抗衡自由基时身体产生疾病，需要额外补充抗氧化剂[1-3]。目前应用较为广泛的抗氧化剂如2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚等具有较多副作用，因此，从植物中开发新的天然抗氧化剂成为新的研究热点[4-8]。该试验采用乙酸乙酯为提取溶剂，通过冷浸法得到龙眼叶乙酸乙酯部位，并采用ABTS体系来评估其自由基清除能力，寻找新的天然抗氧化剂。

1 材料与方法

1.1 试材 紫外可见分光光度计，UV1901型，北京普析电子科技有限公司[8-10]。芦丁标准品，百灵威试剂公司（北京）。

1.2 方法

1.2.1 龙眼叶乙酸乙酯部位制备。

将龙眼叶晒干磨粉后，将20 g龙眼叶粉末放入圆底烧瓶中，加入200 mL乙酸乙酯（95%），采用冷浸法得到龙眼叶乙酸乙酯部位。

1.2.2 ABTS· +自由基清除能力测定[6-10]。

在锥形瓶中加入50 mL浓度为2 mmol/L的2，2-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）水溶液和200 mL浓度为70 mmol/L的K2S2O8水溶液，混合均匀，盖上塞子避光放置12～16 h，再加入磷酸盐缓冲液至溶液在波长734 nm处吸光度为0.70±0.02得到ABTS· +溶液。取一定量不同浓度提取物药液，加入一定量的ABTS· +溶液混匀，在不同时间测其吸光度，并以吸光度变化计算其对ABTS· +自由基的清除率。

2 结果与分析

2.1 龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除能力与浓度的关系

从图1可看出，药液浓度为0.2 mg/mL时，龙眼叶乙酸乙酯部位显示出6.29%的ABTS自由基清除率;当药液浓度从0.2 mg/mL增至0.8 mg/mL，提取物对ABTS自由基的清除率增大至1.4倍;药液浓度为1.2和1.5 mg/mL时，龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除率分别为0.2 mg/mL药液浓度时的2.2和2.4倍;在最大浓度2.0 mg/mL时，

2.2 龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除能力与时间的关系 从图2可看出，对于药液浓度为1.5 mg/mL的提取物，反應时间为1 min时对ABTS自由基的清除率为6.78%;随着反应时间增加，龙眼叶乙酸乙酯部位展现出增强的ABTS自由基清除能力;反应时间为3 min时，ABTS自由基清除率为1 min时的1.6倍;反应时间为5 min时，ABTS自由基清除率为1 min时的1.9倍;反应时间延长至10 min时，ABTS自由基清除率为1 min时的2.0倍。对于药液浓度为2.0 mg/mL的提取物，反应时间为1 min时对ABTS自由基的清除率为 13.35%，是药液浓度为1.5 mg/mL提取物的2倍;反应时间增加至10 min时，ABTS自由基的清除率增加至反应时间为1 min时数值的1.4倍。

3 结论

该试验采用乙酸乙酯为提取溶剂，通过冷浸法得到龙眼叶乙酸乙酯部位，并测定其对ABTS自由基的清除能力，结果发现，药液浓度为0.2 mg/mL时龙眼叶乙酸乙酯部位显示出一定的ABTS自由基清除率;随浓度增加，ABTS自由基清除率迅速增加，在最大浓度2.0 mg/mL时，提取物对ABTS自由基表现出增加的清除率，为0.2 mg/mL药液浓度时的3.0倍。此外，研究了龙眼叶乙酸乙酯部位对ABTS自由基的清除能力与时间之间的关系，结果表明随反应时间增加，ABTS自由基清除率迅速增加。

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