Elabela在鉴别肾嫌色细胞细胞癌和嗜酸细胞瘤中的意义

徐 锋，吴 琼，娄 岩，张艺献，栾如梅，姜福全

(1.吉林大学第二医院 肾病内科，吉林 长春130041； 2.吉林大学中日联谊医院 a.病理科；b.泌尿外科，吉林 长春130033)

肾嫌色细胞癌(CRCC)是一种低度恶性的肿瘤，具有发生肉瘤样去分化和远处转移的可能。肾嗜酸细胞瘤(Oncocytoma)是一种典型的良性肿瘤，二者预后差异很大[1]。嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤均起源于肾小管，两者在组织学形态和免疫表型上经常出现重叠而造成诊断上的困难，二者均可表现为颗粒状的嗜酸性胞浆和界限不清的细胞轮廓。免疫组织化学染色有助于来区分这两种疾病，CK7是临床最常应用的指标之一。然而现有的免疫组化指标还存在一些缺陷，临床上亟需一种特异性更强的免疫组化指标。

Elabela(ELA)又称为Apela或Toddler，是2013年发现的G蛋白偶联受体-血管紧张素Ⅱ 1型受体相关蛋白(APJ)的内源性配体[2-5]，在成体动物体内集中分布在肾脏，前列腺和血管内皮[2,6-9]。已有研究证实，ELA可以促进细胞增殖，减少细胞凋亡[10]，加速血管生成[6]，与肿瘤血管发生和肿瘤生长关系密切[11-12]。最近研究表明，ELA在肾脏肿瘤病理鉴别诊断上具有一定意义[13]。本研究，我们应用免疫组化染色法检测了ELA在肾嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤中的表达情况，探讨其在这两种肾脏肿瘤诊断和鉴别诊断中的意义。

1 材料与方法

1.1 材料收集2001年-2019年间吉林大学中日联谊医院和吉林大学第一医院收治28例肾嫌色细胞癌和16例嗜酸细胞瘤病例标本。ELA购自美国AbboMax公司，生物素化的山羊抗多价(羊抗兔IgG)购自中国中杉金桥生物技术有限公司。

1.2 方法根据WHO 2013分类标准，所有肿瘤均根据HE染色进行形态学分类，两名高年资主治以上病理医师盲法判断免疫组化结果。对于每种染色，记录阳性细胞的百分比。超过10%肿瘤细胞阳性的病例为阳性，低于10%者记为阴性。

1.3 免疫组化检测石蜡包埋的组织标本进行常规切片,厚度4 μm。采用En Vision 2步法进行免疫组织化学法染色。使用Leica DM500 microscop(Leica DFC295)观察分析结果并拍照。

1.4 统计学分析运用SPSS 24.0软件对数据资料进行处理，等级资料的秩和检验用于各项免疫组化表达差异的比较。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HE染色28例嫌色细胞癌，瘤组织主要呈致密片状排列，由薄的纤维血管分开，5例具有管状结构，1例小梁状结构，1例具有乳头状结构。瘤细胞中等大小，胞质丰富，嗜酸性，边界清楚，核不规则(图1 A)。16例嗜酸细胞瘤，瘤组织主要呈巢状或管状排列。3例见瘤体中央纤维瘢痕。瘤细胞由几乎圆形的嗜酸细胞构成。可见部分细胞核增大、不规则，染色质呈粗大颗粒样(图1 B)。

2.2 免疫组织化学染色CK7 在胞质、胞膜表达。嫌色细胞癌67.86%(19/28)具有弥漫阳性表达，7.14%(2/28)具有散在阳性表达。嗜酸细胞瘤37.5%(6/16)具有灶状阳性表达，25%(4/16)具有散在阳性表达。CK7在嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤两者当中的表达，差异不具有统计学意义，P>0.05(表1)。

