李江凌 刘锐 陈晓晖 于吉峰 王秋实 赵素君 何志平 吕学斌
摘要:该研究通过比较藏猪和长白猪发育期血液生理生化指标,以了解地方猪种和外来猪种的种质特性。试验分别采集6月龄藏猪和长白猪血样各30份,检测12项血液生理指标和10项血液生化指标,并对结果比较分析。藏猪血液生理指标整体高于长白猪,其中白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)显著高于长白猪(P<0.05),血红蛋白( HGB)、血小板计数(PLT)极显著高于长白猪(P<0.01);藏猪血液生化指标中γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌苷(CRE)极显著高于长白猪(P<0.01),碱性磷酸酶(AIP)、尿酸(UA)显著高于长白猪(P<0.05),其他指标无显著差异。结果表明,藏猪表现出比长白猪更强的低氧适应能力、抗氧化应激能力以及高的肌肉活动量,为解析我国地方品种的优良性状提供科学依据。
关键词:藏猪;长白猪;血液生理生化指标;低氧适应能力;抗氧化应激能力
中图分类号:S828 文献标识码:B doi: 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.16.001
0 引言
血液生理生化指标与代谢、营养及健康状况有密切的联系,是反映动物机体生理机能的重要指标,也是临床兽医、免疫学和科学研究的重要依据[1]。在正常情况下,动物血液指标维持一种动态平衡,当动物受外界的生物、化学、应激等因素刺激時,会发生相应的变化。因此,可利用血液生理生化指标来评价动物机体的健康、营养和对环境的适应状况,或比较不同品系猪的血液生化指标以期进一步探究品种特征,为其利用提供科学依据。
我国地方猪种通常具有抗逆性强的优点,但是由于诸多因素限制,对地方猪种血液生化等基础性性能指标一直未能得到科学地评价和有效地利用。近年,关于藏猪、可乐猪等地方猪种血液生化指标的研究大多数是对单一品系指标的测定,或是对不同品种研究资料比较;而且利用不同实验仪器和测试方法获得的结果缺乏可比性。该研究对四川有特色的地方猪种一藏猪血液生化指标测定,并与相同饲养条件下的外种猪一长白猪比较,旨在探索地方猪和外种猪发育期血液指标规律,以了解不同品种的部分种质特性,为保种选育、开发利用积累资料,也为改进地方猪种饲养管理方式、制订科学合理的饲养管理方案、促进产业化生产等提供依据。
1 材料与方法
1.1试验动物
藏猪、长白猪均来源于四川省畜牧科学研究院简阳基地,选择出生日期相近的仔猪共60头,每个品种各30头,公母各半。
1.2饲养管理
每个品种的仔猪选择3个相邻圈舍每日喂食3次,自由饮水。由专人保持圈舍温暖干燥、清洁卫生和良好的通风,每天做好试验猪的饲喂、饲料消耗、健康状况、疾病防治、定期称重等各种饲养管理记录,每一阶段保持饲料组成相对稳定。
1.3样品采集
在6月龄采用站立保定的方式,每头前腔静脉采血5mL,其中3mL血样室温静置30min后,3500 r/min离心机离心10min。收集血清,分装于1.5mL无菌EP管中,4℃保存待用;此外,2mL血液置于加有肝素钠抗凝剂的采血管内,温和倒置3次混匀后,4℃保存待用,回实验室后分离血清待上机。
1.4生化指标测定
用CX4型全自动血液生化分析仪(Beckman公司)测定血清中的丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨基酸转氨酶(AST)、AST/ALT、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、尿酸(UA)、血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌苷(CRE)、UREA/CRE。
1.5血液生理指标测定
采用BC-2600/BC-2800全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞公司)测定血液中的白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度变异系数(RDW)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布密度(PDW)、血小板压积(PCT)等指标。
1.6数据分析
试验数据均采用SPSS17.0软件对试验数据统计分析,试验数据采用X±S表示,采用F检验对试验结果进行差异显著性分析。
2 结果
2.1 藏猪、长白猪生理指标分析
同品种公母猪间、不同品种间血液生理指标结果。见表1。
藏猪母猪HGB含量显著高于公猪(P<0.05),PLT含量显著低于公猪(P<0.05);长白猪公、母猪间所有指标均无显著差异。藏猪生理指标高于长白猪,其中WBC、RBC显著高于长白猪(P<0.05),HGB、PLT极显著高于长白猪(P<0.01);其余指标均无显著差异(P>0.05)。见表1。
