迟缓爱德华氏菌及鱼类迟缓爱德华氏菌病研究进展

李飞翔

摘要：为较全面的认识迟缓爱德华氏菌及其引发的鱼类迟缓爱德华氏菌病，有效的鉴定、防治与控制迟缓爱德华氏菌的感染，对迟缓爱德华氏菌生物学特性及其致病力、鉴定方法、免疫控制等方面做如下综述。

关键词：迟缓爱德华氏菌病;生物学特性;鉴定方法;致病力;免疫控制

中图分类号：S941.42+9    文献标识码：A

迟缓爱德华氏菌是鱼类的细菌性致病菌之一，许多鱼类会受到该菌感染并造成大量死亡。为比较全面地认识迟缓爱德华氏菌及其造成的鱼类迟缓爱德华氏菌病，有效地预防和控制该病菌的感染，现对迟缓爱德华氏菌感染症状、致病力、诊断以及免疫控制等方面做如下介绍：

1  生物学特性

迟缓爱德华氏菌为短杆菌，有鞭毛，无荚膜，也不形成芽孢。生长温度为15℃～42℃，最适为37℃;适宜pH为5.5～9.0，但以pH为7.2较好;盐度为0%～4%。研究发现，在普通琼脂培养基上，25 ℃条件下，该菌培养24 h能形成隆起、灰白色、形状为圆形并带有光泽、呈半透明状态的菌落，直径约为0.5～1.0 mm。

2  鱼类感染症状

迟缓爱德华氏菌感染斑点叉尾鮰后，鱼体出现颜色不正常的、凸出的肿胀区域，如果刺穿，则会产生恶臭，明显可见肛门出血和眼睛不透明。鳃、肾、肝和脾以及在肠（较少）中观察到小的白色结节，这些结节被细菌包裹。研究发现，感染爱德华氏菌的牙鲆可见肠道脱垂于肛门外，腹腔内有大量浓液状腹水，但肠道内无腹水，肝和肾肥大并伴有出血症状[1]。大菱鲆急性感染该病菌时，病鱼会出现下颌和鳃盖边缘发红，鳍基部以及腹部皮下充血。肾脏出现肿大、溃疡、出血，严重时整个肾脏呈膿样坏死或灰白色;脾脏时有肿大，失血呈粉红色[2]。

3  致病性

迟缓爱德华氏菌是爱德华氏菌属中唯一能够感染人的致病菌，危害极大，可引起人的肠胃炎、腹泻等，还可以引起脑膜炎和败血症等较为严重的疾病。刘春等[3]发现，迟缓爱德华氏菌的分离菌株Z1接种感染透明四带无须鲤和斑马鱼，当迟缓爱德华氏菌液达到1×106 cfu/mL的浓度时，能使他们的死亡率分别达到80%和90%。

4  迟缓爱德华氏菌的鉴定

4.1  血清学

酶联免疫吸附法（ELISA）具有特异性强、敏感性高、检测时间短等优点。研究发现，以迟缓爱德华氏菌WY28作为抗原，获得效价较高的多克隆抗体，建立迟缓爱德华氏菌的快速检测法ELISA[4]。将该方法进行规范化后具有简便、灵敏等特性，与肠杆菌科其他细菌参考菌株无交叉反应，具良好的特异性。

4.2  分子方法

环介导等温扩增法（LAMP）扩增迟缓爱德华氏菌溶血素基因片段的方法对于鉴定迟缓爱德华氏菌是较为简便的。因为LAMP法操作非常简单，可在一个小试管内就能完成所有检测，并且可以通过肉眼观察颜色变化进行判断，最重要的是所需仪器价格便宜，具有很高的经济性[5]。然而，LAMP法也有一些不足之处，比如引物设计较为复杂，而且一旦发生非特异性扩增，试管内颜色没有变化，难以辨别。

通过设计迟缓爱德华氏菌gyrB基因的特异性引物也可检测迟缓爱德华氏菌，此种方法的特点是：快速、灵敏、特异高。王燕等[6]通过总结菌株在形态与生理生化特征及16S rDNA同源性等方面的实验结果，分离得到了迟缓爱德华氏菌（WY28菌株）。直到现在，生理生化特征鉴定以及16S rDNA和gyrB基因序列分析也是作为确定迟缓爱德华氏菌的重要依据。虽然PCR方法操作简化，灵敏度提高，检测时间也较短，但是它对试验仪器要求较高。因此，该方法在实际检测应用中受到了限制。

5  疾病控制

5.1  疫苗的开发

疫苗免疫是预防鱼类病害的重要手段之一。实验证明，使用病鱼体内分离的迟缓爱德华氏菌菌株制备的灭活疫苗能较有效保护大菱鲆免受迟缓爱德华氏菌强毒株的感染[6]。这种弱毒疫苗通过浸泡、口服等途径效刺激机体系统免疫应答，进而发挥免疫保护作用[7]。此外，鞭毛蛋白可作为鱼类疫苗的潜在佐剂，对开发鱼类疫苗产品具有重要作用。

5.2  免疫增强剂

免疫增强剂包括维生素C、免疫多糖等，它能起到增强机体免疫力的作用。研究证明，饲料中添加维生素C能有效降低感染迟缓爱德华氏菌半滑舌鳎的红细胞氧化损伤程度[8]。在饲料中添加多糖免疫佐剂能提高大菱鲆的SOD活性和血清溶菌酶活性等免疫指标。总之，在在饲料中添加免疫增强剂可提高鱼类的抗病能力。

参考文献

[1] 张晓君， 战文斌， 陈翠珍，等. 牙鲆迟钝爱德华氏菌感染症及其病原的研究[J]. 水生生物学报， 2005， 29（1）：31-37.

[2] 王印庚， 秦蕾， 张正，等. 养殖大菱鲆的爱德华氏菌病[J]. 水产学报， 2007， 31（4）：487-495.

[3] 刘春， 李凯彬， 王庆，等. 斑马鱼迟缓爱德华氏菌的鉴定、致病性及药物敏感性[J]. 华中农业大学学报， 2013， 32（3）：105-111.

[4] 白方方， 兰建新， 王燕，等. 迟缓爱德华氏菌间接ELISA快速检测法[J]. 中国水产科学， 2009， 16（4）：619-625.

[5] Savan R， Igarashi A， Matsuoka S， et al.Sensitive and rapid detection of Edwardsiellosis in fish by a loop-mediated isothermal amplification method.[J].Applied & Environmental Microbiology， 2004， 70（1）：621-624.

[6] 王燕， 张晓华， 吕俊超，等. 养殖大菱鲆病原菌迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及其疫苗研制[J]. 中国水产科学， 2009， 16（3）：394-403.

[7] 付天增， 郝金婷， 李宁求，等. 迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对罗非鱼注射和口服免疫的效果分析[J]. 水生生物学报， 2016， 40（6）：1158-1165.

[8] 黄亚冬， 孙朦朦， 窦艳君，等. 饲料维生素C含量对半滑舌鳎抵抗迟缓爱德华氏菌感染的影响[J]. 动物营养学报， 2015， 27（10）：3263-3269.