ELA 在胞质中表达。嫌色细胞癌10.71%(3/28)具有阳性表达，21.43%(6/28)具有灶状阳性表达， 60.71%(17/28)具有散在阳性表达， 7.14%(2/28)无表达(图2 A)。嗜酸细胞瘤6.25%(1/16)具有灶状阳性表达，37.5%(6/16)具有散在阳性表达，56.25%(9/16)无表达(图2 B)。ELA在嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤两者当中的表达，差异具有统计学意义，P<0.01(表1)。

表1 CK7和ELA免疫组化在肾嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤中的表达差异比较

注：a:CK7 嫌色细胞癌&嗜酸细胞瘤；b:CK7 嫌色细胞癌&嗜酸细胞瘤

图1 肾嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤形态学(20×10) 图2肾嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤免疫组化差异表达ELA(+)(20×10)

3 讨论

肾癌约占全球所有癌症诊断和癌症死亡人数的2%。肾嫌色细胞癌和肾嗜酸细胞瘤是肾脏组织中较为少见的两种肿瘤，分别占肾脏肿瘤的5%-7%和5%-9%[1]。肾嫌色细胞癌是一种低度恶性的肾细胞癌,确诊有赖于病理诊断,治疗以手术为主。肾嗜酸细胞瘤是一种良性肿瘤，生长缓慢，即便发生肾周脂肪的浸润和血管浸润，也不影响其预后。因此，有学者认为对于已经获得病理确诊的肾嗜酸细胞瘤患者可观察等待[14]。但两种疾病的症状体征及影像学等辅助检查并不能对肿瘤性质进行判断，临床上手术切除方式往往并无差异。而这两组肿瘤的病理形态学上的重叠，导致诊断及鉴别诊断的困难，不利于指导预后。

肾嫌色细胞癌的瘤组织呈纤维血管分隔的实性片状排列，可分为经典型和嗜酸型[15]。经典型具有嗜酸性细胞质和中等大小核的大多边形细胞。嗜酸型通常具有明显的核周空晕[16,17]。肾嗜酸细胞瘤的瘤组织呈实性巢团状、腺泡状。瘤细胞形态一致，胞质嗜酸，核小圆形，核分裂象无或罕见[18]。免疫组织化学方面，肾嫌色细胞癌与嗜酸细胞瘤有很大的相似性[19]，CK7被认为是区分两种肿瘤的有用标志物[20,21]。

在本研究当中，CK7在嫌色细胞癌和嗜酸细胞瘤两者当中的阳性表达比例分别为67.86%(19/28)和0(0/16)，与文献报道相符[22]。而两种肿瘤均有四分之一的病例CK7表达阴性或仅有散在阳性，因此难以单独应用该标记物区分两种肿瘤。根据文献报道，有研究者主张用一组包括amylase α1 A、Wnt-5a、FXYD2、ARPP、CD63、TGFβ1、CK7、S100A1、caveolin-1 以及claudin-7 等10 种标记物同时标记鉴别，但实际应用尚存在一定的困难[23]。现有的免疫组织化学标记物对肾嫌色细胞癌与嗜酸细胞瘤的鉴别仍然存在缺陷，因此亟需找到一种特异强的新型标记物。

ELA是一种由32或21个氨基酸组成的成熟多肽类激素[24]。有研究显示，在人多能胚胎干细胞当中，ELA作用于PI3K/AKT途径，能够通过促进细胞周期进展和有关蛋白质翻译来增强生长，减少细胞凋亡[10]。PI3K/AKT在正常细胞和癌细胞中均具有抗凋亡特性[25]，在肿瘤生长和发育中具有重要作用[26]。推测ELA可能具有上述潜在生理功能。

在我们的研究中，作为肾脏恶性肿瘤之一的肾嫌色细胞癌中，ELA的表达显著高于肾良性肿瘤嗜酸细胞瘤。ELA免疫反应性在肾嗜酸细胞瘤和肾嫌色细胞癌之间的明显差异，对于两者之间的鉴别诊断很有意义。因此，我们推测ELA是一种鉴别肾嫌色细胞细胞癌和嗜酸细胞瘤的免疫组化标记物，而ELA在肿瘤形成过程当中的分子机制还需要进一步的研究来探讨。