2.2藏猪、长白猪血液生化指标比较分析
同品种公母猪间、不同品种间血液生化指标结果。藏猪公母猪间比较,公猪GGT含量极显著高于母猪(P<0.01),CRE含量显著高于母猪(P<0.05),ALP含量极显著低于母猪(P<0.01);长白猪公母猪间比较,公猪CRE、UREA、CRE含量显著高于母猪(P<0.05),ALP含量极显著低于母猪(P<0.01)。见表2。
公母猪合并数据显示:藏猪的GGT、GLU、UREA、CRE含量极显著高于长白猪(P<0.01),ALP、UA含量显著高于长白猪(P<0.05),其他指标无显著差异。
3 讨论
(1)猪血液生理生化指标是生长发育重要的基础指标。作为动物生长发育研究的重要基础指标之一,猪的血液生理生化指标受品种、年龄、性别、生理状态和生活环境等因素的影响,具有一定差异性[2]。该研究测定的藏猪、长白猪的12项血液生理指标中,藏猪在WBC、RBC等10个指标在性别间无显著差异,HGB和PLT在性别间有显著差异,藏猪公猪HGB极显著高于母猪,公猪PLT极显著低于母猪。长白猪12个指标在性别间不存在显著差异。顾为望[3]等对比广州西藏小型猪1.5、2.5、3.5、5月龄的生理生化指标,其中平均红细胞体积随着月龄的增长呈上升趋势,血小板总数、平均红细胞浓度随着月龄的增长呈下降趋势;将不同月龄的雌性与雄性生理生化指标分别汇总分析,结果表明,血小板总数差异极显著,总蛋白、球蛋白、碱性磷酸酶、肌酐、总胆红素差异显著,而且以上指标雄性高于雌性。李洪涛[4]等对广东西藏小型猪F1代雌性与雄性间生理生化指标比较,结果表明,雌性与雄性间三酰甘油、白蛋白等生理指标差异显著、尿素氮和总胆固醇等生化指标差异极显著。廖洁丹[5]等对4月龄西藏小型猪的研究结果显示:雌性与雄性的生理生化指标比较,血小板总数、平均血小板体积、大血小板比率、血小板压积差异极显著,且雌性高于雄性;嗜碱性粒细胞绝对值差异显著,雌性低于雄性;此外,肌酐和磷等指标含量差异显著,总胆固醇含量差异极显著,均雌性高于雄性。研究结果与其他一些地方猪种中部分研究结果类似(五指山猪[6]、巴马小香猪[7]。而其他地方猪种在HGB和PLT指标上均未发现有性别差异[8-9]。
(2)血液中紅细胞结构、功能表现已成为高原低氧适应研究重要内容。血液中红细胞的主要生理功能是运输O2和CO2,其结构、功能表现已成为高原低氧适应研究的重要内容。RBC和Hb含量增加是许多生活在高原动物的血液学特征。而且随着海拔的升高,这些值也相应升高。高原土生动物经过长期的进化和自然选择具有低氧适应能力,在血液学上的突出特点是血红蛋白与氧结合和释放的能力显著高于相应的平原物种[10]。与低地同种动物相比,高原动物通常会表现为红细胞数目高、体积小,红细胞膜表面积大,气体的扩散量增多,红细胞内的血红蛋白能充分地进行O2和CO2交换,有尽可能多的Hb参与摄氧、携氧和释氧[11]。研究结果显示藏猪RBC、Hb等指标显著高于长白猪,表现为红细胞数目高,红细胞压积小。研究结果与郭晓宇[12]等对不同海拔地区小型猪血液生理生化指标比较研究结果类似。因此,与长白猪相比,藏猪低氧适应能力更强。
(3)谷氨酰转肽酶(GGT)是细胞抗氧化作用的重要因子。GGT属氧化还原酶类,它主要分布在肾、胰、肝、脾、肠、脑等组织,以肾脏中含量最高。研究显示,GGT是参与细胞内外谷胱甘肽(GSH)水解的酶类,是细胞抗氧化作用的重要因子。尽管细胞的GGT与血清GGT的关系不清楚,目前发现从细胞的GGT作用的观点,可能血清GGT与氧化应激有关[13]。提示血清GGT活性增加最终可能将氧化应激减到最少,对机体起到有效的保护作用。该研究结果显示藏猪血液中GGT的含量显著高于外种猪,可以将氧化应激的危害减到最少,表现出对环境变化的更高适应性。
(4)血液肌酐(CRE)含量与肌肉活动量相关。CRE与UREA/CRE相结合作为临床上判断肾功能的指标,CRE是肌肉代谢的产物,由CRE通过不可逆的非酶脱水反应形成,释放到血液中,随尿排出体外,所以与体内肌肉关系密切[14]。研究发现,与长白猪相比,藏猪血清CRE有偏高趋势,CRE含量增加可能与其早期行为特征有关,为后天发达的运动潜力奠定基础。这可能与藏猪四肢短小健壮,蹄小质坚,耐粗放管理,适应自然环境有关,研究结果与高原厥麻小型猪等的研究结果类似[15]。
4 结论
动物的血液生理生化指标不仅可以反映动物的健康状况,而且是其种质资源特性及遗传特性的重要指标,对研究和利用种质资源特性具有重要意义。藏猪表现出比长白猪更强的低氧适应能力、抗氧化应激能力以及高的肌肉活动量,为我国地方品种优良性状的进一步开发利用提供科学依据。
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基金项目:四川省应用基础项目(2018JY0042);四川省财政专项项目SASA 2016 CZYX017;畜禽分子育种平台(16ZC2845)
作者简介:李江凌(1972-),女,重庆人,研究员,博士,主要从事动物遗传学研究工作。