乳腺癌转移抑制基因1BRMS1与宫颈癌变临床病理参数的关系研究

毛莉 李彩虹 张建

[摘要] 目的 探讨乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）与宫颈癌变临床病理参数的关系。 方法 选取2017年4月22日～2018年4月22日期间我院收治的100例具有完整病理资料的宫颈疾病患者为实验对象，其中29例为轻度慢性宫颈炎，11例为CINⅠ级，10例为CINⅡ～Ⅲ级，50例为宫颈癌，对所有患者均进行BRMS1基因检测。 结果 从宫颈组织中的BRMS1表达角度分析，CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表达率无差异性（P>0.05），宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者与慢性宫颈炎患者相比，BRMS1蛋白阳性表达率下降（P<0.05）。从BRMS1表达的临床病理特征角度分析，不同浸润程度、FIGO分期、有无淋巴转移患者BRMS1表达阳性率存在明显差异（P<0.05），不同组织学分型、分化程度、肿瘤大小、年龄患者的BRMS1表达阳性率差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 宫颈癌变与BRMS1表达可呈负相关性，当BRMS1蛋白表达下降时，则意味着癌细胞处于转移、浸润、发展趋势。

[关键词] 乳腺癌;转移抑制基因1;宫颈癌变;病理参数;关系

[中图分类号] R737.33          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2019）14-0001-03

[Abstract] Objective To explore the relationship between breast cancer metastasis suppressor 1（BRMS1） and clinical pathological parameters of cervical carcinogenesis. Methods A total of 100 patients with cervical disease with complete pathological data from April 22， 2017 to April 22， 2018 in our hospital were selected as subjects， 29 cases of whom were mild chronic cervicitis， 11 cases were CINⅠ， 10 cases were CINⅡ-Ⅲ grade， and 50 cases were cervical cancer. BRMS1 gene test was performed in all patients. Results From the perspective of BRMS1 expression in cervical tissues， there was no difference in the expression rates of patients with CINⅡ-Ⅲ and CINⅠ（P>0.05）. The positive expression rate of BRMSI protein decreased in patients with cervical cancer， CINⅡ-Ⅲ， and CINⅠpatients， compared with that of patients with chronic cervicitis（P<0.05）. From the perspective of clinicopathological features of BRMS1 expression， there was a significant difference in the positive rate of BRMS1 expression in patients with different degrees of infiltration， FIGO stage， with or without lymphatic metastasis （P<0.05）. There was no difference in the positive rate of BRMS1 expression in patients with different histological types， differentiation， tumor size， and age（P>0.05）. Conclusion Cervical carcinogenesis can be negatively correlated with BRMS1 expression. When BRMS1 protein expression is decreased， it means that cancer cells are in metastasis， infiltration and development trend.

[Key words] Breast cancer; Metastasis suppressor gene 1; Cervical carcinogenesis; Pathological parameters; Relationship

