血红蛋白分析在地中海贫血筛查中的应用价值及临床研究

刘海燕

（乐山市市中区妇幼保健院，四川 乐山 6 1 4 0 0 0）

0 引言

地中海贫血为遗传性溶血性贫血疾病，其发生原因可能与肽链合成障碍、珠蛋白基因缺失等多种因素存在一定关联，致使患者处于贫血状态，可对其生存质量以及身心健康等产生负面影响[1]。血红蛋白电泳仪为临床筛查地中海贫血的常见仪器，其可用于测定血红蛋白A（HbA）、血红蛋白A2（HbA2）以及血红蛋白F（HbF）等含量，明确血红蛋白（Hb）异常情况[2]。基于此，本研究进一步探讨血红蛋白分析在地中海贫血筛查中的临床诊断价值，旨在为该疾病筛查工作提供理论指导。具体信息如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2017年1月至2018年11月在我院门诊就诊（或住院治疗）且需接受地中海贫血筛查的167例患者的临床资料，其中男性73例，女性94例；年龄23-75岁，平均（49.17±3.91）岁；身体质量指数（Body Mass Index，BMI）18.0-21.7kg/m2， 平均 BMI（19.87±0.56）kg/m2； 学历分布：初中27例，高中59例，大专及以上81例；婚姻状况：未婚49例，已婚118例。

1.2 入选标准

（1）纳入标准：①红细胞平均体积（Mean corpusular volume，MCV）减少者；②临床资料完整者；③红细胞平均血红蛋白量（Mean corpuscular hemoglobin，MCH）降低者；④地中海贫血携带家庭者；⑤产前孕妇与其丈夫接受地中海贫血筛查者。（2）排除标准：①缺铁性贫血者；②凝血功能障碍者；③传染性肝炎或肝硬化者；④严重器官功能衰竭者；⑤先天性心脏病者；⑥合并肿瘤患者；⑦表达障碍或精神疾病者；⑧过敏体质者。

1.3 方法

上述所有入选者均需在空腹状态下采集2-3mL肘静脉血，经枸橼酸钠抗凝剂给予抗凝操作，通过美国生产的伯乐D-10血红蛋白测试系统及其配套试剂盒测定HbA、HbA2以及HbF的含量，所有标本均需尽可能在当天完成检测，若未进行检测，需将采集到的血液标本保存在4℃环境下，次日完成检测，检测步骤均需严格按照仪器、试剂盒说明书内相关操作步骤进行。

1.4 评价指标

正常参考值（成人男女）：HbA2含量在2.5%-3.8%，且未发现异常血红蛋白带。若受检者存在异常血红蛋白带，例如血红蛋白H（Hemoglobin H，HbH）、血红蛋白Bart's（Hemoglobin Bart's，HbBart's）等，或者HbA2含量≤2.5%，提示为α地中海贫血表型阳性；若受检者HbA2含量＞3.8%，或者可见异常血红蛋白带，即HbF含量＞2.5%，提示为β地中海贫血表型阳性；若受检者出现血红蛋白J（Hemoglobin J，HbJ）、血红蛋白E（Hemoglobin E，HbE）等区带时，提示为其他血红蛋白病。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 不同性别地中海疾病类别筛查结果

167例受检者经血红蛋白分析，共筛查出47例地中海贫血表型阳性患者，占总检查人数的28.14%（47/167）。18例为α地中海贫血，阳性百分率为10.78%，其中2例同时可见HbBart's带，1例同时可见HbD带，1例同时可见HbCS带，1例同时可见HbBart's、HbCS以及HBH带；23例为β地中海贫血，阳性百分率为13.77%；2例为α+β混合地中海贫血，阳性百分率为1.20%；4例为其他血红蛋白病，阳性百分率为2.40%。此外，在47例地中海贫血表型阳性患者中，女性占57.45%（27/47），男性占42.55%（20/47）。见表1。

表1 不同性别地中海疾病类别筛查结果n(%)

2.2 不同地中海贫血表型中Hb含量对比

四组患者HbA、HbA2以及HbF含量对比，差异有统计学意义（P＜0.05）；α地中海贫血组患者HbA含量均高于α+β混合地中海贫血组患者以及血红蛋白病组患者，差异有统计学意义（t=3.453、5.976，P=0.003、0.000）；β地中海贫血组患者HbA2含量均高于α地中海贫血组患者、α+β混合地中海贫血组患者以及血红蛋白病组患者，差异有统计学意义（t=11.537、3.989、3.072，P=0.000、0.000、0.005）；α+β混合地中海贫血组患者HbF含量均高于α地中海贫血组患者以及血红蛋白病组患者，差异有统计学意义（t=9.544、3.827，P=0.000、0.019）。见表2。

