油墨中苯酚和双酚A的高效液相色谱检测方法研究

王 玫 梁恩振

（中国质量认证中心华南实验室 广州 510700）

引言

油墨被广泛的使用于玩具制造领域，欧盟2009/48/EC 指令将苯酚和双酚A列为限值物质之一。苯酚具强烈的腐蚀性，人体接触过多易引起白血病和心脏病。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪，1260 Infinity配FLD检测器，安捷伦科技；

电子天平，AL204，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；

数控超声波清洗器，SB25-12DT，宁波新芝生物科技股份有限公司；

超纯水制备仪，CLXXXDIM2，ELGA公司；

微孔膜过滤器，0.45 um；

苯酚标准品，Dr. Ehrenstorfer 纯度99.5 %；

双酚A标准品，Dr. Ehrenstorfer 纯度99.5 %；

甲醇（色谱纯）；

丙酮（色谱纯）；

乙腈（色谱纯）；

超纯水。

1.2 实验方法

1.2.1 提取

将油墨搅拌均匀，称0.5 g油墨样品（精确到0.1 mg），加入15 mL丙酮溶剂，超声萃取15 min，用0.45 um的微孔膜过滤器过滤后用HPLC-FLD测试。

1.2.2 测定色谱条件

色谱柱：Poroshell 120 EC-C18 4.6×50 mm 2.7 Micron

检测波长：FLD激发波长270 nm，发射波长313 nm

PMT增益：1.2

流动相：甲醇+水（见表1）

流速：1.0 mL/min

柱温：30 ℃

进样量：10 μL

2 实验结果与讨论

2.1 工作曲线及方法检出限

2.1.1 标准溶液配制：

分别称取约0.1 g苯酚及双酚A标准样品，用甲醇溶解并定容至100 mL得到约1 000 mg/L的单标储备液。按照下表用甲醇为介质，配制各标准工作溶液。

2.1.2 标准曲线建立：

标液依次进行HPLC-FLD分析，以目标组分的峰面积（Y）对相应的浓度（X）作标准曲线，其回归方程、相关系数及检出限等如表3所示。

从图1～4可以看出，其线形及信噪比能维持在一个较好的水平上。

2.1.3 检出限的验证

通过10次重复测定检出限浓度值，计算平均值与理论值的偏差来进行评估。

苯酚10次测试平均值为0.010 6 mg/L，相对标准偏差为7.3 %。双酚A10次测试平均值为0.003 24 mg/L，相对标准偏差为6.8 %。相对偏差均小于10 %，结果准确，可靠。

表1 流动相淋洗程序

表2 标准溶液配制表

表3 浓度范围、方程式、线性及检出限汇总表

图1 苯酚工作曲线图

图2 双酚A工作曲线图

表4 检出限验证结果汇总表

图3 0.01 mg/L苯酚色谱图

图4 0.003 mg/L双酚A色谱图

2.2 萃取溶剂的选择

称0.5 g干燥的油墨样品，分别加入15 mL丙酮、甲醇、乙腈，超声15 min萃取，用0.45 um的微孔膜过滤器过滤后上机测试。测试结果如表5。

从表中数据可知，丙酮的萃取效果最好，乙腈次之，甲醇的最差，因此选择丙酮作为最佳的萃取溶剂，同时，通过研究还发现，用乙腈作为萃取溶剂或乙腈作为介质配制苯酚标液时，苯酚的峰形会展宽。

2.3 萃取时间研究

在保证萃取率的前提下，为了获得尽可能高的提取效率，采用超声进行萃取，并考察了萃取时间对萃取效率的影响。具体称0.5 g油墨样品，加入15 mL丙酮，分别超声10 min、15 min、30 min、60 min萃取，用0.45 um的微孔膜过滤器过滤后上机测试。结果如表6。

从图6中可以看出15～60 min，提取效率没有太大的变化，考虑到萃取效率和提取的完全程度，选择提取时间为15 min。

2.4 回收率试验

表5 萃取溶剂萃取效果比对的表

为了评价方法的准确性及精密度，对油墨实际样品进行了标准加入回收试验，结果如表7～9。

从表7～9结果来看，不同的加标浓度其回收率均达到满意结果。

2.5 实验样品的重现性

图5 各种介质萃取效果色谱叠加图

图6 不同萃取时间萃取效果色谱叠加图

称0.5 g干燥的油墨样品，加入15 mL丙酮，超声15 min萃取，用0.45 um的微孔膜过滤器过滤后上机测试，测三个样品且平行测定10次（见表 10～12）。

分析表10数据可知，苯酚的相对标准偏差为6.9 %，双酚A的相对标准偏差为9.0 %。

分析表11以上数据可知，苯酚的相对标准偏差为4.5 %，双酚A的相对标准偏差为3.0 %。

分析表12以上数据可知，苯酚的相对标准偏差为7.7 %。

表6 不同超声时间结果汇总表

表7 回收率实验结果1

表8 回收率实验结果2

表9 回收率实验结果3

表10 1#样品10次测试结果

表11 2#样品10次测试结果

表12 2#样品10次测试结果

3 结论

本文通过对丙酮、乙腈、甲醇三种溶剂的萃取效果、超声时间找到了一种低毒高效的前处理方法。同时，通过优化仪器流动相淋洗程序，通过调节FLD检测器的PMT增益使目标组分得到很好的分离和较高的响应。该方法操作简便、检出限低、重现性好，能快速准确测定油墨中的苯酚和和双酚A，能很好满足日常检测需要。