乳腺癌發病率呈逐年上升趋势，具有病死率高、预后差、发病隐匿等特点，属于女性第二大恶性肿瘤，目前已成为危害女性健康的首要疾病。随着对乳腺癌的深入研究，发现导致患者死亡、治疗失败的主要因素为肿瘤转移和肿瘤浸润[1]，而在肿瘤转移中起到较为重要的因子为肿瘤转移抑制基因，就目前而言，乳腺癌转移抑制基因1是乳腺癌中发现的新型恶性肿瘤转移基因，早期由宾夕法尼亚州立大学医学中心在2000年提出，其能够在不影响原肿瘤生长前提下，抑制肿瘤细胞的转移[2]。分析往期报道，可发现乳腺癌转移抑制基因1除了在乳腺癌中具有一定的作用性，还在小细胞未分化肺癌、喉癌、口腔鳞癌、子宫内膜癌、卵巢上皮癌、膀胱癌、恶性黑色素瘤等多种肿瘤转移中起到明显抑制作用[3]。但乳腺癌转移抑制基因1在宫颈癌组织中表达情况等相关报道较少。而本文旨在探讨BRMS1与宫颈癌变临床病理参数的关系和价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年4月22日～2018年4月22日期间我院收治的具有完整病理资料的宫颈疾病患者100例，患者均为已婚女性，年龄24～68岁，平均（46.85±7.19）岁，其中50例为宫颈癌（根据FIGO分期原则，25例为ⅡB期～Ⅳ期，25例为Ⅰ期～ⅡA期），10例为CINⅡ～Ⅲ级，11例为CINⅠ级，29例为轻度慢性宫颈炎。本次研究的50例宫颈癌患者均接受手术治疗，且在术前未经过其他辅助、化疗、放疗等干预，且运用腹主动脉淋巴结取样术、盆腔淋巴结切除术、广泛性全子宫切除术治疗。同时所有患者均具有完整的病理资料，包括手术切缘情况、淋巴结转移、浸润深度、瘤体直径、FIGO分期、组织学分化程度等情况。入选标准：（1）患者临床资料齐全;（2）患者经病理活检，确诊为宫颈疾病;（3）患者均自愿加入本次试验。排除标准：（1）排除存在躁动、焦虑、抵触等情绪者;（2）排除存在严重脏器功能受损者;（3）排除凝血功能障碍者。

1.2 方法

试剂选择：由武汉ELAab科技有限公司提供BRMS1兔抗人多克隆抗体，本次试剂均为进口药。BRMS1一抗工作浓度为1：400。由南京BIOWLD生物科技有限公司提供超敏免疫组化二抗试剂盒（Super Sensitive TM即用型）。由北京博奥森生物技术有限公司提供辣根过氧化物酶（DAB）显色试剂盒。

检测方式：采集到标本后，需进行常规脱水、石蜡包埋，且均用福尔马林液（10%）固定，随后对石蜡标本进行连续性切片，控制在2张，其中1张进行BRMSI免疫组化染色，另1张切片行常规HE染色，切片维持在4 μm，进行3 h的烤片（维持65 ℃），随后运用免疫组化法染色（Super Sensitive TM）。试剂盒操作方式：对免疫性动物血清进行封闭繁育，运用微波炉对枸橼酸盐缓冲液进行抗原修复，梯度乙醇水化，石蜡切片脱蜡，并加入抗体，维持16 h过夜，加入一抗放大剂室温孵育，随后苏木精复染，DAB显色，上行梯度二甲苯透明、乙醇脱水，封片可选择中性树胶，并在镜下进行记录、观察、分析结果[4]。

结果判定标准：在同一个显微镜40倍观察全片，以细胞质为主，NF-κBp50、BRMS1均表达于细胞核和细胞质中，蛋白阳性信号呈棕黄色颗粒状，选择5个400倍高倍视野，确定肿瘤浸润边缘，参照Barnes提出半定量分析法，了解5个不同视野染色细胞百分数[5]。运用0～3分法评估染色强度[6]，3分：棕褐色;2分：棕黄色;1分：浅黄色;0分：不着色。运用0～4分法计量阳性细胞数量[7]，4分：阳性细胞≥76%;3分：阳性细胞为51%～75%;2分：阳性细胞为26%～50%;1分：阳性细胞≤25%;0分：无阳性细胞。将以上两种方法相乘，且运用四级阳性分析法[8]：>4分为+++强阳性;3～4分为++阳性;1～2分为+弱阳性;0分为阴性。

1.3 观察指标

分析不同宫颈组织中的BRMS1表达。分析宫颈癌组织中BRMS1表达的临床病理特征。

1.4 统计学方法

运用统计学SPSS22.0软件进行数据处理，而BRMS1表达、临床病理特征（淋巴结转移、浸润深度、组织学分型、FIGO分期、分化程度、肿瘤大小、年龄）采用连续性校正χ2检验、四格表χ2检验，P<0.05表示差异有统计意义。