表2 不同地中海贫血表型中Hb含量对比s，%）

表2 不同地中海贫血表型中Hb含量对比s，%）

组别 HbA HbA2 HbF α地中海贫血组（n=18） 93.34±2.93 1.54±0.44 1.16±0.24 β地中海贫血组（n=23） 91.96±4.24 5.03±1.22 3.37±2.03 α+β混合地中海贫血组（n=2） 75.06±27.61 1.45±1.16 5.22±2.21血红蛋白病组（n=4） 52.44±37.04 2.18±1.92 1.11±0.65 F 18.772 45.297 10.477 P 0.000 0.000 0.000

3 讨论

地中海贫血是因某种或多种珠蛋白肽链合成障碍等，致使珠蛋白肽链合成出现失衡现象，进而引发溶血性贫血。该疾病多发生于东南亚地区，为危害人类健康水平的一种遗传性贫血，且可对出生质量以及生活质量等产生负面影响[3]。有文献指出，全球存在1.8亿左右的无症状携带者，且在100万新生缺陷患儿中，约20万为重症地中海贫血[4]。在我国，长江以南地区患病率较高，包括四川、广东、海南、广西等省份，其中广西地区基因携带率可达至20.00%[5]。由于该疾病为基因遗传性疾病，两例地中海贫血患者生育重型地中海贫血新生儿的概率可达至25.00%以上，且预后风险较高。故探求有效筛查手段显得尤为重要。

地中海贫血包括α地中海贫血、β地中海贫血，前者是因α基因缺陷或基因缺乏而导致α珠蛋白生成障碍性贫血，当机体内α链缺乏时，体内多余的β链可进一步聚合为HbH，而当机体内α链完全缺乏时，体内多余γ链将进一步聚合为HbBart's，致使HbA2、HbA以及HbF等含量减少；后者是因β链合成受到完全或部分抑制而产生的一组血红蛋白病[6]。基因诊断技术为临床检测地中海贫血的金标准，但其检测费用昂贵，检测耗时较长，且对诊断技术要求较高，难以在基层医院开展，而血红蛋白电泳分析为临床用于分离以及诊断异常血红蛋白的重要手段，同时也是诊断血红蛋白病患者的有效方法，现已成为临床常用实验手段[7]。临床可通过对受检者Hb内区带给予检测，以判断其是否为阳性，同时可依据Hb中相关含量计算结果，将地中海贫血疾病初步划分为α地中海贫血以及β地中海贫血，对于无法确诊病例或Hb电泳异常者，则需进一步接受基因检测，以控制误诊以及漏诊等事件的发生。

传统血红蛋白电泳多为醋酸纤维薄膜电泳法，在检测过程中需对红细胞给予多次洗涤，制作血红蛋白液，给予点样以及电泳，而后剪取电泳区带，并且浸泡出红细胞液，进一步比色，计算各类Hb含量[8]。该检测技术易受操作因素、技术制约、试验条件等因素的影响，导致检测结果并不完全准确，而全自动血红蛋白电泳系统具有较高分辨率，可自动电泳、点样以及染色，利于简化操作程序，避免人工操作等客观条件产生的误差，提高定量检测准确度[9]。本研究结果显示，167例受检者经血红蛋白分析，结果显示，地中海贫血表型阳性占28.14%，其中18例为α地中海贫血，阳性百分率为10.78%，23例为β地中海贫血，阳性百分率为13.77%；2例为α+β混合地中海贫血，阳性百分率为1.20%，且不同地中海贫血表型中Hb含量存在一定差异性。周冰燚[10]等研究结果显示，广州地区16336例筛查者中，α地中海贫血占41.94%，β地中海贫血占23.19，α+β混合地中海贫血占4.00%，说明不同地域间地中海贫血情况存在明显差异性。该筛查手段可在一定程度上提高对α地中海贫血的检出率，但值得注意的是，缺特性贫血可对筛查特异性产生不同程度的影响，故在临床实际筛查过程中，需对可疑α地中海贫血患者给予铁代谢检查以及地中海贫血基因检测。167例入选者中，4例为其他血红蛋白病，阳性百分率为2.40%，提示血红蛋白电泳分析在异常血红蛋白中同样具有良好的分离效果。此外，高压液相色谱法适宜在基层单位以及高发地区普及使用，可为遗传咨询以及基因诊断提供较为可靠的参考依据。

综上所述，Hb分析在地中海贫血筛查中具有一定应用价值，临床可依据Hb各组分含量对地中海贫血类型给予初步分类，利于临床依据检测结果及时采取对应干预措施，将其用于产前筛查中，利于提高出生质量。