2 结果

2.1 不同宫颈组织中的BRMS1表达

BRMS1蛋白主要分布在上皮细胞的细胞核和细胞质，其中最为重要的是胞质，存在黄色颗粒沉着。本次研究结果中，宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者与慢性宫颈炎患者相比，BRMS1蛋白阳性表达率下降（P<0.05），而CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表达率无差异性（P>0.05）。见表1。

2.2 宫颈癌组织中BRMS1表达的临床病理特征分析

不同组织学分型、分化程度、肿瘤大小、年龄患者的BRMS1表达阳性率均无差异性（P>0.05），而不同浸润程度、FIGO分期、有无淋巴转移患者BRMS1表达阳性率存在明显差异性（P<0.05）。见表2。

3 讨论

BRMS1表达能够通过与其他分子形成转录复合物抑制肿瘤转移，调控基因的表达，内包含几个蛋白和转录激活区的相互作用区，主要定位于细胞核内。目前作用机制尚未明确，但可发现在肿瘤发展过程中，细胞间缝隙连接的改变存在一定作用性，可促进肿瘤的转移[9-11]。此外，BRMS1基因定位于11q3.1～11q3.2区域，属于新型恶性肿瘤的MSG，不影响肿瘤的生长，可抑制肿瘤转移，在早期有学者表明，BRMS1基因存在抑制肿瘤细胞远处转移功能，且此项功能不受肿瘤大小的影响[12-14]。当恶性肿瘤细胞出现高度转移潜能时，BRMS1基因表达可出现明显的降低或表达缺失[15]。

BRMS1具有多个磷酸化位点，全长为148 bp，是由多個氨基酸组成的蛋白质，随着研究深入，发现其表达与乳腺癌预后、发展、发生具有一定的相关性，通过检测，发现乳腺癌淋巴结转移组织BRMS1表达明显低于非转移组织，由此说明，BRMS1表达下降时，则提示机体存在淋巴结转移迹象。而本次试验中，提示BRMS1表达下降时，存在淋巴结转移可能性，但有部分学者提出异议，因此相关报道还有待深入。除了在转移角度上临床学者存在争议，关于BRMS1病理分级、浸润深度等情况均存在争议性。但不可否认，高表达的BRMS1无法改变原发肿瘤生长情况，但可促进肺内肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞的肺转移。

分析本次实验发现BRMS1基因在CIN患者和宫颈癌患者中表达水平低于宫颈炎患者，同时其表达因子与机体有无淋巴结转移、浸润程度、临床分期具有一定的关联性，随着淋巴结转移、浸润深度的加深，BRMS1表达呈现为缺失或下调趋势，但BRMS1表达与组织分型、肿瘤大小、分化程度、年龄无关[16-18]。除此之外，分析往期报道可发现BRMS1能够明显抑制肿瘤细胞的转移，且可在人类黑色素瘤中被发现，有学者发现BRMS1通常是通过抑制NF-κB活性，减少骨桥蛋白的表达，从而达到抑制肿瘤转移的目的。从宫颈癌变角度分析，NF-κB和BRMS1关系尚未明确[19-20]。分析本次实验，BRMS1的炎性表达可随着宫颈病变的严重程度呈负相关性。本次结果中，不同组织学分型、分化程度、肿瘤大小、年龄患者的BRMS1表达阳性率均无差异性（P>0.05）;不同浸润程度、FIGO分期、有无淋巴转移患者BRMS1表达阳性率存在明显差异性（P<0.05）;宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者与慢性宫颈炎患者相比，BRMS1蛋白阳性表达率下降（P<0.05）;CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表达率无差异性（P>0.05），由此说明，宫颈癌变与BRMS1表达可呈负相关性。

总而言之，当癌细胞持续转移、浸润、发展时，BRMS1蛋白表达因子可呈缺失、降低趋势，同时BRMS1在肿瘤转移、浸润过程中可表现为多样化，为了进一步了解BRMS1机制和功能，还需进一步深入研究、探索，从而提高患者生存率，尽早阻止癌细胞侵袭转移。

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（收稿日期：2018-09-05）